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【摘要】目的用大鼠佐劑性關節炎（AA）動物模型，探索錦雞兒對大鼠關節炎的治療機制。方法用弗氏完全佐劑誘導建立大鼠關節炎模型，用容積法對大鼠足部體積進行測定。結果經錦雞兒治療后，能明顯改善AA大鼠的關節炎癥狀，可抑制大鼠的足腫脹和繼發炎癥。關節炎腫脹度和關節炎指數均明顯低于對照組（P<0.05;P<0.001）。關節液中IL-1、IL-6水平明顯低于AA大鼠組。結論錦雞兒煎劑對佐劑性關節炎有良好的治療作用，其可降低炎癥區域內的含量，應是錦雞兒抗炎作用的機制之一。

【關鍵詞】錦雞兒煎劑;佐劑性關節炎;關節腫脹度;關節炎指數;IL-1;IL-6

錦雞兒是一種植物，具有祛風、活血利濕等功效。中國人民解放軍第二九一醫院曾報道用錦雞兒治療系統性紅斑狼瘡，取得較好療效，且無副作用［1］。包頭醫學院第一附屬醫院也曾對錦雞兒治療類風濕性關節炎進行了臨床觀察，證明錦雞兒屬植物在緩解本病的癥狀上有良好的治療效果，長期應用未見不良反應［2］。實驗藥理學研究證明錦雞兒具有抗炎作用及免疫功能抑制作用［3～5］。日本學者SnsumuKitanaka等也證明錦雞兒乙醚提取液對小鼠角叉菜膠性足跖腫脹有明顯抗炎作用［6］。大鼠佐劑性關節炎（adguvantarthritis,AA）是常用的實驗模型之一，其組織病理及血液變化與人類相似，常用于抗風濕藥物的篩選和研究［7］。本文利用此模型以探索錦雞兒對大鼠關節炎治療的機制，現報告如下。

1材料與方法

1．1動物Wistar大鼠，雌雄各半，體重（170±20）g，由本院動物實驗中心提供。

1．2藥品取錦雞兒根切碎后用水煎煮2次，每次30min，將2次水煎劑合并后調整濃度為500%。弗氏完全佐劑（Frend’scompmeteadguvant，FCA），IL-1、IL-6均為美國sigma公司產品。

1．2．1大鼠佐劑性關節炎（AA）的制備［8］及觀察指標將大鼠右后肢拉直，用1ml注射器自足跖中部皮下向下注射弗氏完全佐劑，每只大鼠注射0.1ml（100mg/ml）。

1．2．2動物分組與給藥取30只大鼠雌雄各半，隨機分為正常對照組、蒸餾水組、錦雞兒煎劑組，每組10只。造模前用容積法測量正常狀態下大鼠右后肢足跖容積一次，造模后第3天開始灌胃給藥，2ml/100g體重，每天1次，連續18天。造模后第5、11、15、21天各測量足跖容積1次，計算大鼠右后足跖腫脹度（腫脹度=致炎后足跖容積-致炎前足跖容積）。在造模后第11、15、19天觀察累及關節炎指數，取平均值與對照組比較，進行統計學檢查。

1．2．3關節炎指數（AI）計算參考薛彬的方法［9］。根據未注射的其余3只肢體的病變程度以及趾間跖間是否發炎累及積分算出關節炎指數。對前肢的腕、掌指關節，后肢的踝、趾關節打分。標準如下，0分：無紅腫；1分：小趾關節紅腫；2分：指關節和足趾均紅腫；3分：踝關節以下紅腫；4分：包括踝關節全部紅腫。把每個關節的得分累積起來即為每只大鼠的關節指數。

1.2.4關節液的獲取致炎21天，處死大鼠，在非致炎側踝關節上方0.5cm處剪下腫脹足爪，剝下皮膚，縱向切開，放入盛有5ml生理鹽水的試管中，于4℃浸泡過夜，離心取上清，－20℃保存待測。IL-1、IL-6含量檢測采用夾心法，檢測步驟按產品說明書進行。

1．2．5統計學處理均以x±s表示，兩樣本均數比較采用t檢驗。

2結果

2．1錦雞兒對大鼠關節腫脹的影響見表1。Wistar大鼠注射佐劑后，第2天出現明顯腫脹，1周后逐漸消退，12天時再次腫脹并產生全身炎癥變化，在耳朵、尾部、前肢以及左后肢均出現紅斑、腫脹、血管周圍炎等，大鼠爬行困難，活動、進食均減少，皮毛暗淡無光澤。治療18天后錦雞兒組大鼠所出現的癥狀相對較輕，進食、活動情況較好。與其他組大鼠足腫脹度的平均值做比較，錦雞兒組大鼠足腫脹度明顯小于對照組，差異有顯著性。表1錦雞兒煎劑對大鼠關節炎腫脹度的影響注：與AA對照組比較，P＜0.05

