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【摘要】目的探索黃芩的新型提取方法。方法采用紫外分光光度法測定黃芩苷含量，比較水提法與液-液連續萃取法對黃芩苷提取率的差別。結果水提法與液-液連續萃取法對黃芩苷提取率差異有顯著性。結論液-液連續萃取法是一種新型高效提取方法。

【關鍵詞】黃芩；液-液連續萃取法

【Abstract】ObjectiveTostudyanewextractionmethodforbaicalininradixscutellariae.MethodsUltravioletspectrophotometrymethodwasusedtodeterminethecontentofbaicalin.Theabstractionrateofbaicalinbywaterextractionwascomparedtothatofliquid-liquidcontinuousextractionmethod.ResultsTherewasasignificantdifferencebetweenthetwomethods.ConclusionTheliquid-liquidcontinuousextractionmethodisanewandhighefficiencyseparationmethod.

【Keywords】RadixScutellariae;liquid-liquidcontinuousextractionmethod

黃芩（RadixScutellariaebaicalensis）為唇形科植物黃芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干燥根。具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎之功，用于發熱煩躁、肺熱咳嗽、瀉痢熱淋、濕熱黃疸、胎動不安、癰腫瘡毒等癥［1］。主要有效成分是黃酮類：黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩苷、漢黃芩素等。黃芩根中含有黃芩酶，能夠促進黃芩苷和漢黃芩苷水解，生成黃芩黃素和漢黃芩黃素，黃芩黃素分子中帶有三個鄰位的酚羥基，性質不穩定，容易被氧化轉為醌類衍生物，質量隨之降低［2］。目前黃芩提取方法有水提取酸沉淀法、超聲法、超濾法、醇提取酸沉淀法、微波提取法等，而常用的為水提取酸沉淀法，但水提取存在黃芩有效成分提取不完全、提取出的雜質較多等缺點，因此本文采用液-液雙向萃取法提取黃芩有效成分［3］，并與常用的水提法進行比較。

1儀器與試劑

1.1儀器PHS-3C精密pH計（上海雷磁儀器廠）；旋轉蒸發器RE-52A（上海亞榮生化儀器廠）；SHZ-Ⅲ型循環水真空泵（河南省鞏義適英峪儀器廠）；UV1700（日本島津）；BS2245電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；紫外分析儀；超聲清洗儀。

1.2試藥黃芩苷標準品（中國生物制品檢定所）；無水乙醇、磷酸、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O、鹽酸、醋酸、95%乙醇均為分析純，黃芩藥材經蘭州大學藥學院生藥研究所馬志剛教授鑒定為唇形科植物黃芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干燥根，粉碎過60目篩；磷酸鹽緩沖液自配（以磷酸溶液及磷酸氫二鈉溶液配制pH值為2、3、4、5、6、7的磷酸緩沖液）。

2方法與結果

2.1黃芩苷標準曲線繪制［4］精密稱取干燥至恒重的黃芩苷對照品10.29mg，加70%乙醇超聲溶解，定容于50ml容量瓶中。精密量取黃芩苷對照品液（0.2058mg/ml）0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml分別置于25ml容量瓶中，加入20ml0.2mol/L鹽酸，再加70%乙醇至刻度，搖勻。于276nm波長處測定吸收度，隨行試劑空白。以吸光度A為縱坐標，濃度C為橫坐標繪制標準曲線?；貧w方程為：Y=0.0551X-0.0021,R2=0.9993（n=6），黃芩苷在4.116～24.696mg/L范圍內具有良好的線性關系。見圖1。

2.2提取方法

2.2.1液-液雙向萃取［3］精密稱取黃芩藥材粉末約5g，以煮沸的pH=2的磷酸緩沖液30ml燙過，冷卻至38℃左右接入液-液雙向萃取儀中（即圖2中a瓶）。從回流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3處，a瓶浸入38℃左右的油浴中，b瓶進行加熱攪拌，使乙酸乙酯形成回流。回流提取4h后收集乙酸乙酯液，于旋轉蒸發儀上回收乙酸乙酯，藥材提取物備用，同法提取6組。見圖2。

2.2.2普通方法提取精密稱取黃芩藥材粉末約5g，提取3次，第一次以10倍量沸水燙過煎煮2h，第二、三次分別加8倍量水進行煎煮，每次1h，合并煎液，濾過，濾液加2mol/L鹽酸（80℃）調節pH值至2保溫1h，靜置24h，濾取沉淀，用水洗至pH5.0，繼用70%乙醇洗滌至pH7.0，低溫干燥，即得，同法提取6組。2.3樣品測定于樣品提取物中加入少量70%乙醇微熱使溶解，轉入100ml容量瓶中，超聲溶解30min，以70%乙醇定容，濾過，棄去初濾液，精密吸取5.0ml續濾液以70%乙醇定容于50ml量瓶中,精密吸取1.0ml置于25ml容量瓶中，加入20ml0.2mol/L鹽酸，再加70%乙醇至刻度，搖勻。于276nm波長處測定吸光度。

2.4薄層檢視黃芩苷對照品的70%乙醇溶液作為對照品溶液、黃芩液-液雙向萃取樣品提取物及普通方法樣品提取物的70%乙醇溶液作為供試品溶液，照薄層色譜法試驗，以毛細管吸取上述溶液，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

2.5提取物含量比較所得含量為每克黃芩藥物中所含的黃芩苷的毫克數。Levene方差齊性檢驗F=4.794，P=0.053>0.05，可認為兩總體方差相等。取t=-8.148，df=10，P=0.000<0.05，可認為普通提取與液-液雙向萃取所得m提/m藥之間差異有顯著性。見表1。表1兩種提取方法提取黃芩苷的含量對比

2.6薄層檢視結果薄層檢視顯示兩種方法提取物的供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，均顯相同顏色的熒光斑點。

3討論

由上述結果可以看出筆者所采用的新提取方法液-液雙向萃取法所提取的提取物具有黃酮的特征反應，薄層檢視也說明此法可提取出黃芩苷等黃酮類化合物，經SPSS分析可知兩種提取方法的差異有顯著性，即液-液雙向萃取法所得黃芩中總黃酮的含量遠高于通常采用的水提法，可作為一種高效的黃芩有效成分提取的新方法。

【參考文獻】

1陳柏君.高山林.余國奠.黃芩及其同屬藥用植物研究進展.中國野生植物資源,2003，18（3）:20-24.

2孫秀英.中藥黃芩的研究概況.中醫藥信息,1993，5:32-34.

3賀殿，吳勇杰，賈忠，等.液-液連續萃取方法及裝置：中國，200410073368.7［P］,2005-08-24.

4黃啟華.紫外分光光度法測定雙黃連注射液中黃芩苷的含量.中成藥,2000,22（12）:836.