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稅法的義務性范文第1篇

記得公司曾經招聘過一批實習生，一起應該有十幾個，其中有三個實習生是分給我來帶，有一個實習生皮膚黑黑的，做事情非常勤快，一點都不含糊，她愛學習，我也喜歡教，我交給她做什么事情都很省心，她有一點特別好，就是發現問題不僅只是看到了，而且會提供解決辦法。

另外兩個實習生呢，總是喜歡抱怨，公司的制度這里不好，那里不好，一件事情擺在他們面前，他們總習慣性地看到不好的一面，不好是吧，那我也看到了，有沒有解決方案？這時，他們又答不上來了。

你永遠無法叫醒一個裝睡的人，他們這種心態我和他們說過很多次，但是沒有改觀，在工作上，他們的表現也不好，喜歡耍小聰明，交代他們一點事老是給我偷工減料。

一個月過去了，那個皮膚黑黑的女孩，做事情已經溜得不行，她上手特別快，反正有時候沒事我就會偷懶，跑到休息室偷偷睡覺或者看美劇，她可以獨當一面，擋不了會再來叫我，我暗爽了1個月。

記得她當初實習轉正被調走的時候，我還傷心了好久，再也不能窩在休息室看美劇睡懶覺了。

而另外兩名實習生呢？被開除了，準確地說是和另外11名實習生一起被開除的。

那是公司歷史上第一次一次性開除那么多人，起因是他們13名實習生一起在外面餐廳吃飯，吃完飯興致還不錯，就開始瞎逼逼，一會兒說公司報銷制度不行，一會兒說公司請假的制度不行，那叫一個群情激奮，口水四濺，唾沫橫飛。

然而無巧不成書，隔壁桌竟然就是老董事長，他不常來公司他們自然沒見過，老董事長全程一臉黑線地吃完飯，回公司就麻溜地把他們全開除了。

稅法的義務性范文第2篇

【關鍵詞】 無形資產； 攤銷； 計提減值準備； 所得稅調整； 會計處理

無形資產的后續計量指的是使用壽命有限的無形資產攤銷及無形資產計提減值準備兩個方面的內容。在這兩個方面，企業會計準則與稅法的規定存在著一定的差異，這些差異均屬于暫時性差異，因而需要進行所得稅的納稅調整。本文通過列舉實例進行解釋，以期能幫助廣大財會工作者順利地進行該方面所得稅調整的會計處理。

一、無形資產攤銷方面會計與稅法的差異

（一）會計準則的規定

1.對于使用壽命有限的無形資產，應當在其使用壽命內將其價值系統合理地攤銷。如果無法可靠確定與該項無形資產有關的經濟利益預期實現方式的，應當采用直線法攤銷，即無形資產應當自可供使用時起開始攤銷，至不再作為無形資產確認時止。使用壽命不確定的無形資產，其價值不應攤銷。可見，會計準則規定無形資產的攤銷方法一般是采用直線法，如果有其他系統合理的攤銷方法也可采用其他方法，如生產總量法進行攤銷；無形資產的攤銷年限應是其經濟使用壽命。

2.使用壽命有限的無形資產，其殘值應當視為零，但如果有第三方承諾在無形資產使用壽命結束時購買該無形資產，或可以根據活躍市場得到預計殘值信息，并且該市場在無形資產使用壽命結束時很可能存在，則應保留殘值。

（二）稅法規定

1.無形資產不論其使用壽命確定與否，規定只允許采用直線法進行攤銷，且攤銷方法一經確定，不得隨意改變。使用壽命有限的無形資產攤銷年限是其法定使用壽命。作為投資或受讓的無形資產，在協議、合同或有關法律中規定使用年限的，可以按照協議、合同或者有關法律規定使用年限分期攤銷；如果協議、合同或有關法律沒有規定使用年限的，攤銷年限不得少于10年。使用壽命不確定的無形資產，攤銷年限也不得少于10年。

2.無形資產攤銷時不要求保留殘值。

（三）差異分析及所得稅調整

從上述會計準則與稅法的規定可以看出，無形資產的后續計量在不存在減值跡象的情況下，由于會計與稅法在攤銷方法、攤銷年限、預計殘值等方面存在著不同，從而導致會計上每期計提的攤銷額與按稅法規定每期計提的攤銷額會產生暫時性差異。這種暫時性差異可分為以下兩種情況：

1.使用壽命有限的無形資產產生的暫時性差異

上述公式中，會計的初始計量成本與稅法的初始計量基礎，對于外購的無形資產來說，通常情況下兩者是一致的，但對于外購無形資產的價款超過正常信用條件（3年以上）延期付款的，則兩者是不同的。

若（1）＞（2），會計處理上以（2）為準，則（1）與（2）之間的差異屬于無形資產本期產生的可抵扣暫時性差異，應調增本期的應納稅所得額。因而，在不考慮其他納稅調整因素的情況下，企業本期的應納稅所得額=本期的稅前會計利潤+本期產生的可抵扣暫時性差異，再按本期的應納稅所得額與適用的所得稅率計算的結果確認為本期的應交所得稅；同時將本期產生的可抵扣暫時性差異對所得稅影響的金額（遞延所得稅資產）作為對本期所得稅費用的調整（本期所得稅費用=本期應交所得稅－遞延所得稅資產本期增加額）。

