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摘要：目的：探討新輔助化療對乳腺癌超微結構的影響。方法：應用電鏡觀察20例新輔助化療組和20例對照組乳腺癌細胞超微結構的變化。結果：新輔助化療組腫瘤細胞超微結構示有不同程度的細胞毒性損傷，新輔助化療組和對照組線粒體數量、粗面內質網數量差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論:新輔助化療可使乳腺癌細胞線粒體損傷數量減少,形態發生改變;使粗面內質網脫顆粒,受損減少。

關鍵詞：乳腺癌；新輔助化療；超微結構

乳腺癌是危害婦女健康的主要惡性腫瘤之一，在我國乳腺癌已躍居城市女性惡性腫瘤的第1～2位，且有發病年齡低、早期發現少的特點。新輔助化療最早由1987年Frei命名，是指在施行手術或放療前應用的全身性化療，又稱為術前化療、初始化療和誘導化療，目前已成為局部晚期乳腺癌的標準治療[1]，在較早期可手術乳腺癌中的應用也是目前的研究熱點之一。我們對采用新輔助化療后手術患者和單純手術患者乳腺癌細胞的超微結構進行觀察比較，對其有特征意義的線粒體、粗面內質網進行數量和形態上的統計分析，為新輔助化療的基礎理論和臨床應用探討提供科學依據。

1資料與方法

1.1臨床資料收集2005年1月~2006年8月在南通大學附屬醫院普外科住院的乳腺癌患者共40例，均為女性，年齡34~78歲，中位年齡56歲。所有患者術前均經粗針穿刺獲組織學檢查證實為浸潤癌，40例患者心、肝、肺、腎功能及血象基本正常，既往未經放、化療及內分泌治療。將上述患者隨機分為新輔助化療組及對照組。術前均接受CEF方案（環磷酰胺600mg/m2,表阿霉素50mg/m2,5氟尿嘧啶500mg/m2）,21天為1個周期，化療3個周期后行保乳手術3例，行乳腺癌改良根治術17例。對照組患者均行乳腺癌改良根治術。

1.2方法將所取新鮮標本切成約1mm3小塊，分別經過固定、漂洗、脫水、浸透、包埋、切片、染色和光鏡下定位后，將制備的樣品在透射電鏡﹙日本電子株式會社JEM-1230透射電子顯微鏡﹚下觀察其超微結構的改變，并對其有特征意義的線粒體、粗面內質網進行數量和形態上的統計分析,采用Stata7.0統計軟件進行t檢驗。

2結果

2.1兩組乳腺癌細胞電鏡表現（1）對照組可見癌細胞呈大片分布，癌巢分布現象明顯，有的細胞間有大間隙，腺管腔面微絨毛豐富，細胞內線粒體及粗面內質網豐富，核分裂相明顯（見圖1）。（2）新輔助化療組化療后腫瘤細胞超微結構示有不同程度的細胞毒性損傷，化療后腫瘤實質和細胞數目明顯減少，代之以大量膠原纖維，細胞間距增大，各種膜性結構出現裂隙，內質網結構松散、脫顆粒，線粒體膜碎裂和空泡化。部分細胞壞死崩解，僅見核仁影和散落崩解的細胞漿、成片凝固蛋白，細胞內線粒體腫脹，嵴不明顯，微絨毛減少，極少見核分裂相。在受損的腫瘤細胞周圍常可見淋巴細胞和漿細胞浸潤，壞死灶中有較多的纖維母細胞和膠原纖維及散落脂滴，溶酶體增多（見圖2）。

2.2兩組線粒體和粗面內質網數量比較新輔助化療組和對照組隨機拍攝癌組織細胞，每組采用30帖12千倍電鏡照片行線粒體和粗面內質網密度測定。新輔助化療組線粒體數量和粗面內質網數量分別為5.24±1.36、3.31±0.22，對照組分別為11.26±3.24、6.40±0.78，兩組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。

3討論

隨著對乳腺癌研究的不斷深入，對其生物學特性有了進一步的認識，新輔助化療已成為乳腺癌研究重點之一。我們通過近幾年來乳腺癌術前新輔助化療，發現它具有以下幾個優點：（1）使腫瘤在術前減小，有利于手術；（2）殺滅存在于全身的轉移腫瘤細胞，防止其繼續生長擴散；（3）避免原發病灶切除后因體內腫瘤細胞總數減少而加速生長；（4）減少術中血行擴散；（5）通過切除腫瘤標本可準確獲知患者對術前化療的藥物敏感性，以指導術后化療。

近年來國內外學者發現放化療后腫瘤細胞的超微結構上發生了一系列改變，主要變化為：腫瘤細胞超微結構嚴重破壞，在各種膜性結構上出現裂隙，核漿的密度丟失，在核膜邊緣可見粗大染色質顆粒的聚積[2]；腫瘤組織中可見大量壞死癌細胞，細胞結構大部分消失，粗面內質網結構松散脫粒，線粒體空泡化或出現絮狀物，細胞微絨毛消失，可見大量肌纖維母細胞及淋巴細胞浸潤[3]；腫瘤細胞稀疏，變性及碎裂多見，核密度增高，血管內皮細胞空泡變性，線粒體腫脹、溶解，溶酶體減少[4]。

本研究對乳腺癌患者新輔助化療后腫瘤細胞顯微結構的觀察結果與以往的報道相近，證實新輔助化療作為一種術前療法有其科學性和實用性，但由于本研究在短期內對乳腺癌患者新輔助化療效果進行評價，且病例數較少，若能廣泛應用于臨床，進行大宗樣本分析，建立長時間的隨訪，總結出超微結構變化與預后之間關系的規律，其結果將更有意義。

【參考文獻】

[1]FisherB,MamounasEP.Preoperativechemotherapy.Amodelforstudyingthebiologyandtherapyofprimarybreastcancer[J].JClinOncol,1995,13(3):537-540.

[2]易祥華，張容軒，羅本芳，等.非小細胞肺癌新輔助化療后的光鏡和電鏡觀察[J].電子顯微學報,2000，19（6）：804-809.

[3]韋長元，陳建思，劉劍侖,等.應用順鉑后肝癌細胞超微結構的研究[J].中華肝臟病雜志,2000，8(2):89-90.

[4]季穗生，劉唐彬，潘翠玲，等.腎母細胞瘤和神經母細胞瘤術前化療及超微結構改變[J].浙江腫瘤,1998，4(2):81-82.