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體育教學的學情分析范文第1篇

一、情景教學的含義和方法

情景教學指的是在課堂教學的過程中，教師將教學內容利用想象、聯想等方式進行加工，使之變成形象的、生動的、有情境的活動場景，并利用一定的技巧引導學生進入情景當中，使學生獲得一定的情感體驗，從而能夠深入理解所學的知識，提高技能，并促進學生身心共同發展的教學方法[2]。

情景教學中情景的創設并不是憑空而來的，而是源自社會生活和實踐，強調的是生活情境與教學過程一體化。因此，情景的創設應選擇貼近學生實際生活的素材，并綜合考慮學生的知識積累、生活經驗、興趣愛好及情感需求等，在遵循學生的認識規律基礎之上，創設出能夠激發學生興趣的情景，使學生在生動形象、活潑有趣的教學情境中獲得愉悅的情感體驗，以充分地理解并熟練地掌握基本知識和運動技能。

二、問題能培養學生勤學善思的品質

由于小學生的年齡較小，他們的生活經歷和知識的積累也較少，他們的思維容易受到外在因素的影響，因此，小學體育教師應努力為學生創設貼近他們生活實際的情景，使小學生在熟悉的環境下放松身心，并以問題的形式來激發小學生的探究欲望，培養他們勤學善思的優秀品質。同時，由于小學生有著渴望教師關注的心理，小學體育教師應給予學生一定的期待，以調動學生的學習熱情，提高小學體育的教學質量。

例如，在立定跳遠的教學過程中，教師可先創設一個問題情境，向小學生們提出問題：螞蚱、青蛙這樣的小動物是怎樣跳的呢？引導小學生進行思考，并使其能夠描述出螞蚱、青蛙等動物的跳躍動作。通過創設這樣一個問題情景，不僅能更引入教學內容，而且能調動學生思考的積極性。小學生在教師創設的這樣一個問題情景中不知不覺就發揮自己的想象力和發散思維，積極地進行思考，如人是怎樣跳躍的，立定跳遠到底是怎么樣的呢？從而加深了對立定跳遠的印象，更好地達到了立定跳遠的教學目標。

三、游戲激發學生參與體育的興趣

如果學生能對體育運動抱有極大地興趣，那么這堂體育課通常都能取得極大地成功。這是由于興趣是激發學生學習熱情的最好的催化劑，它能使學生深入到教學內容的學習當中，化被動學習為主動學習，從而提高小學體育課堂教學的質量[3]。基于此，小學體育教師在應用情景教學時應充分結合小學生的興趣特點，盡力激發學生參與體育運動的興趣。小學生天然便對游戲有著極大地興趣，因此體育教師在進行教學設計師應綜合考慮小學生的興趣特點，設計內容豐富，形式多樣的游戲情景，使學生能夠在輕松愉悅的游戲氛圍中掌握體育運動的知識和技能，達到小學體育課堂教學的目的和要求。

例如，在上述立定跳遠的教學過程中，教師以問題引導學生理解立定跳遠，同時，教師還可以設計一個與立定跳遠相關的游戲，比如“青蛙過河”，激發學生的興趣，使小學生在游戲的情景中熟練掌握立定跳遠的技巧。此外，由于小學生對游戲有著天然的熱愛，在體育課堂教學結束之后他們通常也會自動自覺地進行這個游戲，這在不知不覺中鞏固了立定跳遠的技術要領，達到了小學體育課堂教學的要求。

四、競賽能培養學生的競爭意識和團隊精神

競賽能夠促使學生發現自身的優勢和不足，激發學生的競爭意識，而良性的競爭環境更能有效地促進學生身心的發展，為他們以后的發展打好基礎。因此，在小學體育教學中教師應注重引進競賽機制，設計內容豐富，充滿趣味的競賽情景，以激發學生的競爭意識，并鍛煉學生團隊合作的能力。

