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一、指導思想和方針
(一)以科學發展觀為指導,推進積極的民政政策,解放思想,改革創新。
(二)根據新的《農村五保供養條例》,按照構建和諧社會和建設社會主義新農村的要求,以改善農村五保供養條件,完善農村五保供養服務機構(以下簡稱農村敬老院)養老服務功能,進一步提高五保供養對象服務質量為核心,大力提高全縣農村五保供養對象集中供養率為基礎,從整體上為提高全縣農村五保供養工作達到新水平提供保障條件。
(三)采取政府主導,社會參與,統一規劃,分期實施相結合的方針。
二、建設目標及任務分解
建設目標:各鎮(場)人民政府作為農村敬老院建設的責任主體和管理主體,要把提高五保供養標準和農村敬老院建設納入經濟社會發展規劃和社會主義新農村建設規劃,全面做好五保供養工作。其目標:從至20__年,新建30所標準化鄉鎮敬老院,新增入院五保對象3000人以上,集中供養率達到50%,每所敬老院平均入住100名以上五保供養對象。省民生工程分配我縣700張床位,全縣新增980個床位(擴建280張床位列入20__年民生工程上級配套資金),集中供養率達35%以上。同時,建成內部設施較齊全,服務功能較完善,管理較規范,五保對象較滿意的農村五保供養對象服務體系。
新建任務分解:新建980張床位任務分解到10個鎮,石弓30張,曹市100張,標里120張,臨湖106張,公吉寺80張,義門172張,新興124張,店集68張,林場80張,高公100張。
改造任務分解:陳大、青疃、楚店擴建大門等,院內適度綠化;馬店、龍山、丹城、牌坊、高公、公吉寺、城東、城西改造廚房、餐廳(各新建6間,長3.3米,寬9.5米)。
三、建設原則和形式
原則:堅持省級為主,地方配套;整合資源,完善功能,確保需要;統一標準,規范建設。
形式:一是以新建敬老院院民住房為主;二是整合資源,對撤并鄉鎮后能置換的辦公室、學校等適當進行改擴建;三是經濟薄弱的鄉鎮,對原有的敬老院進行改擴建,盡可能地增加床位數;四是添置設備和附屬設施建設。
四、投資規模及建設標準
(一)投資規模:計劃投入資金823.2萬元,按省規定標準進行建設,新增980張床位,每間2張床位,宿舍350間。同時,積極籌措資金,完善輔助設施,購置宿舍生活用品用具980套。
(二)建設標準:
1.布局。原則上應臨近鎮(場)人民政府駐地或集中居住區,交通便利,環境安全、衛生。
2.占地面積。新建或擴建100人的鄉鎮敬老院,院區面積原則上不少于20畝(含生產基地),要保證人均菜地0.1畝。
3.床位數量。新建、擴建或改建的鄉鎮敬老院,居室每間入住2人。
4.居住房標準:五保對象人均居住面積不少于10平方米,通風透光。新建為平房,房長3.3米,寬5.74米(另挑檐走廊1.2米),墻檐高3.3米,磚木結構、砌二四墻、沙灰口、一門兩窗(含紗窗、紗門簾、吊頂及室內外燈飾)。有條件的可建符合老年建筑設計要求的三層以下樓房,建房質量標準符合審定圖紙要求和國家強制性規定。
(三)設施功能標準:堅持從實際出發,按照經濟實用、環境優美、服務周到的要求建設。做到通電、通水、通路、通電話。
1.基礎設施。輔助用房床均建設面積4平方米,設置值班(辦公)室、廚房、餐廳(文體娛樂室)、儲藏室、衣物儲備庫、醫療(康體保健)室、適度活動場地、洗碗池(棚)、洗浴室和公廁及一定規模種養殖場地。家具用品齊全、統一,衛生設施清潔、方便,公共服務設施齊全,生產基地配套。
2.院容院貌。經濟實用、生活方便、環境適度美化綠化、生活區與生產區分設。
3.院辦經濟。做到蔬菜、肉、禽、蛋實現生產自給有余,年人均純收入400元以上。
五、建設資金籌集
敬老院建設所需資金:一是由省、縣通過財政預算按比例承擔;二是省、市、縣級福彩公益金安排;三是開展向城鄉孤老愛心認建認助等社會捐資活動解決。根據省、市民生工程文件按平均每張床位8400元的定額測算。具體測算補助標準為每張床位建設面積14平方米(居住房床均建設面積10平方米、輔助用房床均建設面積4平方米),每平方米造價(含土建、裝潢、供電系統和給排水系統等)600元。農村五保供養服務機構的內部設施、設備等基本配置經費,由縣財政另行安排解決,不在8400元的補助標準之內。