若（1）＜（2），會計處理上以（2）為準，則（1）與（2）之間的差異屬于無形資產本期產生的應納稅暫時性差異，應調減本期的應納稅所得額。因而，在不考慮其他納稅調整因素的情況下，企業本期的應納稅所得額=本期的稅前會計利潤－本期產生的應納稅暫時性差異，再按本期的應納稅所得額與適用的所得稅率計算的結果確認為本期的應交所得稅；同時將本期產生的應納稅暫時性差異對所得稅影響的金額（遞延所得稅負債）作為對本期所得稅費用的調整（本期所得稅費用=本期應交所得稅+遞延所得稅負債本期增加額）。

2.使用壽命不確定的無形資產產生的暫時性差異

（1）會計本期攤銷額=0

顯然，若（1）＜（2），會計處理上以（2）為準，則（1）與（2）之間的差異屬于無形資產本期產生的應納稅暫時性差異，應調減本期的應納稅所得額。其他闡述見（1）中的同類情況。

（四）會計處理舉例

［例1］甲股份有限公司2010年1月1日接受A企業作為投資投入的一項非專利技術，雙方協議約定的價值為40萬元（公允價值也為40萬元），甲公司綜合考慮各方面的情況，確定該項非專利技術能為公司帶來未來經濟利益的期限為8年，有關法律沒有規定其使用年限。另外，甲股份有限公司根據市場發展的需要，于當年1月6日購入一項專利權，其入賬價值為100萬元，甲公司無法預計該項專利權為企業帶來未來經濟利益的年限。該項非專利技術和專利權預計的凈殘值為零。假設甲公司對非專利技術和專利權按年進行攤銷，年末均未發生減值。甲公司當年實現利潤總額為129萬元，適用的所得稅率為25%，且預計未來年度不會改變，不存在其他納稅調整因素，以前年度無遞延所得稅資產和遞延所得稅負債的余額。

綜合（1）與（2）可得：甲公司無形資產會計本年攤銷額=50 000+0=50 000（元），無形資產稅法本年攤銷額=40 000

+100 000=140 000（元）。顯然，甲公司無形資產會計本年攤銷額50 000元＜稅法本年攤銷額140 000元，因此，兩者之間形成的差異90 000元屬于無形資產本年產生的應納稅暫時性差異，應調減甲公司本年的應納稅所得額90 000元。

因甲公司當年不存在其他納稅調整因素，以前年度無遞延所得稅資產和遞延所得稅負債的余額。故：

甲公司本年的應納稅所得額=1 290 000－90 000

=1 200 000（元），

甲公司本年的應交所得稅=1 200 000×25%

=300 000（元），

甲公司本年產生的應納稅暫時性差異形成的“遞延所得稅負債”的本年增加額=90 000×25%=22 500（元），

甲公司本年確認的所得稅費用=300 000+22 500

=322 500（元）。

編制的會計分錄為：

借：所得稅費用322 500.00

貸：遞延所得稅負債 22 500.00

應交稅費――應交所得稅300 000.00

二、無形資產計提減值準備方面會計與稅法的差異

（一）會計準則規定

會計期末，如果無形資產的可收回金額低于其賬面價值，則應將其低于的金額確認為資產減值損失，計提相應的無形資產減值準備。無形資產計提減值準備后，其攤銷費用應當在未來會計期間作相應調整，即無形資產應攤銷的金額除扣除預計殘值外，還應扣除已計提的減值準備累計金額，以使無形資產在剩余使用壽命內，系統地分攤調整后的賬面價值。

（二）稅法規定

會計上本期計提的無形資產減值準備，不允許在稅前扣除，無形資產的計稅基礎也不得剔除減值準備，無形資產仍按初始計稅基礎采用直線法進行攤銷。

（三）差異分析及所得稅調整

從上述會計準則與稅法的規定可以看出，無形資產的后續計量在發生減值的情況下，會計上本期既要對使用壽命有限的無形資產進行攤銷，又要對無形資產確認減值損失，計提相應的減值準備，而稅法只對無形資產進行攤銷，因而導致會計上本期的攤銷額、本期計提的減值準備與稅法本期的攤銷額之間會產生暫時性差異。這種暫時性差異也可分為以下兩種情況。

1.使用壽命有限的無形資產產生的暫時性差異

會計本期攤銷額、稅法本期攤銷額的計算同“一”中的“（三）1.”

