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摘要】目的建立紅藥片中阿魏酸的含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法，PhenomenexC18色譜柱，以甲醇：1%冰醋酸（30：70）為流動(dòng)相，柱溫為室溫，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm。結(jié)果阿魏酸在0.402～2.008μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（r=0．9999），平均回收率（n=5）為99．5％（RSD=1．2％）。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，結(jié)果較為滿意。

【關(guān)鍵詞】RP-HPLC法紅藥阿魏酸

【Abstract】ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofferulicacidinHongyaotabletsbyRT-HPLC.MethodsThedeterminationwasperformedonPhenomenexC18columnwithmethanol-1%glacialaceticacid（30:70）asthemobilephase.Thecolumntemperaturewasambient.Thedetectionwavelengthwas320nmandtheflowratewas1.0ml/min.ResultsTherewasagoodlinearrangewithin0.402～2.008μgofferulicacid（r=0.9999）.Theaveragerecoveryratewas99.5%withRSD1.2%（n=5）.ConclusionThemethodissimpleandaccurate.ItcanbeusedforthequalitycontrolofHongyaotablets.

【Keywords】RP-HPLC;Hongyaotablets;ferulicacid

紅藥片是由三七、川芎、當(dāng)歸、白芷、土鱉蟲(chóng)等中藥制成的中藥復(fù)方制劑，收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二十冊(cè)，具有活血止痛，去瘀生新之功效。臨床用于跌打損傷，風(fēng)濕麻木。是常用中成藥。該產(chǎn)品現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)僅有顯微鑒別，不能很好反映產(chǎn)品質(zhì)量，為保證該產(chǎn)品安全有效，本文參考有關(guān)文獻(xiàn)［1,2］，對(duì)樣品處理方法和色譜分離系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化，用高效液相色譜法測(cè)定當(dāng)歸、川芎的有效成分阿魏酸的含量。該方法簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好，可作為該產(chǎn)品質(zhì)量控制的方法。現(xiàn)報(bào)告如下。

1儀器與試藥

Agilent1200Series液相色譜儀；AG135電子分析天平；SB3200超聲儀。

甲醇為色譜純（SCRC國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），其余試劑均為分析純，阿魏酸對(duì)照品（供含量測(cè)定用，批號(hào)：0773-9910，中國(guó)藥品生物制品檢定所），紅藥片（市售三批，批號(hào)：070309，070802，071107）。

2方法與結(jié)果

2．1色譜條件色譜柱:PhenomenexC18（4.6mm×150mm,5mm）；流動(dòng)相：甲醇-1%冰醋酸（30：70）；柱溫：25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm；流速：1ml/min。阿魏酸與其他組分達(dá)到基線分離，以阿魏酸峰計(jì)算柱效，其理論板數(shù)6500。

2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取阿魏酸對(duì)照品9.97mg，置200ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相超聲溶解并稀釋到刻度，即得。

2.3供試品溶液的制備取紅藥片10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取2g，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，超聲處理（功率250W,頻率80kHz）20min，靜置，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2．4線性關(guān)系的考察精密稱取阿魏酸對(duì)照品10.04mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并制成梯度溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣10μl，測(cè)定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，阿魏酸質(zhì)量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程為：Y=5358X－79.48，r=0．9999，表明阿魏酸在0.402～2.008μg內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5精密度試驗(yàn)在上述色譜條件下，取阿魏酸對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次10μl,記錄峰面積，RSD為1.2%。

2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)取對(duì)照品溶液，于室溫下避光放置，在0、3、5、8h不同時(shí)間段內(nèi)重復(fù)進(jìn)樣3次，每次10μl，峰面積變化不大，表明該溶液基本穩(wěn)定，能滿足測(cè)定需要。

2.7加樣回收試驗(yàn)精密稱取已知含量的樣品5份，每份加入精密稱量的對(duì)照品儲(chǔ)備液溶液適量混勻，照樣品含量方法操作，計(jì)算回收率見(jiàn)表1。表1加樣回收試驗(yàn)

2．8樣品測(cè)定取3批樣品，按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下制備供試品溶液，分別精密吸取對(duì)照品溶液和樣品溶液各10μl，分別進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算阿魏酸的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。色譜圖見(jiàn)圖1。

3討論

阿魏酸是當(dāng)歸、川芎等中藥的有效成分之一，它的特性是易溶于醇類(lèi)等極性溶劑，通過(guò)比較，提取樣品時(shí)選用甲醇為最佳。阿魏酸不穩(wěn)定，見(jiàn)光、加熱均易分解，所以樣品超聲溶解時(shí)水浴溫度在30℃以下，并注意有關(guān)操作應(yīng)盡量在避光條件下快速進(jìn)行。

可以考慮利用阿魏酸的特點(diǎn)，考察含此類(lèi)中成藥的效期，也提示此類(lèi)藥品應(yīng)避光、陰涼處保存。表2樣品含量測(cè)定結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】

1肖培云,楊永壽，劉光明.HPLC法測(cè)定香蓮化滯片中阿魏酸的含量.現(xiàn)代中醫(yī)藥,2008,28（1）：58-59.

2袁麗霞,王紅.HPLC法測(cè)定當(dāng)歸苦參丸中阿魏酸的含量.中國(guó)藥事,2008,22（1）：61-62.