六、項目建設與管理模式
縣人民政府是農村五保供養服務機構建設的責任主體,負責建設的組織領導、規劃制定以及配套資金、優惠政策。項目建設以鎮(場)政府為主體,按照工程建設的規定,實行法人責任制、招投標制、工程監管制和合同管理制。縣財政部門對資金實行專戶管理,按照工程進展監督撥款,工程啟動時撥付資助額的50%,土建工程完成后撥付資助額的30%,竣工驗收合格、決算 審計結束后撥付15%,預留5%的質保金,一年后無質量問題付清。
七、實施步驟
第一季度,一月布置任務,鎮(場)申報;二月編制項目建議書及實施方案,落實鎮(場)承諾,進行項目選址,編制長遠規劃;三月確定今年床位數量,對主體工程和輔助工程進行資金測算,細化實施方案,進行申報立項,進入招投標、聘請監理和質檢人員。
第二季度,四月及時簽訂施工合同,做好開工前的檢查和安全管理,4月份要開工建設,4-6月為緊張的施工期,嚴格按照設計進行規范施工,保證工程質量。工程分階段驗收達標,進入下階段工期,鎮(場)要配備專職工程質量和進度督察員,認真進行現場督查,施工、監理等有關人員要到崗到位;民政局、財政局等部門定期不定期開展監督檢查,確保工程質量和進度。
第三季度,七月對照標準,全面驗收,做好決算,進入審計階段;八月做好入住老人的摸底工作,選聘敬老院管理人員,采購、落實附屬設施、設備、生活用品用具,建立健全規章制度,做好入住前準備工作;九月完成入住任務。
第四季度,十月及時開展入住老人和管理人員的教育、培訓工作;十一月開展集中居住檢查評比考核。十二月工作總結,謀劃20__年工作。
八、敬老院運作體制和管理模式
(一)農村敬老院的管理責任主體是鄉鎮政府,政府投資新建的鄉鎮敬老院所有權歸鄉鎮政府。鎮(場)政府要加強農村敬老院建設和管理,按照院民與工作人員10:1的比例招聘敬老院院長和其他工作人員,各地應采取公開招聘的形式,聘用有文化、懂管理、對服務對象有愛心的、年齡在55周歲以下同志到農村敬老院任職,并報縣民政局備案。縣民政局和各鎮(場)實行年度考核,考核稱職的繼續聘用,不稱職的予以解聘。
(二)農村敬老院的管理經費,按照實際集中供養床位數年人均不低于1200元的標準列入財政預算,全年分兩次按實際床位數劃撥到鄉鎮敬老院專戶,主要用于工作人員工資和敬老院維護發展經費,敬老院管理工作人員生活和補助標準,50人以下規模的敬老院,院長月工資600元,其它工作人員月工資500元;50人以上規模的敬老院,院長月工資800元,其它工作人員月工資600元。
(三)小額臨時醫療救助資金按實際供養床位人數年人均不低于360元的標準,于年初從城鄉醫療救助資金專戶撥到敬老院專戶,作為集中供養人員小額臨時醫療費;患大病住院治療,按新農合報銷分割部分,由鄉鎮民政辦審核報民政局審批從城鄉醫療救助經費中解決。
(四)敬老院要積級開展生產自給活動,增加經濟收入,改善敬老院五保對象的生活,實現蔬菜、禽、魚、蛋、肉自給。
八、保障措施
1、加強領導。各鎮(場)要采取有效措施,精心組織,確保五保供養服務機構建設順利實施。要把五保供養工作和敬老院建設納入當地經濟社會發展規劃,成立專門的領導小組,鎮(場)書記為第一責任人,分管領導為項目負責人,民政辦主任為具辦人。
一、指導思想
以素質好、態度好、技能好、效率好為主要目標的服務質量競賽活動和以“零距離、零推諉、零投訴、零積壓”為主要內容的窗口形象示范活動為載體,促進全系統干部職工文明素質進一步提升,服務環境進一步改善,服務水平進一步優化,為建好恩來家鄉、加快蘇北重要中心城市建設、建成全面小康社會提供道德支撐和精神動力。
二、活動范圍
全系統窗口服務單位。
三、活動內容
(一)開展服務設施達標活動。各窗口服務單位要積極為市民提供整潔優美的服務環境。服務場所要做到環境舒適、設施齊全、衛生良好、物品擺放有序,要設置服務公示欄、引導牌、宣傳欄、便民書報角、飲水機、便民藥箱等便民服務設施,為群眾創造舒適的服務環境和人文環境。在醒目地點放置窗口審批服務事項《辦事指南》,含項目名稱、申報材料、辦理程序、承諾時限、收費依據、項目依據等。盡量統一著裝、掛牌上崗,坐姿端正、站姿穩重、儀表端莊。熱情接待服務對象,耐心準確答疑,盡量提供方便,用語文明,不講“忌語”。
