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消毒劑對平菇與雜菌影響研究

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消毒劑對平菇與雜菌影響研究

本文作者:覃寶山覃勇榮作者單位:河池學院化學與生命科學系

二氧化氯作為一種新型的廣譜消毒劑,具有用量少、作用快、效率高等優點而被廣泛應用于水處理、食品工業、農業、水產及醫療衛生等領域[1-6]。近年來,二氧化氯也逐漸應用于食用菌栽培領域[7-10]。在食用菌栽培過程中,必須防止其他微生物的污染,傳統的防治方法是利用常壓蒸汽滅菌法或高壓蒸汽滅菌法對培養料進行滅菌[11-12]。這兩種滅菌方法,需要投入大量的人力和物力,對設備的要求較高,滅菌過程耗時、耗能,栽培成本比較高,與當今推行的節能減排、綠色種植理念不符。因此,尋找一種新的方法和手段替代傳統的滅菌工藝具有重要意義。對此,筆者等以二氧化氯為消毒劑對平菇進行栽培試驗,探討二氧化氯濃度、活化時間及消毒時間對平菇菌絲生長及雜菌的防治效果,以期尋找簡便可行的消毒方法指導生產實踐。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試菌株

平菇P615,江蘇省江都市天達食用菌研究所。一級菌種培養基為PDA培養基,擴繁1次;二級和三級菌種參考文獻[11-12]的方法,以谷粒和桑枝屑為基質進行制作。

1.1.2試驗藥劑

秀霸牌穩定態二氧化氯一元粉劑〔二氧化氯含量(10±0.8)%〕,購自山東濰坊華實藥業有限公司。

1.1.3栽培原料

栽培配方:桑枝70%、米糠20%、稻草6%、石膏2%、五氧化二磷2%。所有原料均要求新鮮、干燥、無霉變,試驗前將稻草、桑枝切碎備用。

1.2方法

1.2.1試驗設計

采用二氧化氯濃度、活化時間和消毒時間3個因素進行單因素試驗。將一定量的穩定性二氧化氯粉劑倒入水中,攪拌溶解后,密閉靜置一定時間,即可得到所需濃度消毒液。活化時間是指將配制二氧化氯消毒劑的水溶液密封放置至拌入培養料所經歷的時間。消毒時間是指二氧化氯消毒劑水溶液拌入培養料至接種時料袋放置的時間。每種處理均設5個平行。試驗數據處理用Excel2003進行,結果取平均值。

1)二氧化氯濃度。二氧化氯濃度(處理1~10)分別為20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L、120mg/L、140mg/L、160mg/L、180mg/L和200mg/L,活化時間10min,消毒時間72h。

2)消毒時間。消毒時間(處理1~10)分別為12h、24h、36h、48h、60h、72h、84h、96h、108h和120h,二氧化氯濃度120mg/L,活化時間10min。

3)活化時間。活化時間(處理1~10)分別為2min、4min、6min、8min、10min、12min、14min、16min、18min和20min,二氧化氯濃度為120mg/L,消毒時間為72h。

1.2.2栽培方法

按試驗設計要求配制相應的消毒劑稀釋液,將培養料與消毒劑稀釋液混合拌勻,用47cm×23cm×0.05cm的聚乙烯塑料袋裝料并編號,每袋折合干料1kg,然后按要求放置一段時間,定時接種。接種時,在酒精燈旁的無菌區內進行,所用的原種菌袋表面、接種鉤和手在接種前用75%的酒精消毒,接種時將菌種均勻撒播在袋口料面,稍加按壓后套上塑料頸圈,外加消過毒的報紙封口。接種后進入菌絲培養管理,期間注意通風、避光,保持干燥,根據當時氣溫靈活堆碼發菌,并定時翻袋,控制料溫。菌絲長滿菌袋后,繼續培養5~10d,促進其進一步成熟。當料口有淡黃色分泌物出現時,轉入出菇管理階段。及時增加光照,噴水,加強通風,拉大溫差,促進原基形成。當菌袋口料面分化出珊瑚狀的菌蕾時,將封口的報紙去掉,期間注意保濕,通風換氣,菇體成熟后適時采收。

1.2.3觀察與記錄

定期觀察與記錄雜菌感染情況和平菇菌絲生長狀況,統計菌袋感染數,測量菌絲的生長速度,計算菌絲的平均生長速度及菌袋感染率。生長速度=菌絲長度/天數平均生長速度=每次測出的生長速度之和/次數菌袋感染率=(感染的菌袋數/栽培的菌袋數)×100%