例如在上述立定跳遠的教學過程中，小學體育教師設計了“青蛙過河”這一游戲激發學生的興趣。此外，教師還可以引進競賽機制，將學生分成兩組，進行組與組之間的競賽。而在學生熟練掌握了立定跳遠的技能之后，體育教師可以組織學生進行立定跳遠比賽。教師可預先設置一定的距離，如1.2m，1.3m等，讓學生進行比賽，比誰跳的更遠。同時還可以進行團隊賽，將學生分為兩組，比較兩組學生的成績。在這樣的競爭機制下，小學生不服輸的競爭意識能夠得到有效激發，同時也培養了學生兼顧大局，團隊合作的精神。

總之，小學體育教師在課堂教學中充分應用情景教學法能夠有效地調動學生的學習積極性，提高學生參與體育運動的熱情，進而提高小學體育教學的質量。因此，小學體育教師應結合教學內容和要求，善用情景教學，激發小學生體育學習的熱情，提高其學習質量，達到體育教學的目的。

參考文獻：

[1]武榮華.情景教學在小學體育課堂教學中的應用[J].山西電教，2012，11（15）：31.

體育教學的學情分析范文第2篇

關鍵詞：小學教學；利用情境；有效提問

中圖分類號：G622 文獻識別碼：A 文章編號：1001-828X（2016）033-000-01

一、合理捕捉，巧妙運用情境

教材精心設計了貼近學生生活的“情境圖”，其中蘊含了豐富的教學信息，也存在多種多樣的教學問題。只有合理的挖掘“情境圖”中的教學資源，才能讓“情境圖”在教學中發揮重要作用。

1.準確地提取信息。提取信息能力是解決教學問題的基礎，也是學生應該具備的基本教學能力之一。小學生的邏輯思維能力正在完善，語言表達能力也有限，因此培養學生認真觀察，全面分析，準確提取變得極為重要。

2.注重隱含信息。隨著知識學習的深入，隱含的教學信息越來越多。當表面的教學信息不能滿足學習的需要的時候，隱含教學信息的提取和利用變得尤為重要。例如，再數學教學中，在二年級下冊《租船》這一課的學習中，對情境中“限乘”和“至少”的理解是學習的關鍵，也是需要教師引導學生理解的教學信息。“限乘4人”是一條隱含的教學信息，是學生第一次接觸“限乘”的概念。首先要引導學生明確“限乘4人”就是每條船可以坐1人，2人，3人，4人，但是最多只可以坐4人。為了解決“至少要租幾條船”的問題，需要保證每條船坐盡可能多的人，也就是4人。

3.精煉有效信息。教學的學習過程就是解決問題的過程，學習的重要目標之一是要發散教學思維，能夠利用多種策略解決實際問題。而小學生往往缺乏生活經驗和學習能力，特別是在接觸新知識的時候，遷移能力有限。所以，為了促進學生嘗試用不同方法解決問題，對信息適當的分析和復習是十分必要的。

二、加強提問的時效性

《教學課程標準》中指出“義務教育階段教學學習的總體目標要讓學生能夠增強發現和提出問題的能力、分析和解決問題的能力。”因此，在教學中要重視培養學生的提問意識，鼓勵學生細心發現生活和學習中的教學問題，大膽的提出質疑或困惑。其中，根據情境提問就是一種有效的學習方式。

1.直接提出問題。對于信息比較單一，數量較少，只有一個或兩個信息的簡單情境，學生直接提出問題。而涉及到信息多而雜時，提問的方向只能與本課學習內容相關，這時可以讓學生在提取信息之后針對主要學習內容，有限制的鼓勵學生提出問題，再探究解決的方法。例如，在數學教學中，三年級上冊《需要多少錢》一課學習的兩位數乘以一位數，學生提問之前，教師可以明確要提出與乘法有關的教學問題。在這個要求下，學生能夠提出“買2個太陽鏡需要多少元？”“買3個游泳圈需要多少元？”等乘法問題。而這些問題正是本課的學習重點。可以直接鼓勵學生用自己喜歡的方法嘗試解決。