(二)開展服務質量競賽活動。圍繞爭當服務明星,各窗口服務單位要以服務人民、奉獻社會為主題,大力開展文明服務培訓,強化從業人員服務意識和奉獻意識,改善服務態度,提高服務質量和水平,營造文明和諧的服務環境。要把提升窗口工作人員素質、增強服務意識、改進工作作風、提高辦事效率和服務質量、塑造良好形象作為競賽活動的重點,進一步提高服務窗口文明優質服務水平,提高消費者的滿意度。
(三)開展窗口形象示范活動。以“零距離、零推諉、零投訴、零積壓”為標準,大力開展窗口形象示范活動,積極營造人人重服務、處處抓服務、事事講奉獻的濃厚氛圍。推行“三聲”服務,做到服務方式“零距離”。所有工作人員對前來辦事的群眾做到“來有迎聲、問有答聲、去有送聲”,做到有問必答,百問不厭。實行首問負責,做到服務受理“零推諉”。規定第一個接待辦理審批事項的人員即為“首問負責人”,“首問負責人”必須為辦事人提供向導服務,并做到“回答問題一口明,審驗材料一手清,辦事手續一次行”。堅持開門納諫,做到服務標準“零投訴”。設立投訴意見箱和投訴電話,市局定期采取“實地察看和暗訪檢查相結合,查閱內部資料與群眾投訴舉報查處相結合,領導抽查與聘請政風行風監督員檢查相結合,日常檢查與專項檢查相結合”的“四結合”辦法對各服務窗口進行全面的考評,嚴厲查處違規違紀人員,力爭達到“零投訴”。實行限時服務,做到服務事項“零積壓”。對審批項目實行“急事急辦,特事特辦”,為重點項目實行重點服務。簡化辦事手續,對常規業務實行限時辦理,盡量當天完成;對于不能當天辦理的,與辦事人約定辦理時限。
四、活動步驟
第一階段,宣傳教育(7月中旬)
各窗口服務單位要結合本自身工作實際和行業特點,制定具體的、可操作性強的實施細則,并召開會議進行學習動員,對廣大干部職工和服務人員進行職業道德教育、誠信服務教育、作風紀律教育,明確活動的目的意義、目標任務和方法步驟,進一步統一思想,明確目標,提高參與優質服務主題實踐活動的積極性和主動性。
第二階段,組織實施(7月下旬至8月下旬)
圍繞活動內容要求和標準,結合實際,制定有利于加強職業道德建設和提升服務效能的舉措,采取多種形式,廣泛開展主題實踐活動,重點要做好“四查、四看”:一是查建立完善制度措施情況,看制定出臺的相關服務制度規定和服務措施是否具有針對性和可操作性,并得到有效落實。二是查文明服務、誠信經營情況,看有無話難聽、事難辦,對服務對象冷橫硬,欺詐顧客。三是查環境衛生,看有無衛生死角,便民設施是否完備。四是查投訴處理機制情況,看受理投訴渠道是否暢通,解決投訴是否及時有效。
第三階段,督查整改(9月上旬至10月上旬)
對于各窗口服務單位活動開展情況,市軟建辦將采取聽取匯報、查看資料和明察暗訪等形式進行督查,同時組織和邀請人大代表、政協委員、行風監督員等,對窗口服務活動進行評議和定期巡查,進一步督促窗口單位查擺問題,分析原因,整改落實。
第四階段,長效管理(10月中旬以后)
各窗口服務單位要及時總結實施優質服務主題實踐活動以來的成效,對存在的問題,要分析原因,提出改進措施,進一步健全規章制度,落實監管責任,堵塞管理漏洞,形成長效管理機制,使各項工作更加符合經濟社會發展的需要,更加符合人民群眾的利益和意愿。
五、相關要求
(一)加強組織領導。各窗口服務單位要緊密結合業務工作,加強領導和指導,明確領導責任、工作機構和工作人員。要根據本行業特點,制定實施細則,明確目標任務、活動載體、具體措施,細化要求,推動落實。
關鍵詞:旅游業服務外包可行性對策
隨著我國加入WTO和經濟全球化的深入,多種經濟成分的產業經營模式逐步滲入我國的經濟領域。眾多發達國家的跨國公司在向發展中國家大量轉移其制造業的生產職能和加工基地后,現在又開始將其非核心的服務產業的部分職能向海外特別是新興市場國家和地區轉移。旅游業作為一種重要的服務產業,也將不可避免地迎來由服務生產國際分工而導致的機遇和挑戰。