（1）若：（會計本期攤銷額+會計本期計提的減值準備）＞稅法本期攤銷額，則這兩者之間的差異屬于無形資產本期產生的可抵扣暫時性差異，應調增本期的應納稅所得額。其他闡述見“一”中的“（三）1.”同類情況。

（2）若：（會計本期攤銷額+會計本期計提的減值準備）＜稅法本期攤銷額，則這兩者之間的差異屬于無形資產本期產生的應納稅暫時性差異，應調減本期的應納稅所得額。其它闡述見“一”中的“（三）1.”同類情況。

2.使用壽命不確定的無形資產產生的暫時性差異

會計上本期不存在攤銷額，只存在計提的無形資產減值準備；稅法上本期仍按原初始計稅基礎進行攤銷。

（1）若：會計本期計提的減值準備＞稅法本期攤銷額，則這兩者之間的差異屬于無形資產本期產生的可抵扣暫時性差異，應調增本期的應納稅所得額。其他闡述見“一”中的“（三）1.”同類情況。

（2）若：會計本期計提的減值準備＜稅法本期攤銷額，則這兩者之間的差異屬于無形資產本期產生的應納稅暫時性差異，應調減本期的應納稅所得額。其他闡述見“一”中的“（三）1.”同類情況。

（四）會計處理舉例

［例2］承例1的資料，所不同的是甲股份有限公司2010年末對接受投入的非專利技術和外購的專利權進行減值測試時，發現專利權已發生減值，計提了無形資產減值準備12萬元。

本例的有關分析見［例1］。

1.甲公司該項非專利技術會計本年攤銷額=50 000（元），稅法本年攤銷額=40 000（元）。

2.會計上對使用壽命不確定的無形資產（專利權）不進行攤銷，但甲公司會計上對該項專利權本年計提了減值準備=120 000（元）；稅法對會計本年計提的無形資產減值準備，不允許在稅前扣除，但稅法本年仍攤銷的金額=100 000（元）。

綜合（1）與（2）可得：甲公司無形資產會計本年攤銷額+會計本年計提的減值準備=50 000+120 000=170 000（元），無形資產稅法本年攤銷額=40 000+100 000=140 000（元）。顯然，前者＞后者，因此，這兩者之間的差異30 000元屬于無形資產本年產生的可抵扣暫時性差異，應調增本年的應納稅所得額30 000元。

因甲公司當年不存在其他納稅調整因素，以前年度無遞延所得稅資產和遞延所得稅負債的余額，故：

甲公司本年的應納稅所得額=1 290 000+30 000

=1 320 000（元）；

甲公司本年的應交所得稅=1 320 000×25%

=330 000（元）；

甲公司本年產生的可抵扣暫時性差異形成的“遞延所得稅資產”的本年增加額=30 000×25%=7 500（元）；

甲公司本年確認的所得稅費用=330 000－7 500

=322 500（元）。

編制的會計分錄為：

借：所得稅費用 322 500.00

遞延所得稅資產 7 500.00

貸：應交稅費――應交所得稅 330 000.00

【主要參考文獻】

稅法的義務性范文第3篇

[關鍵詞] 羊水異常；超聲檢查；胎兒畸形

[中圖分類號] R715 [文獻標識碼]B [文章編號]1673-7210（2008）01（a）-083-02

Analysis of relationship between amniotic fluid volume and fetal malformation adjunct

LI Zai-hong，HAN Li

（Function test Dept，the Twelfth People′s Hospital of Guangzhou ,Guangzhou510620,China）

[Abstract] Objective: To analyze the relationship between amniotic fluid volume and fetal malformation adjunct.Methods:14 308 fetus above 24 weeks were analyzed from 2002 to 2005，there were 211 cases with abnormal amniotic fluid volume. Amniotic fluid volume and locations of malformation and placenta and fetal membrane and navel were studied. Results:There were 125 cases with hyperamnios and 86 with hypoamnios among 211 cases.Their rates with fetal malformation were 40% (51/125)and 23%(20/86) respectively.Conclusion:In the diagnosis of Color Doppler ultrasound，the high accuracy and no any hurting advantage are higher than other imaging method. Abnornal AMV is related to the fetal malformation and adjunct.

[Key words] Abnormal amniotic fluid volume；Color Doppler ultrasound；Fetal malformation

適量羊水具有維持胎兒體液平衡、保護胎兒、促進胎兒發育等重要作用。羊水量多少與胎兒有否畸形密切相關，尤其神經系統、消化系統及泌尿系統的畸形可以直接從羊水量反映出來。現將本院2002～2005年檢查的羊水異常211例分析情況報道如下：

1 資料與方法

1.1研究對象

本組211例羊水異常均來自我院2002年1月~2005年12月門診與住院妊娠24～41周初或經產婦。

1.2儀器與方法

應用美國ATL-3000型彩色超聲診斷儀，探頭頻率3.5 MHz。孕婦取仰臥位，多切面，多方位掃查，常規測量羊水最大深度，28周以后測量羊水指數，發現胎兒及附屬物發育異常，記錄及攝片。診斷標準參照《胎兒畸形產前超聲診斷學》[1]。

