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一、方法

1．分組

依據電凝時功率（W）／電凝持續(xù)時間（s）／電凝間隔時間（s）3個變量組合將100只KM小鼠隨機分為七組（每只小鼠的電凝次數(shù)固定為5次）。組1－20W／0．5s／0．5s；組2－40W／0．5s／0．5s；組3－20W／1．0s／1．0s；組4－30W／0．5s／2．0s；組5－30W／1．0s／1．0s；組6－40W／0．5s／2．0s；組7為空白組。對除組7外的六組進行單極高頻電凝對小鼠陰莖、腎臟、睪丸損傷的病理實驗研究。空白組不做電凝處理，實驗結束時與實驗組同時取上述三臟器做病理檢查。實驗組每組16只，其中電凝后即刻處死4只，3d后處死8只，15d后處死4只。

2．小鼠陰莖、腎臟、睪丸電凝損傷動物模型的建立

將小鼠稱重后按4ml／kg計算麻醉劑量，然后以10％水合氯醛腹腔麻醉。使用電動推及脫毛膏對小鼠陰囊及背部備皮，術者用無菌鑷子夾持皮膚，眼科無菌剪刀將小鼠右側陰囊縱行剪開一約0．5cm刀口，逐層分離陰囊壁各層直至鞘膜。助手置小鼠于右手掌，右手拇指輕輕擠壓小鼠腹腔，借助腹腔壓力及重力將右側睪丸擠出。開啟高頻電刀機，調節(jié)功率，準備計時器，接著，以左手食指及拇指捏住小鼠雙耳，小鼠仰臥位置于絕緣手術臺，右手持電刀刀柄，開始電凝。電凝時，助手右手拇指同時接觸電刀開關和秒表開關，觀察秒表的時間顯示，到規(guī)定時間同時放開拇指。統(tǒng)一電凝睪丸中1／3前部5次。電凝后術者將睪丸輕輕回納入陰囊，以絲線將陰囊皮膚全層間斷縫合。接著同樣方式電凝陰莖側面包皮，我們選擇靠左上方。然后將小鼠翻過，背側皮膚安爾碘消毒，術者于背部略靠右方橫行切開小鼠皮膚，暴露皮下，切口約1cm，于緊靠脊柱附近橫行剪開背部肌肉，此時可看到右側腎臟埋于肝臟內下方，助手以右手食指輕輕將小鼠腹側向背側托起，使腎臟擠出，然后小鼠俯臥位置于絕緣手術臺，左手捏雙耳，右手持刀柄，以同樣方式電凝腎臟的下極5次。回納右腎，絲線分別間斷縫合皮下肌肉及皮膚。手術完成后，立即將小鼠保溫麻醉復蘇。每組小鼠置于同一籠內飼養(yǎng)。

3．小鼠器官病理切片的切取及保存

造模后，分別于術后即刻、3d、15d，將小鼠斷頸處死，3min內迅速取其臟器，打開陰囊，分離出睪丸，然后沿陰莖根部剪下陰莖，最后背部沿傷口處打開皮膚、肌肉，分離腎臟并取出，浸泡在10％的甲醛溶液中。4．病理切片的制作及電凝后顯微鏡下觀察：觀察切片結果后均請?zhí)K大附一院病理科兩位主治以上醫(yī)師進行核實，以確定觀察結果。通過顯微鏡下的標尺精確測量壞死面積，以壞死區(qū)的長軸與短軸的乘積表示，在40倍物鏡下，通過目鏡內縱向及橫向刻度測量壞死面積，計算時兩者相乘，以mm2為單位。

二、實驗病理結果

高頻電凝小鼠陰莖、腎臟、睪丸即刻病理結果：小鼠的陰莖、腎臟、睪丸表面出現(xiàn)細胞消失，結構破壞；內部均出現(xiàn)了不同程度的血管擴張、淤血，但均未發(fā)現(xiàn)壞死。陰莖：電凝陰莖包皮后，病理表現(xiàn)燙傷部位呈空泡狀，結構混亂。而陰莖海綿體內可見明顯的血管擴張伴淤血。腎臟：腎臟表面出現(xiàn)電凝造成的機械損傷，表現(xiàn)為細胞結構消失，殘余結構染色加深，實質內腎小球及腎小管無明顯改變，深處血管輕度擴張伴淤血。睪丸：電凝部位呈現(xiàn)空泡狀，結構混亂，伴出血，靠外層的曲細精管受到機械擠壓，睪丸血管可見擴張淤血。

作者:李云龍葉章群李巧星何瑋桂萌王偉錄王勇鄭紅芳嚴春寅單位：蘇州大學