一、服務外包的概念和由來
服務外包(servicebusinessprocessoutsourcing),或稱離岸服務外包,是指作為生產經營者的業主將服務流程以商業形式發包給本企業以外的服務提供者,以保持服務的穩定供應以及最優的質量和最低的成本的經濟活動。其本質是通過合同發包、分包或轉包等方式向第三方轉移非核心的商業技術和服務流程,以提高資源的配置效益和利潤空間。近年來,隨著國際通訊和網絡技術的快速發展,使發達國家的大型跨國公司將低附加值的經營環節和服務職能轉移到相對具有比較優勢的發展中國家,自己則專注于產品研發、生產管理、財務運作、營銷推廣、產業升級等具有相對競爭優勢和高附加值的核心業務,服務外包由此發展起來。服務外包的產生于上世紀80年代IT產業的軟件服務,在90年代由于“計算機千年蟲問題”得到加速發展。隨著服務外包這種經營模式在IT領域的成功,本世紀初外包業務范圍逐步拓展到金融、保險、醫療、資產管理、顧客服務等服務業領域。據統計,全球的服務業外包市場已從2001年的1500億美元增長到2004年的3000億美元,成為一項新的全球性產業轉移和增值模式。從外包方式上看,離岸外包將成為服務外包的主要方式,如國際零售業巨頭沃爾瑪公司提出將把80%的公司外包業務采用離岸方式。著名管理咨詢公司麥肯錫預測,今后五年內,美國白領工作的離岸外包將增長30%。
二、旅游業發展服務外包的可行性
旅游業作為國民經濟的一項支柱產業,一直都是服務業的重要組成部分。如同服務業的產生與發展是有歷史階段一樣,旅游業本身就是一個集吃、住、行、游、購、娛等相關要素于一體的關聯度較高的傳統產業。隨著近年來我國旅游業的迅速發展,行業的規模不斷擴大,產業結構得到了進一步的改造和提升,實現了現代管理理念指導下的現代高科技、信息化的運營模式。在此基礎上,產品形態日趨復雜化和專業化,與相關傳統產業及新興產業的交叉和融合進一步加劇,對原來形成的產業固定化邊界進行了一定程度的調整和改造,出現了諸如會展旅游、旅游咨詢、旅游規劃與策劃、旅游信息服務等新型業態。但幾乎與此同時,也發生了行業惡性競爭激烈、經營績效持續下降、行業管理邊緣化的不良現象。因此,如何有序、規范、健康地發展我國旅游業,提高行業自身效能和產業層次,是新時期我國旅游業界和學界普遍關注的問題。
旅游業作為一種高成長性的服務產業,其產業擴張能力和滲透性較好,因此具有外包的潛力。旅游業在原有生活核心業態的基礎上,受到生產服務業、專業服務業、信息服務業、創意服務業的明顯影響,從而引致旅游業內部結構和能級提升,出現了高增值性、高層次性、高功能性、高技術性、高知識性的新特點。隨著我國旅游產業規模的不斷增長,“入世”的呼聲日漸高漲,通過外包的方式實現與國際旅游業接軌的內在需求已經成熟。
其次,旅游業是服務業經濟中一個較為活躍的產業代表,是國家經濟和社會繁榮的“晴雨表”,包含了傳統服務業的內容和現代服務業的元素,有著顯著的二元結構特征,即以生產和生活為其要素的產業結構模式。而隨著旅游業的發展和延伸,現代企業制度的普及和生產職能的強化,旅游業的服務對象也擴大到了生產者,建立以生產為主體的新型旅游業已是大勢所趨。這就要按生產要素和生產方式來重新布局旅游產業,通過“歸核化”的戰略,將“非核心”的生產環節通過外包的方式加以整合、重組,實現旅游業產業結構的優化和升級。
由于現代旅游服務業同樣具有高技術性、高知識性和高人力資本等現代服務業特征,因此決定了在同樣的產出水平下,無形智力投入較高而有形資產投入較少,引進外包經營方式,不僅能直接創造價值增量,還有降低經營成本、提升經營效益、增加無形資產等間接途徑和作用。如現代企業的一些非核心業務的外包,使旅游業為生產性企業提供第三方會展、商務等專業服務成為可能,從而形成某種經營功能的規模化效應,促使企業經營成本的大幅度下降。又如旅游規劃或策劃、旅游咨詢和信息服務的外包,可使企業的經營效益大幅度提高,創造可觀的經濟價值。再如旅游企業形象的策劃和營銷、旅游廣告的宣傳運作,將使企業的品牌聲譽和社會形象得到明顯改善,無形資產的價值也就隨之上升。