2 結果

羊水量異常211例孕婦中，125例羊水過多，其中51例合并胎兒畸形。51例胎兒畸形包括腦積水、腦膜腦膨出、脊柱裂、全前腦并心臟多發畸形、小腦發育不良等神經缺陷10例；消化道畸形10例（食管閉鎖3例、十二指腸閉鎖5例、下消化道梗阻2例）；先天性心臟病7例（大多數為室缺及心內膜墊缺損）；腹裂1例；臍疝1例；軟骨發育不良1例；唇、腭裂5例、不明原因胎兒水腫并胸腹積液6例；胎兒淋巴水囊瘤3例；胎盤絨毛膜血管瘤2例；臍帶假性囊腫1例；雙胎輸血綜合征3例；聯體雙胎1例；良性羊水過多74例。而羊水過少86例，其中20例合并畸形。20例合并畸形包括泌尿系統7例（多囊腎4例、雙腎發育不良2例、雙腎多發腎囊腫1例）。胎兒水腫綜合征（巴氏水腫胎13例）；宮內發育遲緩8例；胎盤早剝4例；胎膜早破1例、過期妊娠20例。

本組羊水過多者胎兒畸形的發生率為41%，羊水量過少者發生率23%。總計羊水量異常時畸形發生率32%。比魏茂華等[2]學者研究的發生率低。

3 討論

羊水量的多少是母體、羊水、胎兒三者之間雙向交換取得動態平衡的結果， 一旦平衡失調， 即可導致羊水過多或羊水過少。羊水量異常首先應想到胎兒有否畸形，尤其是泌尿系統畸形。羊水量正常不能說明泌尿系統沒有畸形。羊水過多，首先應排除消化系統畸形及影響胎兒吞咽的疾病(唇腭裂)及神經系統畸形（脊柱裂等）及肌肉系統畸形等[1]。

孕齡16周以后的胎兒，隨妊娠進展胎兒通過吞咽大量羊水、排尿行為、胸廓運動及呼吸道來參與調節羊水量；胎兒的皮膚也有明顯的吸水作用；臍帶的華通膠積極參與水的代謝。任何一個部位發生障礙，都可能造成羊水過多。明顯的羊水過多常伴有胎兒畸形，尤其多見于中樞神經系統畸形，中樞神經系統畸形(圖1)可能是由于腦脊膜，脈絡組織增殖，滲出液增加或者來自喪失了保護的腦脊中心的刺激，無吞咽反射或損害了血管加壓素的分泌而致抗利尿激素的缺乏引起的不能吞咽羊水和尿量多，造成羊水積聚[3]；消化系統畸形，例如十二指腸下段狹窄或閉鎖(圖2)，由于吞咽羊水的量不足而形成羊水過多；臍帶假性囊腫(圖3)被認為可能與局部華通膠退行性變有關，羊水吸收減少而致羊水過多。大的胎盤絨毛膜血管瘤(直徑>5 cm)可并發羊水過多、早產、胎盤早剝、前置胎盤等[4]。產后證實胎兒并無合并其他系統畸形，筆者認為羊水過多與大的胎盤絨毛膜血管瘤導致胎盤血流量增加有關。雙胎輸血綜合征及先天性心臟病合并羊水過多大多數由于血流動力學改變最后導致心衰引起。

孕齡20周后，羊水的生成主要或完全來自胎兒尿液，胎兒雙側泌尿系統畸形，胎兒泌尿量驟減，羊水來源減少，筆者發現一側腎缺如或發育不良，胎兒羊水量并無明顯減少，健側腎體積代償增大。雙側腎臟發育異常，羊水量測值均明顯減少，羊水過少發生的原因不明，一般認為與泌尿道畸形、胎兒宮內發育遲緩、過期妊娠、胎膜發育不全或功能減退以及胎盤功能不全有關[5]。本組羊水過少病例中，宮內發育遲緩8例，過期妊娠20例，胎盤早剝4例。可能由于胎兒宮內低氧，胎兒自身“腦保護效應”，導致腎血流量減少，泌尿量減少，表現為羊水相應減少。過期妊娠時，胎盤功能減退，灌注量不足，胎兒脫水，導致羊水減少。也有學者認為過期妊娠時，胎兒成熟過度，其腎小管對抗利尿激素的敏感性增高，尿量減少導致羊水過少[6]。

HbBart＇s水腫兒（即珠蛋白生成障礙性貧血引起）超聲表現為胎盤增厚，心胸比例增大，胸腹積液，心包積液，皮膚水腫。胎兒水腫綜合征常伴有羊水量異常。Poeschmann等[7]報道，非免疫性水腫兒73%羊水過多、12%羊水過少[8]，本組13例HbBart＇s水腫兒，全部羊水過少，水腫的發生可能是由于胎兒嚴重貧血導致體內外液體交換、血管內外液體交換平衡失調所致。羊水中的水分通過胎兒皮膚、羊膜向胎兒組織間隙及體腔中積聚 ，胎兒水腫，導致羊水過少。

羊水過少胎兒肢體明顯聚攏，臟器顯示困難，容易漏診，檢查中應格外仔細。曾經因為羊水過少、后壁胎盤、孕周過大漏診1例胎兒附屬物發育異常――帆狀胎盤并血管前置合并羊水過少。

胎兒畸形合并羊水異常較常見，因此，檢查者應仔細觀察胎兒各部位、各器官，加以認真分析與判斷。彩色多普勒影像能準確判斷臍帶血管與羊水，測量羊水量較精確，能動態觀察羊水量的變化，及時發現胎兒畸形。

[參考文獻]

[1]李勝利.胎兒畸形產前超聲診斷學[M].北京：人民軍醫出版社，2004， 85，555-557.