2.有針對性的提問。限制學生提出問題的運算法則或是運算步驟的數量，不僅可以直奔教學重點，提高教學效率，而且可以幫助學生更好的學會提問。有時學生提出問題如果直接研究會增加課堂難度，不利于全體共同探究，教師在提問之前可以增加一個限制，這樣一來更有指向性，學生的問題也更加準確。同時又對授課內容進行了鞏固。

3.明確主要問題。面對教學信息比較多的復雜情境，學生可能很難直接提出與學習內容相關的教學問題。或者是教學信息不明顯，提問隨意性大。這樣的情況如果教師直接提出問題更加符合實際需要。《買文具》是一課學習的主要內容是掌握三步混合運算的運算順序，如果盲目的提問比較浪費課堂時間，教師可以直接出示淘氣買3個計算器和1支鋼筆需要多少元的教學問題，讓學生在小組合作中探究、掌握本節課的主要內容。為了能更好的培養學生發現問題，提出問題的能力，在練習環節鼓勵學生觀察淘氣提出問題特點，仿照再提出這樣的問題，然后列式計算。這樣一來，不僅鼓勵了學生提出問題，而且教會了學生如何提出有價值的教學問題。

4.重視提問習慣的養成。“良好的開端是成功的一半”，養成良好的學習習慣會讓學生受益終生。了解學習重點，發現自己的困惑，帶著問題去學習會更有利于{動小學生的學習熱情。學生先要觀察情境，提取教學信息并進行語言描述，再提問并記錄下來，然后嘗試列式，判斷是否能夠解決。最后了解書上的問題和解決方法。發現本課學習的主要內容是除法，進而修正提出的問題。這樣經過一段時間的訓練，學生的提問能力就會有明顯提高。

“一切為了學生，為了學生的一切”，每個學生的學習能力、接受水平都不相同，只有以學生為本的教學才是最好的設計，師生共同參與的學習模式，讓所有學生參與其中，提高其學習的主動性和效率。我們盡最大可能地發揮情境圖的作用，不斷提高學生的學習應用能力，讓學生練就一雙發現問題的慧眼，成為新一代有知識有創造思維的人。

參考文獻：

[1]薛飛.小學語文情境教學設計最優化研究[D].蘇州大學，2014.

體育教學的學情分析范文第3篇

【關鍵詞】幼師學校；學前教育專業；體育技能；體育知識

近年來，隨著我國社會長期穩定，經濟持續增長，教育改革不斷深化，素質教育全面推進，普通高等幼師學校體育工作更是取得了令人矚目的成績。學校體育管理工作更加科學、規范，體育場館、設施建設逐步完善，體育課程改革全面推到加強，科研水平不斷提高。但是，同時也暴露出了一些問題，特別是在國際高等教育大眾化思潮席卷全球和國外先進的大學體育發展模式的影響下，更凸現出我國高等學校體育發展還具有廣闊的空間。

現在的一些普通高等學校體育課程面臨潛在的危機。在一些發達國家，學校教育和學校體育發展程度很高，民族體質水平也很高。在這種情況下，他們有的大學取消了體育必修課，有的僅作為選修課開設。大學體育在世界范圍內面臨著挑戰和危機。

長期以來我國教師教育的目標偏重于培養學科專家型教師，在課程結構上教育專業課比重明顯偏低，課程設置過于單一或不合理。一定程度上影響了幼兒園教師的專業化發展。學前體育是學前教育的重要組成部分，直接關系到終身體育觀念的形成。目前國內外關于高職的體育課題很多，有專業改革、課程改革、實踐教學改革以及關于學前體育專業的體育實踐教學方面的，但是針對高等幼兒師范專科學校的體育教育專業的課程方面的研究不是很多。