三、旅游業發展服務外包的對策和建議
服務外包作為一種新型的管理思想和經營實踐,將成為旅游業今后獲取競爭優勢和實現自身可持續發展的重要戰略抉擇之一。由此,筆者認為,應圍繞以下幾個方面開展服務外包,搶占旅游業發展的制高點,形成現代服務業驅動GDP增長的新型發展模式。
(一)加強旅游業服務外包的外部環境建設
相比生產性企業而言,服務性企業對外部環境的依賴更大。各級政府相關部門應集中建設公共支持技術平臺,強化對旅游業服務外包的技術支持和基礎,以低廉的使用成本向服務外包企業提供旅游產業的綜合開發環境、服務環境和管理環境,制定針對承接服務外包的優惠政策,降低企業運營成本,改善其運營環境。積極構建旅游服務的外包數據庫,為旅游企業提供服務外包政策咨詢、信息服務和業務指導工作,使企業能把握服務外包國際市場動向和發展趨勢,在發展中少走彎路。另一方面,采取政府指導,市場化運作的方式,鼓勵引進世界著名的專業化旅游服務商,優化配套服務措施;鼓勵境內、外企業參與旅游相關產業帶的基礎建設,加快建設進度,提高旅游服務產業的規劃和建設水平。加大地方知識產權保護的執法力度,增強旅游外包企業的知識產權保護意識;在已經建立的行業規范的基礎上,集成現有法律、法規,構建服務外包政策體系,充分利用已有的政策資源,形成對服務外包的支持體系。
(二)旅游業服務外包的組織文化協調和流程再造
企業與外包商的文化協調,是指在外包運作過程中,外包雙方能相互尊重,,努力擴大雙方產業文化的兼容性和共識面,從而有效地減少或降低因文化沖突和摩擦帶來的不利影響。旅游業通過實施服務外包,各相關企業的組織機構和運作機制都將發生較大的改變,經營職能也將隨著外包業務控制權的轉移而與以前有所區別,這必然要求企業對自身的組織文化和運作機制進行再造,以確保旅游企業外包業務的正常運營。具體地說,企業應就實施外包的業務制定切實可行的合作模式,整合各方資源,共同建立科學、有效的溝通機制,包括:定期舉行信息會、案例分析會、提交各自的業務報告等,盡量消除交流中的文化壁壘,充分了解外包企業的相關信息,并采取建設性的態度化解因組織文化差異引起的各種糾紛。其次,對外包企業的生產模式和服務流程進行監控,及時搜集和反饋業務運轉信息,提供必要的協助和業務培訓,建立外包服務產品的評介體系和質量標準,以使外包企業的服務產品符合自身的質量要求。最后,企業還應本著互助與誠信的原則,與外包商就售后服務、企業CIS的統一化等建立可靠的協商機制。
(三)旅游服務外包的人才培養
人才是保證旅游服務外包成功的根本前提,旅游業發展服務外包離不開大量既熟悉旅游企業經營管理模式,又具備相關外包理論知識和實踐經驗的專門人才。我國發展旅游服務外包尚處于起步階段,相關的人才嚴重不足,尤其缺乏具有相關技術和項目管理能力的高級管理人才。同時,由于旅游業人力資源的流動性較大,服務業外包缺乏相應的知識產權的保護,也會阻礙旅游服務外包的進一步發展。因此,對于服務外包這種快速增長的行業來說,建立一套完善、有效的人才供給機制顯得更加緊迫。政府可以通過建立專屬的服務外包管理機構,聯合行業協會和服務外包行業工會,為服務外包人才的培養提供引導與支持;第二,通過舉辦國際性企業與人才洽談會,搭建有利于人才與企業交流的平臺;第三,推動建立“產學聯盟”,支持大學的商學院建立“服務外包人才培養基地”,按照全球服務外包的發展趨勢與特點,包括管理、策劃、運作、外語能力等,為服務外包企業培養和提供高素質的服務外包人才;第四,全面推行職業資格認證制度,制定相關政策吸引和聘用海外高級人才,鼓勵“海歸人才”回國創業,以提升我國旅游服務外包業的國際化水平。
四、結論
世界服務業加速現代化和跨國轉移的趨勢,一方面進一步推動了世界經濟向服務經濟轉型;另一方面也使服務業日益告別傳統的地緣導向發展模式,不斷打破時間、空間乃至文化、觀念的隔離,開始進入全球化發展階段。這不僅使服務業的全球重組和資源優化配置達到了空前高度,也正在使世界各國經濟、產業、技術創新乃至經營管理模式出現全方位變革,對世界經濟的重大影響。我國旅游業正進入快速發展期,特別是其中的科技、研發及營銷、設計等環節,對整個產業鏈的技術進步和創新越來越有關鍵性的決定作用。在此基礎上,積極發展旅游業服務外包以促進服務業現代化,是落實科學發展觀、轉變經濟增長方式的客觀要求,對于實現十一五經濟社會發展目標具有重要戰略意義。
