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【摘要】目的研究女貞子炮制前后5-羥甲基糠醛（5-hydroxymethylfurfural，5-HMF）的含量變化。方法制備不同炮制條件的女貞子，采用HPLC法測定女貞子生品及炮制品中5-HMF的含量。結果女貞子生品未檢測到5-HMF，炮制后產生5-HMF，不同炮制品中的含量依次為：酒燉品＞清蒸品＞酒蒸品，且隨蒸制時間延長含量增加。結論首次建立了HPLC測定女貞子中5-HMF含量的方法，該法穩定可靠，可用于其質量控制；蒸制方法和蒸制時間均對5-HMF的含量變化有影響，這種改變是否與炮制增效有關，值得進一步研究。

【關鍵詞】女貞子；蒸制；5-羥甲基糠醛；高效液相色譜法

女貞子為木犀科植物女貞LigustrumlucidumAit.的干燥成熟果實，系臨床常用中藥，具有滋補肝腎，明目烏發之功效［1］。2005年版《中國藥典》規定其炮制方法為酒蒸或酒燉。女貞子酒制后補益作用增強。5-HMF是葡萄糖、果糖等六碳糖在酸水條件下的熱分解產物，廣泛存在于可發生糖的熱降解反應的食品和植物中。研究表明，5-HMF具有抗氧化、抗心肌缺血、改善血管微循環、促進免疫系統功能等藥理作用［2］，地黃、山茱萸等在蒸制過程中5-HMF含量均有較大幅度的增加［3,4］，目前尚未見女貞子中5-HMF的相關研究報道。因此，作者建立了女貞子中5-HMF的含量測定方法，并對不同蒸制方法制備的女貞子飲片中5-HMF的含量進行比較，為進一步研究女貞子的蒸制增效機理提供科學依據。

1材料

1.1儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀(在線脫氣機、四元泵、VWD檢測器)；電子分析天平（感量0.00001，北京賽多利斯儀器系統有限公司）；TCQ-250型超聲波清洗器（北京醫療設備二廠）。

5-HMF對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為111626-200804，HPLC色譜歸一化法測定純度＞98%）；圣塔黃酒（紹興市東湖酒業有限公司，總糖≤15.0g·L-1，酒精度≥8.0%）；乙腈為色譜純；娃哈哈純凈水；其他試劑均為分析純。

1.2實驗藥材

女貞子藥材（產地浙江）購自北京市白塔寺藥店，經北京中醫藥大學張貴君教授鑒定為木犀科植物女貞LigustrumlucidumAit.的干燥成熟果實。

2方法與結果

2.1炮制品的制備生品：去除枝梗后干燥成熟的女貞果實；清蒸品：凈女貞子100g，置蒸鍋內分別蒸4，8h，取出干燥；酒蒸品：凈女貞子100g，加黃酒20ml，拌勻，悶潤后置蒸鍋內分別蒸4，8h，取出干燥；酒燉品：凈女貞子100g，加黃酒20ml，拌勻，密閉，悶潤后置蒸鍋內分別燉4，8h，取出干燥。

2.25-HMF的含量測定

2.2.1對照品溶液的制備精密稱取5-HMF對照品5.98mg，置25ml的棕色容量瓶中，加無水甲醇至刻度，配成濃度為0.2392mg·ml-1的標準儲備液。精密量取5-HMF標準儲備液1.0ml，置25ml的棕色容量瓶中，加無水甲醇至刻度，配成濃度為9.568μg·ml-1的對照品溶液，搖勻，備用。

2.2.2供試品溶液的制備精密稱取樣品粉末（過40目篩）1.0g，精密加80%甲醇20ml，稱重，室溫超聲20min，放置，加80%甲醇補足重量，搖勻，過濾，然后過0.45μm的微孔濾膜，取續濾液，作為供試品溶液，備用。

2.2.3色譜條件色譜柱：DiamonsilC18（4.6mm×250mm，5μm），流動相：乙腈-水（12∶88），流速：1.0ml·min-1，柱溫：25℃；檢測波長：284nm，進樣量：10μl。

2.2.4方法學考察標準曲線的繪制：分別精密吸取5-HMF對照品溶液1，2，4，6，8，10μl，注入高效液相色譜儀，分別在上述色譜條件下測定峰面積。以標準品質量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，得回歸方程：Y=7568.8X+9.1066，r=0.9999。結果表明，5-HMF在9.568×10-3～95.68×10-3μg范圍內線性關系良好。

精密度實驗：取9.568μg·ml-1的5-HMF對照品溶液連續進樣6次，每次10μl，測定峰面積，結果RSD為0.80%，表明儀器精密度良好。

重復性實驗：精密稱取酒燉8h女貞子飲片1.0g，照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，進樣10μl，測定峰面積，結果RSD為2.73%，表明該方法重復性良好。

穩定性實驗：精密稱取酒燉8h女貞子飲片0.9995g，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，于配置后0，2，4，6，8，10h分別進樣10μl，測定峰面積，計算RSD為1.89%，表明供試品溶液在10h內穩定。

回收率實驗：精密稱取酒燉8h女貞子飲片0.5g，加入濃度為0.2392mg·ml-1的對照品儲備液100μl，按“2.2.2”項下方法制備樣品溶液，進樣10μl測定峰面積，重復6次，計算平均回收率為100.03%，RSD為2.70%。

2.2.5炮制品含量測定將不同蒸制方法制備的女貞子炮制品，照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，進樣10μl，依法測定峰面積，計算含量。色譜圖見圖1，結果見表1。表1女貞子樣品5-HMF含量測定結果（略）

3討論

由實驗結果可知，女貞子生品不含5-HMF，蒸制后產生，其含量依次為酒燉8h＞清蒸8h＞酒燉4h＞清蒸4h＞酒蒸8h＞酒蒸4h。即相同蒸制時間下，酒燉品＞清蒸品＞酒蒸品。若蒸制方法相同，則隨蒸制時間的延長5-HMF含量明顯升高。表明蒸制方法和蒸制時間對女貞子中5-HMF含量的影響不同。

酒燉品收率和5-HMF含量均明顯高于清蒸品和酒蒸品，可能與密閉蒸時可防止酒的揮散及水溶性成分流失有關。表明女貞子傳統常采用酒燉的方法炮制具有一定的科學性。

本文建立了女貞子中5-HMF的HPLC含量測定方法，該方法操作簡單，結果穩定可靠，可為女貞子的質量控制提供科學依據。

女貞子蒸制過程中5-HMF含量的變化規律與糖類成分的變化之間的關系以及與補益作用增強的關系正在進一步研究中。超級秘書網：

【參考文獻】

［1］國家藥典委員會．中國藥典,Ⅰ部［S］．北京：化學工業出版社，2005：31．

［2］耿放，王喜軍．5-羥甲基-2-糠醛（5-HMF）在中藥復方中研究現狀及相關藥效探討［J］．世界科學技術-中醫藥現代化，2005，7（6）：52．

［3］朱梅芬，劉向前，吳柱熹，等．地黃的炮制對梓醇和5-羥甲基糠醛含量的影響［J］．中國中藥雜志，2007，32（12）：1155.

［4］杜偉鋒，丁霞，蔡寶昌．山茱萸炮制前后5-羥甲基糠醛的含量變化研究［J］．中成藥，2007，29（12）：1801.