學前教育越來越受到國家及社會各界的重視和關注，完善學前教育階段的各項制度，提高我國學前教育階段的教育質量，成為我國教育中長期發展規劃的重要組成部分。提高學前教育階段的教育質量離不開對學前教育階段幼兒德智體美勞諸育質量的全面提升幼兒體育關系著幼兒教育的質量，對幼兒的身體成長，心理和智力發展以及社會適應能力提高都起著至關重要的作用。但是，幼兒的年齡、生理、心理等特點限制了幼兒進行體育運動的能力，使幼兒無法科學、有效地進行體育鍛煉，這就要求幼兒園教師要運用自身的幼兒體育知識和技能正確引導、組織幼兒開展體育活動，而幼兒教師是否具有高超的體育教學能力和合格的體育教學知識，取決于培養幼兒教師的學校#因此，了解學前教育專業本科生體育教學知識與能力的培養現狀，研究其發展對策是非常重要的。

一、學前教育專業學生體育教學知識與能力不足的表現為：

（一）現有教材和課程設置不能滿足學生幼兒體育教學的需求

高校學前教育專業課程設置以及教材的完善與水平決定了學前教育專業學生的體育教學知識結構水平。但是，現階段我國學前教育專業的課程設置和教材安排卻不足以達到學前教育專業學生體育教育知識結構培養的要求，特別是以下兩個問題最為突出。第一，課程設置缺乏針對性和專業性，雖然我國學前教育專業設立了與專業相關的幼兒體育課程，但這樣的課程設置并沒有滿足學前教育專業學生體育教學知識與能力的培養要求。第二，幼兒體育相關內容的學習時數偏少。

（二）學前教育專業學生所學體育內容缺乏全面性

開設學前教育專業的高校對學前教育專業學生開設的幼兒體育教學內容應該包括幼兒體操動作、幼兒體育游戲、運動器械、幼兒球類活動、運動保健知識、幼兒隊列隊形等幾項。這是幼兒教師應該學習和掌握的內容，它們之間有著內在的邏輯關系。

（三）幼兒體育教學實踐教育不夠，缺少經驗獲得，實踐是檢驗真理的唯一標準，只有通過實踐才能檢驗學前教育專業學生的體育教學能力，才能檢驗高校對學前教育專業學生的培養情況。調查發現，學前教育專業學生的見習時間短，實習時間安排過于靠后集中，實習過程模式化，實踐不夠深入，實習內容大多以觀摩為主，僅學習幼兒園教師的常規，實際動手操作少，學生難以在見習，實習生活中獲得豐富的實踐經驗，不能將自己的所學應用到所教。

（四）學前教育專業培養目標不明確，教學方法落后，培養目標決定著培養內容、培養方式等一系列培養環節。學前教育專業學生作為今后的幼兒教師，其體育教學能力是必不可少的一項教學能力和職業能力。沒有明確的培養目標，也就對學前教育專業學生的培養內容、培養方式等培養環節模糊不清，對學生應當有哪些能力、培養學生什么樣的知識和技能也不甚了解。

二、對石家莊幼兒師范學校體育教學應該采取的措施建議

（一）合理設置課程，制定科學的教學計劃

師范學校體育課程的設置一定要做到實事求是，從實際出發。課程的設置不僅要符合國家有關政策同時也要考慮到學生的個性差異，將體育課程視情況分為選修課、必修課和自修課。這樣學生就能根據自己的情況做出選擇。要培養學生鍛煉意識，體育的目的在于強身健體，因此在教學的過程之中不僅要幫助學生掌握專業的技能，同時還要培養學生的參與意識和運動意識。

（二）靈活運用體育器材

器材的作用絕不是簡單地幫助學生進行固定項目的鍛煉，教師要根據實際情況使用器材，幫助學生學習技能的同時也要調動學生的學習積極性，培養學生的合作意識和參與意識。

（三）提高教師隊伍的素質

體育教學需要教師擁有專業的素質。教師是教學的主體，學生則是學習的主體。教師要注意不斷學習不斷進步，這樣才能夠緊跟時代步伐。教學的過程之中要注意不斷培養學生的主體意識，讓學生主動自發的學習，讓學生意識到自己是學習主人翁。體育教學既是對學生生理方面的教學同時也是對學生心理方面的教學，教師要靈活地運用所學的知識，促進學生的全面發展。