參考文獻
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[2]周振華,現代服務業發展研究[M].上海:上海社科院出版社,2005.(189)
[關鍵詞]納米羥磷灰石-脂肪族聚酯酰胺;成骨細胞;生物相容性
[中圖分類號]R 783.1[文獻標志碼]A[doi]10.3969/j.issn.1673-5749.2012.01.009
Biological effects of nano-hydroxyapatite-aliphatic polyester-amide composite on the osteoblastsDeng Xia1, Xia Xi2.(1. Dept. of Stomatology, Nuclear of Industry 416 Hospital, Chengdu 610051, China; 2. Dept. of Prosthodontics, The Affiliated Hospital of Stomatology, Chongqing Medical University, Chongqing 400015, China)
[Abstract]ObjectiveTo evaluate the biological effects of nano-hydroxyapatite-aliphatic polyester-amide composite(nHA-PEA)on the osteoblast.MethodsThe Dulbecco minimum essential medium(DMEM)leaching liquor of nHA-PEA was applied to the osteoblasts of the test groups while the DMEM itself was applied to control. The methyl thiazolyl tetrazolium assay, flow cytometry and alkaline phosphatase(AKP)analysis were used to evaluate the changes in cell growth, cell cycle and cell function. Moreover, osteoblasts were cultured on the surface of nHA-PEA composite and the attachment, growth and proliferation of osteoblast were investigated. Results The cultured osteoblasts grew well and showed nomorphological variation. Osteoblasts of different test groups demonstrated relative proliferation rate ranging from 92%~107% without dose-dependent effect(P>0.05). The cell cycle and AKP activity were similar in test and control groups(P>0.05). Good cell attachment and proliferation manner were observed on the membranes. ConclusionnHA-PEA has no negative effects on the osteoblast and its osteoblastcompatibility is proved.