[2]魏茂華，王立坤.羊水量與胎兒畸形的相關性研究[J].醫學影像學雜志，2004，2：123-124.

[3]朗景和（主譯）.威廉姆斯產科學[M].第20版.西安：世界衛生出版公司西安公司，2001.693.

[4]Asadourian LA，Taylor HB. Clinical significance of p lacental hemangiomas[J].Obstet Gynecol，1968，31:5515.

[5]Cash JB，Powell DE. Placental chorioangioma: Presentation of a case with electron-microscopic and immunochemical studies[J].Am J Surg Pathol，1980，4:87.

[6]樂杰.婦產科學[M].第5版.北京:人民衛生出版社，2000.146-147.

[7]Poeschmann RP，Verheijen RHM，Van Dongen PWJ.Differential diagnosis and cause of nonimunological hydrops fetalis: A Review[J]. Obstetrical and Gynecological Survey，1991，4(4):223-231.

稅法的義務性范文第4篇

[關鍵詞] 蒙花苷；效應面分析法；金合歡素；醛糖還原酶抑制劑

[收稿日期] 2013-12-09

[通信作者] 張鐵軍，Tel：（022）23006848，E-mail：

[作者簡介] 王嬌，碩士研究生，Tel：（022）23006843，E-mail：

糖尿病慢性并發癥是嚴重影響患者生命質量的全身性病變，糖尿病視網膜病變是發病率較高的一種糖尿病慢性并發癥。醛糖還原酶抑制劑是通過抑制醛糖還原酶的活性，間接抑制多元醇通路的一類延緩和阻斷糖尿病并發癥的藥物[1-2]。近年來從植物提取出的具有抑制醛糖還原酶活性的化合物主要有黃酮類化合物。

蒙花苷為菊科植物野Chrysanthemum indicum L.的主要天然黃酮類成分[3]。近年來國內外研究表明，蒙花苷對大鼠晶狀體的醛糖還原酶（AR）有抑制活性[4]。本實驗室前期研究表明，蒙花苷屬于低溶解度，透過性較差的藥物[5]。藥物比表面積和脂溶性對藥物體內吸收有重要的促進作用，因此通過去糖基化增加蒙花苷的比表面積和脂溶性，對蒙花苷進行結構修飾。效應面法具有試驗次數少，精確度高，應用方便的特點，該設計方法可以很好地應用于藥學領域[6]。本研究以蒙花苷水解率為指標，運用效應面法進行蒙花苷水解工藝優化。選用經典的非細胞模型[7-9]，評價醛糖還原酶在水解物金合歡素干預下的變化。

1 材料

Lab Alliance高效液相色譜儀（SeriesⅡ一元泵系統，Lab Alliance色譜工作站）；AB204-N電子天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）；HS-3120超聲波清洗器（奧特賽恩斯機器有限公司）；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（鞏義市英峪高科儀器廠）。

蒙花苷對照品（實驗室自制，經HPLC歸一法檢測純度>97%），金合歡素（中國食品藥品檢定研究院）；甲醇（色譜醇，天津市康科德科技有限公司）；冰醋酸（色譜醇，天津市康科德科技有限公司）；其他試劑均為分析醇。

Wister大鼠，雄性，天津市山川紅實驗動物技術有限公司，動物合格證號SCXK（津）2009-0001。

2 方法與結果

2.1 含量測定

2.1.1 色譜條件 流動相乙腈-水-冰醋酸（40∶59∶1）；體積流量1 mL?min-1；檢測波長326 nm；進樣量10 μL；柱溫30 ℃。

2.1.2 標準曲線的繪制 分別精密稱取蒙花苷和金合歡素對照品5.35，11.00 mg，置于100 mL量瓶中，加甲醇溶解至刻度，作為蒙花苷對照品儲備液和金合歡素對照品儲備液。采用逐級稀釋法用甲醇配置成不同濃度的蒙花苷對照品溶液和金合歡素對照品溶液，搖勻，按照2.1.1項下色譜條件進行測定，記錄蒙花苷色譜峰面積及金合歡素色譜峰面積。以蒙花苷對照品溶液質量濃度為橫坐標（XL），峰面積積分值為縱坐標（YL）進行線性回歸，得回歸方程為YL=7XL-373.742，R2=0.999 2，線性范圍0.1～52.9 mg?L-1；以金合歡素對照品溶液質量濃度為橫坐標（XA），峰面積積分值為縱坐標（YA）進行線性回歸，得回歸方程為YA=7XA-4 828.128，R2=0.999 0，線性范圍2.2～110.0 mg?L-1。