（四）幫助學生樹立終生學習的意識

體育鍛煉應該是貫穿人一生的事情，學生要將師范階段的體育學習當成一個起點而不是終點。所以教師在教學的時候要根據學生的興趣愛好教授給學生最感興趣的體育項目，幫助學生樹立起終生鍛煉和終身學習的意識。課外鍛煉應成為體育教學的延伸部分，教師要鼓勵學生積極參加。培養學生對于體育的興趣，幫助學生培養堅持鍛煉的好習慣，最終幫助學生樹立終身學習的意識。

作者簡介：

體育教學的學情分析范文第4篇

關鍵詞：新課程；高中數學；情景問題教學

一、高中數學“情景問題”教學的定義

分析新課程背景下高中數學“情景問題”教學的優勢，首先必須了解“情景問題”教學的定義。“情景問題”的定義包括兩方面的內容，一是情景，二是問題。情景是指一種課堂中的氣氛，新課程改革的背景，需要的不再是老師之于學生的傳統化的傳道授業，而是師生之間的一種相互交流，因此需要一種更加和諧的課堂氣氛優

化這一種溝通交流的需要；問題是指在創造一定的課堂氣氛之下，老師通過設計一定的情景，提出一定的問題來激發學生的求知欲，并產生解決問題的欲望，由此達到更加人性化的教學過程。結合這兩方面的內容，高中數學的“情景問題”教學方法加入現實的背景，提供現實背景下相關的資源和材料，來豐富整個教學過程。

二、高中學生“情景問題”教學的理論依據

高中數學的學習過程存在難點，主要原因是高中數學的學習更加的抽象化和具有一定的邏輯性，對于思維的要求比較高，學生思維的培訓尚未達到一定的高度，所以這對于教師本身的教學也會造成一定的困擾。引進“情景問題”教學是為了化抽象為具體，同時更加的生動化、活躍化，改變傳統教學過程中引進概念、定義，進而通過一些例題來進一步解析。

新課程改革不僅要求進一步把握學生個體之間的差異性，同時也從理論和實際的進一步結合來強化教學本身。高中數學的新課程改革需要引入實際背景下的數學教學內容，化抽象為具體

能夠讓學生更易于接受，并以一種更加強烈的求知欲來參與數學學習。

三、高中數學“情景問題”教學的優勢

高中數學引用“情景問題”的教學方法有著現實的意義，結合“情景問題”教學的定義和理論依據，其教學優勢主要包括這樣

幾點：

其一，高中數學“情景問題”教學更加靈活化和新穎化，改變傳統板書和例題結合的教學方式，在這一種新形式下的“情景問題”教學更好地讓我們看到老師作為課堂中的主體，發揮了老師的創

新性和主觀能動性，而學生作為參與其中的主體，也更能夠接受，不僅僅更加容易接受數學知識，也能掌握學習方法和技能，以更加具有主動性的方式參與進來，更好地激發了學生學習的興趣；其二，高中數學“情景問題”教學能夠更好地發掘學生的潛能。相比較傳統高中數學單純以考試為目的，“情景問題”教學更實用化。高中數學的學習本身就應該更多地發揮自我的學習能力，探索能力，才能更加熟練地掌握和應用知識，而“情景問題”教學可以說是一種更加人性化的教學。其三，高中數學“情景問題”教學能夠更好地增加師生之間的互動，從而培養相互感情。相比較傳統的教學方式，學生一直處于一個被動的姿態，被動的接受知識會使學生存在一種抵觸心理，不利于知識的學習和接受，而“情景問題”教學則是一種教學相長的學習，以一種更加平等的姿態來相互學習，從中獲得啟發和收益，讓學生以一種更加主動的姿態來學習更能讓學生愿