[Key words]nano-hydroxyapatite-aliphatic polyester-amide composite;osteoblast;biocompatibility
有機-無機復合生物材料是組織工程學研究的熱點[1],該材料主要用于修復和重建人體的硬組織。納米羥磷灰石-脂肪族聚酯酰胺(nano-hydroxyapatite-aliphatic polyester -amide composite,nHA-PEA)復合材料由nHA粒子與PEA均勻混合制得,其中羥磷灰石(hydroxyapatite,HA)是人體骨、牙等無機組織的主要成分,PEA及其共聚物是一類新型的生物可降解高分子材料[2]。nHA- PEA復合材料兼具了有機物的韌性和無機物的剛性,具有良好的理化性能。本研究將nHA-PEA復合材料作用于體外培養的成骨細胞,檢測其對細胞生長、增殖能力、細胞周期、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性的影響,觀察細胞在其表面的黏附、鋪展形態,評價其對骨細胞的相容性和生物活性。
1材料和方法
1.1主要材料和儀器
達爾貝科極限必需培養液(Dulbecco minimum
essential medium,DMEM)、胰蛋白酶(Gibco公司,美國),新生小牛血清(成都哈里生物工程有限公司),甲噻唑四唑氮(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)試劑(Sigma公司,美國),AKP試劑盒(北京柏定生物工程有限公司)。Sanyomco-17AI二氧化碳孵箱(Sanyo公司,日本),Olympus IX50相差倒置顯微鏡(Olympus公司,日本),JSM-5900LV型掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM;JEOL公司,日本),可見光高效分析儀/HTS 7000plus多孔板紫外/熒光(PE公司,美國),流式細胞計數(flow cytometry,FCM;Coulter公司,美國),LightCycler檢測儀(Roche公司,德國)。1.2浸提液制備
按文獻[3]制得4組nHA-PEA復合材料,按其無機和有機成分的質量分數分組,分別為A組0和100%,B組10%和90%,C組20%和80%,D組30%和70%。將4組nHA-PEA復合材料(平均厚度0.5~1 mm)消毒滅菌后,按照國際標準化組織ISO 10993-5醫療器械生物學評價標準所推薦的試樣表面積和浸提介質為6 cm2·mL-1的比例[4],置37℃濾除細菌的培養液中,浸提3~4 d的浸提液備用。
1.3成骨細胞培養和細胞懸液的制備
取生長穩定的第4代SD乳鼠顱骨成骨細胞,經質量分數0.25%的胰酶消化后行細胞計數,用DMEM配制5×104個每毫升的細胞懸液。
1.4甲噻唑四唑氮比色
將200μL密度為5×104個每毫升的細胞懸液加入96孔板,置于體積分數5%的二氧化碳培養箱,37℃培養24 h,細胞貼壁后棄掉原有培養液,將細胞分為試驗組(A~D)和對照組(E),試驗組每組均分別加入200、100、50μL終質量分數分別為100%、50%和25%的浸提液,形成A1、
A2、A3,B1、B2、B3,C1、C2、C3,D1、D2、D3,
對照組加入原培養液。每日于相差顯微鏡下觀察細胞形態,生長和增殖情況。分別于第1、3、5、7 d各取96孔板1塊,每孔加入20μL的MTT,孵育4 h,每孔加入200μL二甲基亞砜,振蕩1 min,混勻,570 nm波長下測定各孔吸光度(A),取3孔均值,計算細胞增殖率(proliferation rate,RP):RP=(A試驗組/A對照組)×100%。1.5流式細胞計數
接種對數生長期的成骨細胞1×105個每毫升瓶,細胞貼壁后A~D組棄原培養液加入質量分數均為100%的復合材料浸提液,E組加入新鮮原培養液,標準環境下3 d換液1次,培養7 d,消化、離心并收集沉淀細胞。流式細胞計數DNA熒光強度及散光參數,Multicycle軟件分析細胞的周期分布和程序性死亡情況。1.6堿性磷酸酶活性檢測
取1×105個每毫升的細胞懸液3 mL加入小號培養瓶,將其置于體積分數5%的二氧化碳培養箱,37℃培養24 h,細胞貼壁后棄掉原有培養液,A~D組均加入質量分數100%的浸提液,E組加入新鮮原培養液,分別于第4天和第7天中止培養,收集80μL細胞懸液,以AKP試劑盒通過HTS 7000plus多孔板高效分析儀行AKP活性測試。