2.1.3 水解率的計算 蒙花苷水解率=金合歡素峰面積/（金合歡素峰面積+蒙花苷峰面積）×100%。

2.2 單因素試驗設計

2.2.1 水解時間 稱取6份蒙花苷，按固液比1∶1，加入相應0.45 mol?L-1硫酸甲醇，攪拌加熱，水解溫度95 ℃，水解時間分別設為4，5，6，7，8，9 h，放冷，取上清液測定蒙花苷水解率，結果見圖1，可知最適水解時間為7 h。

2.2.2 酸濃度 稱取6份蒙花苷，按固液比1∶1，分別加入0.15，0.3，0.45，0.6，0.75 mol?L-1硫酸甲醇，攪拌加熱，水解溫度95 ℃，水解時間7 h，放冷，取上清液測蒙花苷水解率，結果見圖2，可知最適酸濃度0.45 mol?L-1。

2.2.3 固液比 稱取6份蒙花苷，分別按固液比1∶1，2∶1，3∶1，4∶1，5∶1，加入相應0.45 mol?L-1硫酸甲醇，攪拌加熱，水解溫度95 ℃，水解時間7 h，放冷，取上清液測蒙花苷水解率，結果見圖3，可知最適物料比3∶1。

2.3 效應面試驗設計

2.3.1 試驗設計 根據Box-Benhnken中心組合實驗設計原理[8]，結合單因素實驗結果，選擇對蒙花苷水解反應影響較大的酸濃度（X1）、固液比（X2）、水解時間（X3）3個因素作為考察因素，以水解率為響應值，采用3因素3水平的響應面實驗設計，見表1。

2.3.2 效應面試驗結果及數據分析 多元二次模型方程的建立與檢驗：各試驗點根據設計進行15次試驗，以水解率Y為響應值，試驗點設計及試驗結果見表2。

采用Design-Expert 7.1.6軟件對表2中實驗數據進行多元回歸擬合，得到蒙花苷水解的回歸方程：Y=0.91+0.15X1+0.013X2+0.23X3-0.037X1X2-0.16X1X3+0.027X2X3-0.098X12-0.056X22-0.16X32。

對該模型進行方差分析，結果見表3。結果顯示所選用的二次回歸模型具有高度的顯著性（P

效應面分析及優化：利用Design-Expert7.1.6軟件對回歸分析結果作相應的曲面圖，見圖4。根據Box-Behnken實驗所得結果及二次多項回歸方程，利用Design Expert軟件中的數據優化（numerical optimization）程序求得各因素最佳范圍分別為水解時間6.8～7.6 h，硫酸甲醇0.48～0.56 mol?L-1，固液比2.8∶1～3.1∶1。

2.4 驗證性試驗

依據二次多項回歸方程，選取的最佳水解條件為水解時間7.4 h、硫酸甲醇0.54 mol?L-1、固液比3∶1，預測最優水解率79.64%。為了驗證優化結果的可靠性，在最佳水解條件下進行了3組試驗，測得蒙花苷平均水解率為78.97%，RSD 0.90%，與預測值（79.64%）的偏差為0.8%，說明本實驗建立的數學模型工藝穩定，重復性好，可見該模型能較好地預測實際水解情況。

2.5 水解物金合歡素對醛糖還原酶抑制活性研究

2.5.1 醛糖還原酶的提取 Wistar大鼠頸椎脫臼處死，立即摘除眼球，分離晶狀體（冰上進行）放入20 mL 10 mmol?L-1β-巰基乙醇[含有135 mmmol?L-1磷酸緩沖液（pH 7.0）]中，勻漿，4 ℃離心30 min，取上清液，-20 ℃保存。

2.5.2 反應體系的建立 設立陽性對照組和陰性對照組，每組4個復孔。反應體系中加入180 mmmol?L-1磷酸緩沖液（pH 7.0）225 μL，1.0 mmol?L-1硫酸鋰溶液50 μL，10 mmmol?L-1 DL-甘油醛溶液50 μL，陽性對照溶液（提取的酶溶液100 μL），陰性對照組加去離子水100 μL混合，30 ℃預熱3 min，加入0.3 mmol?L-1 NADPH溶液50 μL，30 ℃反應30 min，加入0.5 mmol?L-1鹽酸150 μL終止反應，各測試管分別加入10 mmmol?L-1咪唑（含6 mmol?L-1氫氧化鈉溶液）10 μL，60 ℃反應20 min，室溫放冷后于激發波長360 nm ，吸收波長460 nm檢測熒光吸收度，見圖5，陰性對照為NADPH在此反應體系中自身氧化變化趨勢，陽性對照組中NADPH的熒光強度顯著降低，說明AR的活性較強。

2.5.3 標準曲線的繪制 180 mmmol?L-1磷酸緩沖液（pH 7.0）2 450 μL，1.0 mmol?L-1硫酸鋰溶液700 μL，10 mmmol?L-1 DL-甘油醛溶液700 μL，二甲基亞砜（DMSO）350 μL，提取的酶溶液1 400 μL和0.5 mmol?L-1的鹽酸2 100 μL混合后取出600 μL，分別加入NADP溶液0，1，2，4，8，16 μmmol?L-1，各測試管分別加入10 mmmol?L-1咪唑（含6 mmol?L-1氫氧化鈉溶液），60 ℃反應20 min，室溫放冷后于激發波長360 nm，吸收波長460 nm檢測熒光吸收度。以NADP溶液濃度為橫坐標，熒光強度為縱坐標，繪制標準曲線，計算得回歸方程A=13.195C+57.062（r=0.998 9），線性范圍為0～18 μmmol?L-1。