意學習，學會學習，同時可以增加師生之間的相互交流溝通，培養相互的感情。

基于新課程背景的高中數學“情景問題”教學的優勢，我們看到這一種創新化的教學方式有著現實的意義，如何把握優勢，結合新時代的需要來進一步優化，或許是我們要繼續思考的問題。

參考文獻：

體育教學的學情分析范文第5篇

【關鍵詞】 無血清培養基 免疫 細胞培養 細胞因子 腫瘤

0 引言

CIK細胞（Cytokineinduced killer，CIK）是將人外周血單個核細胞，在體外用多種細胞因子（如IFNγ、IL2、IL1及OKT3等）共同培養一段時間后獲得的一群異質細胞。具有極強的增殖能力及殺傷腫瘤細胞的能力。Critzapis等[1]報道，CIK細胞分泌多種細胞因子進一步提高免疫效應細胞的細胞毒作用從而殺傷腫瘤細胞。治療所需的CIK細胞在體外培養時所用的條件對細胞的活性有很大影響。現在常用于細胞培養的完全培養基，因含有人AB血清，雖經HBV、HCV及HIV的檢測，但仍有可能傳播其他疾病，安全性低;并且存在批次差異、不宜質控，質量不能保證。無血清培養基則可達到生物潔凈要求，成分明確，質量穩定，便于質控，克服了人AB血清的缺點，能減少病人意外感染的機會，對于免疫治療的推廣應用有重要意義。為此，我們比較了無血清培養基（AIMV）與完全培養基(含10%胎牛血清RPMI 1640)培養CIK細胞分泌細胞因子水平。

1 材料與方法

1.1 材料

健康足月產胎兒臍帶靜脈血50ml(枸櫞酸鈉抗凝)，產婦各項生化指標檢測正常。RPMI1640培養基、淋巴細胞分離液和無血清培養基購自GIBCO公司，細胞因子購自Bioscience公司， 流式試劑CD45FITC/CD4PE/CD8ECD/CD3PC5、CD3FITC CD16+CD56PE和PI染液購自BeckmanColuter公司，胎牛血清購自美國Hyclone公司。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養

臍血用淋巴細胞分離液作密度梯度2500r/min離心30min分離的外周血單個核細胞， 分別用完全培養基(RPMI 1640，含10%胎牛血清，100μg/ml鏈霉素，100U/ml青霉素)和無血清培養基調整細胞數為1×106個/ml，接種于24孔培養板，930μl/孔。第1天加入rhIFNγ 1 000u/ml，培養24h后加入rhIL2 300u/ml、rhIL1 100u/ml及OKT 350ng/ml繼續培養，每隔4d更換培養基，調細胞數為1×106個/ml，補加rhIL2 300u/ml，每8d在補加rhIL2的同時補加OKT 350ng/ml。YTMLC、GLC和A549用含10%的胎牛血清、100u/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素的RPMI 1640常規培養。設不加細胞因子的CBMNCs培養作為對照。

1.2.2 細胞表型分析

于培養的第0、4、8、10、12、14、17、21d對以上各組效應細胞進行分析，每組每次測4個復孔。

1.2.3 細胞增殖能力測定

于培養的第0、4、8、10、12、14、17、21d分別取細胞用臺盼藍拒染法計數所培養的活細胞濃度，根據流式檢測的CIK的比例，計量液量，推算CIK細胞總數。

1.2.4 CIK細胞分泌IL2、IFNγ、TNFα細胞因子水平測定

于培養的第0、4、8、10、12、14、17、21d分別取細胞，充分洗滌，調整細胞濃度為2×106/ml培養24h后，收集上清，用ELISA法定量測定細胞培養上清中IL2、IFNγ、TNFα，設4個平行孔。