2結果與分析

2.1二氧化氯濃度、消毒時間和活化時間對雜菌的防治效果

不同濃度的二氧化氯消毒劑拌料栽培平菇,對雜菌防治效果不一樣。二氧化氯濃度為120~200mg/L的處理對食用菌雜菌的防治效果較好,感染率為0,二氧化氯濃度低于120mg/L的實驗處理均有雜菌感染,感染率為40%。說明,二氧化氯濃度過低對雜菌的防治效果不明顯。不同消毒時間對雜菌防治的效果良好,感染率均為0。表明,試驗設定的消毒時間對雜菌的防治效果沒有影響。即二氧化氯消毒劑在10min內活化后配制成120mg/L的濃度拌入培養料,料袋放置12~120h后再接種,均可有效防治雜菌污染。不同活化時間對雜菌防治的效果良好,感染率均為0。說明,試驗設定的活化時間對雜菌防治的效果沒有影響,即二氧化氯消毒劑在2~20min內活化后配制成120mg/L的濃度拌料,料袋放置72h后再接種,均可有效防治雜菌污染。

2.2二氧化氯濃度、消毒時間和活化時間對平菇菌絲生長的影響

從表中看出:

1)二氧化氯濃度。處理1~6二氧化氯濃度低于或等于120mg/L,平菇菌絲萌發較早,生長速度較快,長勢較旺;處理7~10二氧化氯濃度高于120mg/L,平菇菌絲萌發較晚,生長速度較慢,長勢較弱。原因是在相同消毒時間內,二氧化氯濃度過高,其在培養料內的殘存量較多,在殺滅雜菌的同時也抑制了平菇菌絲的生長。

2)消毒時間。處理1~5消毒時間低于72h,菌絲萌發較晚,菌絲色澤淡白,粗細與整齊度一般,長勢較弱;處理6~10消毒時間等于或高于72h,菌絲萌發較早,菌絲較粗、較密,整齊度較好,長勢較旺。原因是料袋內二氧化氯的殘存量與消毒時間有關,隨著消毒時間的延長,殘留在料袋內的二氧化氯相對減少,其對平菇菌絲生長的抑制作用也隨之減弱。

3)活化時間。平菇菌絲在2~5d內萌發,各種不同處理的平菇菌絲長勢略有差異。其中,處理1、處理3和處理5~6的菌絲潔白,比較整齊,長勢較好;處理7~10菌絲稀疏不整齊。原因是活化時間與二氧化氯的釋放有關,在配制二氧化氯水溶液時,二氧化氯釋放的量通常隨活化時間的增加而逐漸增大,直至一定水平后保持不變。

3討論與結論

1)試驗結果表明,低濃度二氧化氯處理對雜菌的防治效果不明顯,感染率較高,高濃度二氧化氯處理對雜菌的防治效果較好;消毒與活化時間對雜菌防治效果的影響不大,其原因有待研究。但在生產實踐中,要獲得良好的生物學效益,必須考慮消毒時間與活化時間對食用菌菌絲生長的影響。

2)雖然高濃度的二氧化氯對雜菌的防治效果顯著,但同時也抑制了平菇菌絲的生長。這是因為高濃度的二氧化氯在培養料內殘存量較多,對平菇菌絲的生長有抑制作用,尤其在接種初期更為突出。因此,利用二氧化氯消毒劑拌料栽培平菇時,不能單方面從殺滅雜菌的角度考慮二氧化氯劑量,還要考慮二氧化氯對平菇菌絲生長的影響,從而獲得更高的生物學效益。消毒時間對平菇菌絲生長有一定的影響。培養料內二氧化氯的殘存量與消毒時間有關,隨著消毒時間的延長,殘留在料袋內的二氧化氯相對減少,其對平菇菌絲生長的抑制作用也隨之減弱,所以消毒時間短,平菇菌絲長勢較弱;消毒時間長,平菇菌絲長勢較旺。活化時間與二氧化氯的釋放有關,二氧化氯釋放速度對平菇菌絲生長影響的機理有待進一步研究。

3)二氧化氯作為一種新型的消毒劑,越來越多地應用于食用菌栽培領域,在生產實踐中,為了獲得最佳的效益,必須綜合考慮二氧化氯的濃度、消毒時間以及活化時間三者的優化組合。在當前大力推廣綠色種植、生態工藝、節能減排的形勢下,利用二氧化氯消毒劑拌料栽培食用菌具有積極的意義,雖然它可以代替傳統的滅菌方法,簡化栽培工藝,降低栽培成本,節省人力物力,但是食品安全問題不容忽視。在食用菌栽培過程中使用二氧化氯消毒劑,有必要對藥物殘留及相關問題做進一步的調查論證,以確保安全。

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