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【摘要】目的：觀察葛根素注射液對去卵巢大鼠血清雌二醇(E2)水平的影響。方法：大鼠50只，分為葛根素高劑量組、葛根素低劑量組、倍美力組、模型組、假手術組，每組10只。除假手術組外，均摘除大鼠卵巢造成去勢模型。造模后第7天，檢測大鼠血清E2水平，確定造模成功后，相應予葛根素注射液、倍美力水溶液、生理鹽水灌胃。各組用藥后30天測血E2含量。結果：用藥30天后，模型組大鼠血清E2水平明顯低于其它四組，差異有顯著性意義(P<0.01)。結論：葛根素注射液可以提高去卵巢大鼠血清E2水平，具有雌激素樣作用。

【關鍵詞】大鼠圍絕經期葛根素注射液雌激素樣作用

AbstractObjective:Toinvestigatetheeffectofpuerarininjectiononserumestradiolinfemaleratswithovaryremoved.Methods:SDratsweredividedtohighdosepueraringroup,lowdosepueraringroup,premaringroup,controlgroup,andshamoperationgroup,10ratsineach.Ovariectomizedmodelwasestablishedinallgroupsexceptshamoperationgroup(asuccessfulmodelwasidentifiedbydetectingthelevelofestradiolonthe7thpostoperativeday).Thelevelofestradiolwasdeterminedonthe30thdayafteradministrationofpuerarininjection,premarinsolution,andsaline,respectively.Results:Thelevelofestradiolwassignificantlylowerinthecontrolgroupcomparedtoother4groups(P<0.01).Conclusion:Puerarininjectionhasestrogenlikeeffectbyincreasingtheserumlevelofestradiolinovariectomizedrats.

Keywordsratperimenopausepuerarininjectionestrogenlikeeffect

圍絕經期綜合征是指婦女在圍絕經期過程中，由于卵巢功能衰退，體內雌激素水平降低導致神經內分泌系統功能失調，引起植物神經功能紊亂和精神神經癥狀等一系列臨床癥候群。雌激素替代療法(ERT)是目前臨床上治療婦女圍絕經期綜合征的經典方法。但長期使用雌激素可能增加乳腺癌及子宮內膜癌的風險，即使與孕激素合用也不能完全消除這種危險[1]。因此尋找一種理想的ERT藥物，能選擇性地作用于心、腦、骨骼等器官，又盡可能減少對子宮、卵巢、乳房的副作用，是ERT研究的重要任務。目前國內外研究顯示某些植物激素(如大豆異黃酮)具有雌激素相似的作用，卻沒有誘發腫瘤之虞[2，3]。

從中藥葛根中所提取的葛根素，其結構與大豆異黃酮相似，而其異黃酮的含量為大豆的幾十甚至上百倍[3]。本研究采用去卵巢大鼠模型模擬絕經后大鼠，用葛根素注射液灌胃，觀察其對去卵巢大鼠雌激素分泌水平的影響，觀察葛根素注射液是否具有雌激素樣作用，現報道如下。

1材料與方法

1.1實驗動物健康雌性SD大鼠50只,清潔級,18月齡(相當于生育期),體重220～250g，由浙江中醫藥大學動物實驗中心提供。

1.2實驗藥物葛根素注射液(浙江康恩貝制藥股份有限公司，每2ml約含葛根素100mg，批號：020710);倍美力片劑(美國惠氏艾爾斯特公司艾爾斯特大藥廠，每片含有0.625mg雌二醇，批號：0509125);生理鹽水(石家莊四藥股份有限公司，批號041018502)。

1.3試劑和儀器E2試劑盒(大連泛邦化工技術開發有限公司);20℃科龍BCD246AK3低溫冰箱(廣東科龍電器股份有限公司)。

1.4實驗方法

1.4.1動物造模健康雌性SD大鼠50只，稱重編號后，隨機抽取10只為假手術組。余40只大鼠開腹，結扎切除卵巢，造大鼠去勢模型。假手術組不切卵巢，僅切除卵巢周圍少許脂肪。

1.4.2分組給藥去勢大鼠隨機分葛根素高劑量組、葛根素低劑量組、陽性對照組、模型組，每組10只。造模后第7天開始，葛根素高劑量組予葛根素注射液120mg/(kg·d)，葛根素低劑量組予葛根素注射液60mg/(kg·d)，倍美力組予倍美力水溶液0.07mg/(kg·d)，模型組與假手術組予生理鹽水2ml，灌胃，均1天1次。各組在造模后7天及用藥后30天分別取血，用酶聯法測血E2含量。

1.4.3標本采集于毛細血管眼底靜脈叢采血1.5ml，靜置1小時后，用離心機3000r/min離心20min，取上清液于安倍管，20℃冰箱保存。

1.4.4血情E2測定根據試劑盒的要求，檢測血清標本中的E2含量。

1.5統計學方法采用SPSS11.5軟件處理。計量資料以(±s)表示，采用單因素方差分析(OneWayAnova)，進行不同組間均數兩兩比較,以P<0.05為差異有顯著性意義，P<0.01為差異有高度顯著性意義。