2 結果

2.1 AIMV與完全培養基培養CIK細胞增殖能力的比較

實驗表明，AIMV培養細胞較完全培養基培養細胞增殖遲緩。完全培養基增殖高峰期在第12d，增殖平臺為第10～12d，最高增殖倍數為638.4倍；而AIMV培養基增殖高峰期在第14d，增殖平臺為第14～17d，最高增殖倍數為678.7倍。雖然AIMV培養細胞較完全培養基培養細胞增殖遲緩，但其增殖平臺期較長，增殖倍數較完全培養基高，見圖1。

圖1 AIMV與完全培養基培養CIK細胞增殖能力

2.2 AIMV與完全培養基培養細胞表型比較

實驗結果表明，兩種培養基培養的細胞CD3+、CD8+、CD3+CD56+細胞所占百分比逐漸增多，CD3+CD56+細胞在AIMV培養基中，增長高峰在14～17d，所占相對百分率由（0.21±0.04）上升為（31.53±1.65），增長了150.14倍，完全培養基增長高峰在12～14d，所占相對百分率由（0.21±0.04）上升為（30.90±2.28），增長了147.14倍。對照組CBMNCs培養體系中未出現明顯的細胞表型轉化，各種細胞成分均呈遞減趨勢，見表1、圖2。

2.3 AIMV與完全培養基培養的CIK細胞分泌細胞因子水平

2.3.1 IL2水平

AIMV與完全培養基培養的CIK細胞均分泌IL12，從第4d分泌量均穩定升高，都于12d達到高峰，第14d略有下降為，以后逐漸下降。但AIMV培養基第12d的IL2水平（222.525±19.889）pg/ml明顯高于完全培養基培養組（189.075±6.343）pg/ml，且下降水平也慢于CM組，見圖3。

A：培養前；B：完全培養基培養后；C：AIMV培養基后表1 AIMV與完全培養基培養細胞不同時間的表型變化

2.3.2 IFNγ水平

AIMV與完全培養基培養的CIK細胞均分泌IFNγ，在第4d IFNγ水平開始升高，第14～17d分泌量增大，完全培養基培養組第17d達到高峰為（246.854±4.758） pg/ml，而AIMV組14d達到高峰（227.88±3.048）pg/ml，高峰期后均迅速下降，見圖4。

2.3.3 TNFα水平

AIMV與完全培養基誘導培養的CIK細胞均分泌TNFα，第4～17dTNFα水平均平穩升高，完全培養基組第17d達到高峰為（247.032±9.117） pg/ml，第21d略有下降為（186.953±3.815）pg/ml，而AIMV組14d達到高峰為（222.53±8.965）pg/ml，之后TNFα水平開始下降，見圖5。

3 討論

CIK生物免疫治療已作為腫瘤綜合治療中的一種重要手段，能清除惡性腫瘤患者術后、放化療后微小殘留病灶及調節患者的免疫能力。但現在用于CIK擴增培養的培養基一般為AB血清培養基，但人AB血清存在安全性低，不宜質控等缺點，無血清培養基正得到越來越廣泛的應用。多數研究表明，無血清培養基可代替含血清的完全培養基，二者所得培養物的數目和功能相當[24];但也有不同的觀點，認為應用無血清培養基所得細胞功能受到損害[5，6]。無血清培養基AIMV是美國Gibco公司專為體外培養淋巴細胞設計的產品，可用于臨床試驗。因為人AB血清存在個體差異、質量不穩定等諸多的不確定因素，因而我們選擇美國Gibco公司的胎牛血清配制完全培養基作為標準對照，與無血清培養基AIMV作對比，探討無血清培養基代替完全培養基的可行性。

我們從細胞增殖能力、細胞表型分析及體外CIK細胞分泌的細胞因子等幾個方面進行比較。在細胞增殖能力方面，雖然AIMV培養基培養的CIK細胞較完全培養基培養細胞增殖遲緩，完全培養基增殖高峰期在第12天，增殖平臺為第10～12天，而AIMV培養基增殖高峰期在第14天，增殖平臺為第14～17天，但AIMV培養基培養的CIK細胞增殖平臺期較長，增殖倍數（678.7倍）較完全培養基（638.4倍）高。這說明無血清培養基支持細胞增殖能力的更為穩定可靠，也提示使用不同的培養基在回輸時間上應有所區別。在兩種培養基培養單個核細胞誘導增殖的過程中，各細胞表型雖在培養過程中有一定的差異，但在增殖高峰期無明顯差別。