2.5.4 樣品溶液的配置 180 mmmol?L-1磷酸緩沖液（pH 7.0）采用倍比稀釋法分別將蒙花苷和金合歡素的DMSO溶液稀釋成一定濃度，溶液在終濃度時所含DMSO體積相等且小于2.5%。

2.5.5 篩選方法 按表5設置反應組，每個反應組中均加入提取的酶溶液50 μL，1.0 mmol?L-1硫酸鋰溶液100 μL，180 mmol?L-1磷酸緩沖液（pH 7.0）225 μL。

2.5.6 實驗結果 按照下式計算有效組分各濃度的抑制率。據各濃度的抑制率應用Origin Pro4.0軟件計算出IC50。抑制率=（A-B）/（A-C）×100%，式中，A為陰性對照組吸收度，B為樣品組吸收度，C為空白組吸收度。由此計算的蒙花苷醛糖還原酶抑制活性的IC50的平均值為3.53 mg?L-1，金合歡素醛糖還原酶抑制活性的IC50的平均值為2.74 mg?L-1。

3 討論

中醫藥治療糖尿病并發癥所使用的天然藥物毒副作用小，價廉易得，適合作為終身病的糖尿病患者服用。已有報道稱蒙花苷有較好的醛糖還原酶作用，但蒙花苷的溶解度小，生物利用度低，所以，改變蒙花苷的構型是增加其生物利用率的一個重要途徑。本研究從大鼠晶狀體中提取醛糖還原酶，建立了體外測定醛糖還原酶活性的反應體系，并觀察了蒙花苷和其水解物金合歡素對大鼠晶狀體醛糖還原酶活性的影響結果蒙花苷醛糖還原酶抑制活性的IC50的平均值為3.53 mg?L-1，證明蒙花苷具有較強的醛糖還原酶抑制作用，并且，經本實驗優化的蒙花苷水解工藝后，生成的水解物金合歡素（金合歡素醛糖還原酶抑制活性的IC50的平均值為2.74 mg?L-1）具有相似甚至為更好的醛糖還原酶抑制活性。通過水解蒙花苷脫糖基的工藝研究，使其從黃酮苷轉換成具有相似活性成分苷元，提高親脂、親油性，增加其生理活性，方便人體更好的吸收利用。

傳統的數理統計常通過正交設計或均勻設計尋求最佳的因素水平組合。但其中存在一些問題，如試驗的精度不夠，選擇的試驗取值僅僅是接近最佳取值，無法精確找到最佳點，條件優選憑經驗，不能靈敏地考察各因素間的交互作用等等。而響應面分析法是通過中心組合試驗研究幾種因素間相互作用的一種回歸分析方法，可從圖形方面分析尋求最優的考察因素和響應值[10-12]。本實驗對蒙花苷水解工藝條件進行了單因素和效應面優化實驗。結果顯示，水解時間和硫酸濃度對水解率的影響極其顯著，影響作用按主次順序排列為水解時間>硫酸濃度>固液比。確定最佳水解條件為時間7.4 h、硫酸甲醇0.54 mol?L-1、固液比3∶1，在此條件下，蒙花苷78.97%以上轉化為金合歡素。

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Optimization of hydrolysis process of linarin using response surface

methodology and research about ARI activity of glycosylation-acacetin

WANG Jiao， XU Jun， ZHANG Tie-jun

（1.Tianjin Medical University， Tianjin 300070， China；

2. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research， Tianjin Engineering Laboratory of Quality Control Technology of

Traditional Chinese Medicine， National Local United Engineering Laboratory of Modern Preparation and

Quality Control Technology of Traditional Chinese Medicine （Tianjin）， State Key Laboratory of Drug Delivery

Technology and Pharmacokinetics， Tianjin 300193， China）

[Abstract] Objective： To optimize the hydrolysis process of linarin by response surface methodology， and to use the model of aldose reductase to study the acacetin′s activity of aldose reductase inhibitory. Method： The model of acacetin enzyme in vitro was established by the determination of fluorescence absorption of NADPH， the inhibition rate of acacetin aldose reductase was calculated， and then the IC50 of hydrolysis was obtained. The hydrolysis process of linarin hydrolysis condition was optimized by using response surface method. Result： The results indicated that the IC50of acacetin （2.74 mg?L-1） was less than the IC50of linarin （3.53 mg?L-1）. Hydrolyzation time of 7.4 h， sulphuric acid concentration of 0.54 mol?L-1 and the ratio of material to liquid of 3∶1 were the optimum conditions. Conclusion： Hydrolyzate acacetin has preferable inhibitory activity of aldose reductase. The optimized hydrolysis condition of linarin is convenient to use with good predictability.