2實驗結果

2.1造模后第7天大鼠血清E2水平各組去卵巢大鼠血清E2水平均低于假手術組，差異有顯著性意義(P<0.01)，說明造模成功。見表1、圖1。表1造模后第7天血清E2水平比較與其他四組比較，△△P<0.01圖1五組大鼠造模7天血E2值

2.2用藥30天后大鼠血清E2水平與模型組比較，葛根素高、低劑量組，倍美力組和假手術組大鼠血清E2水平均明顯增高，差異有顯著性意義(P<0.01)，見表2、圖2。表2用藥30天后大鼠血清E2水平比較與其他四組比較,△△P<0.01圖2五組大鼠治療30天后血E2值

3討論

植物雌激素(PE)是一類廣泛存在于植物、水果和蔬菜中的非甾體類化合物，其結構和生物活性均類似于雌激素。植物雌激素依據分子結構的不同主要分為三大類：異黃酮類、木脂素類和香豆素類[4]，均以無活性的前體形式存在于植物中。其中，最受關注的是異黃酮類化合物。近年來，已認識到植物雌激素是具有雌激素效能的天然化合物，可以從植物中獲取并將其活化，發揮雌激素作用[5]。國內外較多學者關注利用這些雌激素樣作用預防和治療雌激素缺乏相關疾病，用以取代激素替代療法(HRT)以減少其副作用。植物雌激素被作為激素替代治療的“天然”代用品，在預防和治療婦女圍絕經期綜合征方面也受到大量研究。大豆異黃酮是植物雌激素的最主要來源。有資料顯示，大豆異黃酮對雌性動物的內分泌有調節作用[6，7]，可作為雌激素的替代物。葛根素(puerarin)由豆科葛屬植物中提取，成分為4,7二羥基8βD葡萄糖基異黃酮。目前國內已有學者應用葛根素治療去卵巢大鼠鼻黏膜萎縮和預防骨質疏松[8，9]，均取得了肯定的效果，推測可能與葛根素的雌激素樣活性有關。

大鼠卵巢切除術(ovariectomy，去勢)是一種良好的雌激素缺乏模型[10]，是國際上研究婦女圍絕經期內分泌特點所普遍采用的造模方法。本實驗應用此模型來探討葛根素與倍美力(倍美力是從孕馬血清中提純的結合雌激素，是一種動物源性雌激素制劑，含多種成分，主要為17β雌二醇和雌酮)的雌激素樣作用的異同，以更好地了解葛根素的雌激素樣作用及其作用機制。實驗結果顯示，造模后第7天去卵巢大鼠血清E2水平均低于假手術組，差異有顯著性意義(P<0.05)，說明造模成功。假手術組因為保留卵巢，仍具有正常激素水平，故E2水平顯著高于其它各組。各組用藥30天后，葛根素注射液高、低劑量組、倍美力組、假手術組的E2水平均高于模型組，差異有顯著性意義(P<0.05)，而此四組之間無顯著性差異。提示大鼠去卵巢后導致血清E2水平下降，補充雌激素使血清E2水平明顯升高，葛根素具有與倍美力相同的上調血清E2水平的作用，這對于維持去卵巢大鼠神經內分泌系統具有重要意義。

本研究結果提示，葛根素具有雌激素樣作用，但并未顯示出一定的量效關系。其次，葛根素和倍美力分別是植物源性雌激素和動物源性雌激素，它們與兩種雌激素受體ERα和ERβ的親和力是否相同，是否與同種雌激素受體結合起作用，有待進一步探討。

【參考文獻】

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3郭建平,孫其榮,周全,等.葛根總黃酮不同提取工藝探討.中草藥，2000，26(10)：522523

4白曉霞.植物雌激素與傳統的激素替代療法.國外醫學婦幼保健分冊,2002,13(3):113115

5陳慧.植物雌激素與雌激素相關性疾病.國外醫學內分泌學分冊,2000,20(4):208

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7MukiesAL,LombardC,SstraussBJ,etal.Dietaryflowsupplementationdecreasespostmenopausalhotflushes:effectsofsoyandwheat.Maturitas,1995,21(3):189

8戚本明，王正強，鄭明秀,等.葛根總黃酮治療去勢大鼠鼻黏膜萎縮的研究.臨床耳鼻咽喉雜志,2001,15(8):366

9鄭高利，張信岳，方曉林,等.葛根素對去卵巢大鼠骨礦密度和骨強度的影響.中草藥,2001,32(5):422

10SinghM,MeyerEM,MillardWJ,etal.OvariansteroiddeprivationresultsinareversiblelearningimpairmentandcompromisedcholinergicfunctioninfemaleSpragueDawleyrats.BrainRes,1994,644(2):305312