CIK細胞具有較強的殺瘤活性，其作用可能與其在增殖過程中能分泌某些細胞因子有關，其主要效應細胞為CD3+CD56+細胞，并出現大量增殖，Lopez等[7]發現CD56+細胞能高表達IFNγ和TNFα，Hoyle等[8]用FACS檢測到CIK細胞能表達IL2、IFNγ及TNFα，這與我們的研究結果:CIK在體外誘導培養過程中能分泌IL2、IFNγ、TNFα一致。細胞因子在抗腫瘤的網絡調控機制非常復雜，IL2、IFNγ、TNFα在體內外抗腫瘤的過程起著重要的抗腫瘤及調節機體免疫功能的作用。分泌IL2，從第4天分泌量均穩定升高，都于12天達到高峰，以后逐漸下降。但AIMV培養基第12天的IL2水平（222.525±19.889）pg/ml明顯高于完全培養基組（189.075±6.343）pg/ml，下降水平也慢于CM組；IFNγ水平在第4天均開始升高，第14 ～17天分泌量增大，完全培養基組第17天達到高峰為（246.854±4.758） pg/ml，而AIMV組14天達到高峰（227.88±3.048）pg/ml；而TNFα，第4～17天TNFα水平均平穩升高，完全培養基組第17天達到高峰為（247.032±9.117） pg/ml，而AIMV組14天達到高峰為（222.53±8.965）pg/ml。可見，無論是AIMV培養基還是完全培養基其分泌細胞因子的趨勢是一致的，只是分泌IFNγ、TNFα水平AIMV培養基（14天）較全培養基（17天）早，但分泌水平無明顯差別（P>0.05）。AIMV培養基分泌細胞因子高峰與CIK效應細胞CD3+CD56+細胞增殖高峰一致（14天），因CIK細胞回輸時間最好應為在CIK細胞增殖高峰及細胞因子分泌高峰時，這有利于發揮其最佳療效，從這方面考慮，AIMV培養基優于全培養基。

我們的實驗表明，無血清培養基成分明確，來源穩定，功能可靠，易于質控，有利于保障患者治療的安全。可完全替代完全培養基，避免不必要的醫療糾紛，因而在生物治療中有巨大的優勢和廣闊的應用前景。

參考文獻

［1］ Critzapis A D， Dimitroulopoulos D， Paraskevas E， et al. Large scale expansion of CD3+CD56+ lymphocytes capable of lying autologous tumor cells with cytokinerich supernatants\[J\]. Cancer Immunol Immunother，2002，51(8):440448.

［2］Lefebvre P， Winter J N， Kahn L E， et al. Megakaryocyte ex vivo expansion potential of three hematopoietic sources in serum and serumfree medium \[J\]. J Hematother，1999，8（2）:199208.

［3］Bulter M， Burgener A， Patrick M， et al .Application of a serumfree medium for the growth of Vero cells and the production of reovirus\[J\].Biotechnol Prog，2000，16（5）:854858.

［4］Kambe N， Kambe M， Chang HW， et al. An improved proved procedure for the development of human mast cells from dispersed fetal liver cells in serumfree culture medium \[J\]. J Immunol Methods， 2000，240（12）:101110.

［5］Sekhar M， Yu JM， Soma T， et al. Murine longterm repopulating ability is compromised by ex vivo culture in serumfree medium despite preservation of committed progenitors\[J\]. J He matother， 1997，6（6）:543549.

［6］Slunt JB， Taketomi EA， PlattsMills TA， et al. Human Tcell responses to Trichopyton tonsurans: Inhibition using the serum free medium Aim V\[J\]. Clin Exp Allergy， 1997，27（10）:11841192.