稅法的義務性范文第5篇

關健詞：科學發展觀；醫院；基層一線；機關；服務

醫院是救治病人的場所，基層一線的廣大醫務工作者，每天面對的是大量表情、心情、病情不一的病人，工作繁重、精神心理壓力大，為緩解基層一線廣大醫務工作者的壓力，為他們解決一些后顧之憂，使他們騰出更多的精力服務好病人。機關科室必須踐行科學發展觀，落實以人為本理念，堅持以基層一線廣大醫務工作者為服務重點，為促進醫院又好又快發展創造良好的環境氛圍。現將醫院機關職能科室服務基層一線存在的主要問題、主要原因，解決這些問題的主要措施簡述如下：

一、當前機關科室中存在的主要問題

1.服務基層一線醫務工作者不主動。少數機關科室服務意識淡薄，工作期間坐辦公室的多，基本不下到基層一線，除了處理自己所要辦的事外，很少聽取基層一線醫務工作者的所思所想；還有少數機關科室即使下到基層一線，對基層一線醫務工作者反映的問題，也要進行過濾，只對屬于自己職責范圍內的問題給予答復，對不屬于自己職責范圍內的問題，過后就如石沉大海、杳無音信等等。這些都是工作不主動的種種表現形式。

2.服務基層一線醫務工作者不及時。少數機關科室對基層一線提出需要解決的問題，明明是自己責任范圍能夠立刻解決，卻非要搞形式，走程序，左請示右匯報后再辦；還有的機關科室對基層一線提出需要幫助解決的問題，先來個經驗主義，自我“評估”，自作主張地認為辦與不辦，對基層一線的影響不是太大，因而有意無意拖著不辦，等把基層逼急了，告了狀才去幫助解決等等，這些都是工作不及時的各種表現形式。

3.服務基層一線醫務工作者不到位。少數機關科室服務基層一線除了不主動、不及時，還存在不到位現象。有時雖提供服務，但不全面、不徹底，明明能一次性把問題解決到位而沒有一次性把問題解決到位；有時提供服務的產品使用不久，就又出現問題，不僅基層一線醫務工作者不滿意，而且還會一定程序上影響基層一線醫務工作者服務病人的質量。

二、存在這些問題的主要原因

1.“官本位”思想作祟。存在上述問題的少數相關科室人員，或多或少地存有“官本位”的思想。認為自己手里掌握著一定的行政權力資源，你基層一線醫務工作者有些需要辦的事，不經過我點頭同意審核批準，就別想辦成。存在這種想法的機關科室，就會使本來應該主動服務基層一線的事情變成了基層一線求我為其辦事，我才為其辦理。這是典型的“官本位”思想在作祟，機關工作的優越感自我膨脹，自我放大，以為自己有了一官半職就可以做官當老爺了，忘記了自己手中權力是誰給的，應為誰服務，殊不知，水能載舟，也能覆舟。不然你這張所謂的“官椅”是坐不穩的。

2.“病人中心”理念淡薄。醫院是救治病人的場所，基層一線的廣大醫務工作者，每天面對前來就診的病人，都要一視同仁，精心施治，熱情服務，目的是讓病人安心、放心、舒心，使病人早日康復，展示鎮江四院廣大醫務工作者的良好面貌，這是以“病人為中心”理念的具體表現。而我們少數機關科室不能體諒基層一線工作的艱辛，慢騰拖拉的工作作風，陰晴不定的面部表情，以我為中心的傲慢態度，將會影響基層一線醫務工作者對病人施治的心情和專注度，是“病人中心”理念的淡薄，甚至是無視。

3.市場競爭意識缺乏。少數機關科室不能很好的服務基層一線，存在不主動、不及時、不到位的現象。主要是計劃經濟的意識還在腦海里存在。市場經濟意識不強或缺乏，對競爭缺乏足夠的認識。不知當今醫院的生存和發展，主要是在市場經濟規則下，以競爭取勝，靠服務、技術、環境等各方面的競爭優勢來吸引病人、留住病人，占領醫療市場。競爭可謂無所不在，無時不有，在競爭中占優勢，醫院就能生存和發展；反之，醫院就可能出現生存困難。因此，從某種意義上講病人就是我們的“衣食父母”。

三、如何減少或避免這些問題發生

1.轉變觀念，擺正位置。要解決機關科室服務基層一線的作風問題，首先要加強教育，強調機關服務基層一線是本職，基層一線服務病人是天職，兩者服務的目標是一致的，最終使病人少花錢治好病又得到優質的服務。通過教育要使機關科室轉變觀念，積極主動服務基層一線。要使機關科室擺正位置，樹立機關科室就是基層一線的“勤務員”的思想和觀念。

2.提升服務水平能力。機關科室有了服務基層一線的意識，還必須有服務基層一線的能力水平，有服務的意識，而沒有服務的能力水平，這種服務是無效的服務，只能給基層一線添亂。因此，要使服務有效高效，就必須注重平時自身各項業務能力的鍛煉，提高自身技能，掌握各項本領，做到業務知識爛熟于心，業務技能掌握手中。只要基層一線有需要，隨時都能提供優質高效的服務，為醫院發展爭做貢獻。