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1材料與方法

由浙江大學動物科學院蠶蜂研究所提供，分別設置103spore/ml、105spore/ml、107spore/ml等3種不同濃度。供試蠶品種：“無毒”秋豐、白玉原種，由浙江省蠶種質量檢驗檢疫站提供。供試“無毒”母蛾：由浙江省蠶種質量檢驗檢疫站提供一樣本檢驗“無毒”的二樣本蛾盒。飼養和感染供試的“無毒”秋豐、白玉原種，由浙江省農科院蠶桑研究所按DB33/T217.4-2007《桑蠶種繁育規程》飼養至4齡大眠，提供給浙江大學動物科學學院添毒用大眠蠶1600條；浙江大學動物科學學院蠶蜂研究所在5齡起蠶時，分別添食103spore/ml、105spore/ml、107spore/ml等3種不同濃度的微粒子蟲孢子懸浮液。添毒后按常規方法飼養至化蛹，鑒別雌、雄蠶蛹備用。制種試驗區雌蛹化蛾當天下午14~16時按無性克隆制種方式摘除輸卵管和蠶卵，摘除輸卵管和蠶卵后的蛾體60℃烘干后備檢。對照區雌蛹化蛾后與對交品種雄蛾交配產卵，產卵的母蛾待自然死亡后60℃烘干備檢。微粒子病靈敏度檢測將感染母蛾與“無毒”母蛾以1∶27的比例混合。母蛾鏡檢由浙江省蠶種質量檢疫檢驗站按DB33/T217.3-2007《桑蠶種母蛾檢疫規程》3.6規定的檢疫流程進行磨蛾、過濾、離心、鏡檢，調查檢出率。以“無毒”母蛾（28蛾/盒）鏡檢結果作為陰性對照數據處理使用MicrosoftExcel2003程序，對試驗數據進行方差分析，百分數進行Sin-1（P）1/2轉換。

2結果與分析

不同制種方式的母蛾微粒子病檢出率將雌蠶無性克隆（試驗區）和常規交配制種（對照區）的母蛾微粒子病檢出率進行了統計分析2.2不同制種方式的母蛾微粒子病檢出率方差分析對不同制種方式、不同感染濃度母蛾微粒子病檢出率作無重復雙因素方差分析。通過分析發現，不同感染劑量對母蛾微粒子病檢出率影響顯著：F（劑量）=13.494＜Fcri（t臨界值）=5.143P（概率）=0.006＜0.01而不同制種方式對母蛾微粒子病檢出率沒有表現出明顯差異：F（制種方式）=1.828＜Fcri（t臨界值）=4.757P（概率）=0.242＞0.05綜合以上檢測數據，可以發現實驗區與對照區的微粒子病檢出率沒有顯著差異，說明摘除卵管和蠶卵的母蛾對微粒子病的檢疫沒有產生不良影響。

3討論

本次試驗表明，雌蠶無性克隆和常規交配制種條件下的母蛾微粒子病檢出率沒有顯著差異，說明雌蠶無性克隆繁殖方式下的母蛾對微粒子病的檢疫沒有產生不良影響。母蛾只要受到微粒子病感染，按1：27的比例混合，即使摘除卵管和蠶卵，其檢測靈敏度也是足夠的。不同感染劑量對微粒子病檢出率有顯著差異，暗示了不同感染劑量對母蛾感染率有顯著影響，添食劑量達到一定濃度，母蛾100%感染。以上結果為制定雌蠶無性克隆系原種檢疫標準提供相關的數據。

作者：徐杰魯興萌單位:浙江省蠶種質量檢驗檢疫站