2．2錦雞兒對大鼠關節炎指數（AI）的影響見表2。治療18天后錦雞兒組大鼠關節炎指數較AA對照組大鼠比較明顯降低，差異有顯著性。表2錦雞兒煎劑對大鼠關節炎指數（AI）的影響注：與AA對照組比較，P＜0.001

2．3錦雞兒煎劑對大鼠關節液內IL-1、IL-6含量的影響錦雞兒治療21天處死動物，監測關節液內IL-1、IL-6的含量。結果表明經錦雞兒治療后大鼠關節液內IL-1、IL-6含量明顯降低。見表3。表3錦雞兒煎劑對大鼠關節液內IL-1、IL-6含量的影響注：與正常對照組比較，**P＜0.001；與AA對照組比較，*P＜0.05

3討論

錦雞兒是內蒙地區盛產的一種植物，藥用其根和莖。其根性平，味微辛，具有祛風、活血利濕等功能。有研究表明［3～6］錦雞兒有一定抗炎與免疫抑制作用。臨床上用于治療紅斑狼瘡［1］、類風濕關節炎［2］均取得良好效果。

大鼠佐劑性關節炎是人類RA的動物模型，其原發病變主要表現為致炎局部的急性炎癥反應，繼發病變出現于致炎后10天左右，主要表現為多發性關節炎，病理組織學特征可見滑膜充血水腫增生、單核巨噬細胞浸潤、纖維素沉著、關節軟骨破壞等。單核巨噬細胞分泌的炎性細胞因子直接介導炎癥損傷。許多研究結果顯示細胞因子可通過介導細胞與細胞之間的相互作用，可引起組織損傷酶的釋放而導致關節損傷。

IL-1是一種具有多種生物活性并能作用于體內多種組織和器官的細胞因子。它在局部和全身炎癥及免疫反應中起核心作用，能誘導其他炎癥細胞因子（如IL-6）、趨化因子、黏附分子、急性時相蛋白等的合成。IL-1是介導AA發病的重要細胞因子之一，可以產生對中性粒細胞等炎癥細胞的趨化作用，吸引其進入關節病變部位，從而引起一系列關節病變。

IL-6主要由T、B細胞和單核巨噬細胞分泌的細胞因子。在機體的炎癥反應和免疫調節過程中發揮重要作用，可協同IL-1的免疫調節作用。IL-1、IL-6在AA發病中是潛在的破壞骨樣細胞增長的刺激因子。它們作為重要的炎癥、免疫介導因子參與AA的病理過程。

本文利用模型進行實驗研究，說明錦雞兒能明顯抑制佐劑性大鼠足腫脹，能降低關節炎指數。表明錦雞兒煎劑對大鼠原發病變有明顯抑制作用，對繼發病變也有較好的治療作用。錦雞兒煎劑能降低炎癥區域內炎性細胞因子的含量，因是其抗炎作用的機制之一。細胞因子及各種炎癥介質不是單獨發揮作用的，而是呈網絡形式相互作用的，在這個網絡中錦雞兒如何發揮其抗炎作用，有待進一步研究。

【參考文獻】

1中國人民解放軍291醫院內二科.錦雞兒和鹵水提取液治療紅斑狼瘡36例初步臨床觀察.包頭科技（衛生版）1975，（3-4）：35-38.

2杜學武,郭曉玲,郭春林.錦雞兒治療類風濕關節炎臨床研究.中國民族醫藥雜志，1998，4（2）：11-13.

3張煒平，徐繼輝，田德真,等.樹錦雞兒抗炎作用的研究.包頭醫學院學報,1992，9：2

4張煒平，徐繼輝，田德真,等.錦雞兒煎劑對小鼠體液免疫功能的影響.包頭醫學院學報,1992，9（2）：10.

5湖蔭，徐繼輝，田德真,等.錦雞兒煎劑對小鼠細胞免疫功能的影響.包頭醫學,1992，16（4）：148.

6SusumuKitanaka（＋）－Viniferinananti-inflammatorycompoundfromcaraganachamlaguRootchem.,pharm,Bull.1990,38(2):432-435.

7周金黃.藥理學進展（19820）抗炎免疫藥物分冊.北京：人民衛生出版社，1983,182-183.

8徐淑云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學.第2版,北京：人民衛生出版社，1991：723-724.

9薛彬.免疫毒理學實驗技術.北京：北京醫科大學中國協和醫科大學聯合出版社，1995，58.