1.7成骨細胞與材料的復合培養
將載有nHA-PEA復合膜的血蓋片試樣置于6孔板內,環氧乙烷冷消毒,磷酸緩沖鹽溶液浸泡清洗3次,每次1 h,DMEM孵育過夜備用。取1×105個每毫升的細胞懸液,分別接種于已準備好的材料上,37℃,體積分數5%的二氧化碳孵箱繼續靜置培養5 d。分別于第1天和第5天將試樣取出,以體積分數10%的多聚甲醛固定,體積分數30%~100%的乙醇梯度脫水,醋酸異戊酯置換乙醇,臨界點干燥,表面噴金,SEM下觀察。1.8統計學分析
使用單因素方差分析,分析各組總體均數間差別有無統計學意義,在檢驗數據之前對數據行方差齊性檢驗。用q檢驗比較兩組間均數的差別。P>0.05為差異無統計學意義。
2結果
2.1細胞生長觀察及甲噻唑四唑氮比色結果
顯微鏡下,不同質量分數的nHA-PEA復合材料浸提液組及對照組細胞培養6 h后均已貼壁,12 h細胞突逐漸舒展,24 h細胞開始鋪展,72 h后細胞數目明顯增多,排列規則密集,細胞呈梭形、三角形或不規則形,形態分析各試驗組與對照組細胞形態相似,顯示各組細胞均生長良好。試驗組和對照組不同時間的MTT比色結果見表1。試驗組間的MTT值及其與其對照組間的差異無統計學意義(P>0.05);試驗組成骨細胞的相對增殖率為92%~107%,不同質量分數的nHA-PEA復合材料浸提液組對成骨細胞的細胞毒性級數為0~
1級(0級:細胞相對增殖率大于等于100%,1級:細胞相對增殖率為90%~99%)[5],不同質量分數浸提液組間差異無統計學意義(P>0.05)。
3討論
在生物醫學材料的細胞毒性試驗方法中,最常用的是材料浸提液培養法和細胞材料直接接觸法。本試驗綜合運用了這兩種方法,首先選擇浸漬法,具體原因如下。1)對于nHA-PEA復合材料,nHA的生物相容性勿庸置疑;而PEA是新型的人工合成的生物降解型高分子材料,其理化性能和降解性能已有相關研究[6],但其生物相容性鮮有報道。2)由于直接接觸法共同培養時,細胞對材料表面和對培養孔板底部的黏附性有差異,細胞洗脫率的不同會產生干擾而使試驗復雜化。事實上,僅需考察nHA-PEA復合材料溶出物的
細胞毒性,就可以達到初步評價其生物相容性的目的,而且以材料的浸提液代替材料本身在材料學的研究中已得到公認。本試驗嚴格按照國際標準化組織ISO 10993-5醫療器械生物學評價標準和要求制備生物醫學材料浸提液[4],以浸提出最大量的濾出物質,考察其對成骨細胞增殖和細胞周期的影響。
MTT比色是常用的細胞增殖能力檢測方法,可以對材料的細胞毒性作出可靠的定量評價[5]。本試驗在相差倒置顯微鏡下觀察到nHA-PEA復合材料浸提液不影響細胞的生長形態;MTT值在試驗組間以及各組與對照組間差異無統計學意義,試驗組的細胞增殖率在92%~107%,表明nHA-PEA復合材料浸提液對成骨細胞的生長無不良影響。因此在進一步地對細胞周期和功能進行的分析中,僅選用最高質量分數的nHA-PEA復合材料浸提液作為試驗組進行分析比較。在加入HA的試驗組,MTT值略高于對照組,但差異無統計學意義且無量效關系。原因可能與其中的鈣、磷水平較高有關。
流式細胞計數已廣泛應用于腫瘤學、生物化學和免疫學等領域,細胞周期檢測已成為生物材料生物相容性評價的一種可靠方法和指標[7],是常規細胞增殖試驗的一項重要補充。近年來,生物材料生物相容性研究進展之一是生物材料的生物功能性評價[8]。生物材料作用于細胞后使其周期改變,從而使其行為和功能發生改變。本試驗在MTT比色的基礎上進一步使用流式細胞計數,旨在從細胞增殖周期的角度來分析nHA-PEA復合材料浸提液對細胞增殖周期DNA合成的影響,從分子水平上評價材料的細胞毒性。從MTT比色可見,組間、組內不同質量分數的nHA-PEA復合材料浸提液對成骨細胞的增殖和增殖周期影響不大,細胞周期各亞期組成比和程序性死亡率差異亦無統計學意義。B、C、D組處于S期的細胞略多,表明加入HA對細胞增殖有一定促進作用,但不顯著,不存在量效關系。此結果與MTT比色結果一致。
除了對細胞增殖的影響,生物材料的細胞相容性還表現在材料對細胞重要功能的影響。AKP是骨形成所必需的酶,是生物礦化和成骨細胞分化成熟的早期標志物[9-10]:其表達代表骨形成狀況,表明細胞分化的開始,并隨細胞分化的發展而增強;其活性的高低,反映了相應細胞向成骨方向化的趨勢。本研究采用酶聯法對成骨細胞AKP的表達進行檢測,結果顯示試驗組AKP的表達量與對照組相比較差異無統計學意義,說明nHA-PEA復合材料對成骨細胞的功能酶表達無不良影響,也沒有明顯的促進作用,不抑制其分化功能。
用浸提液作為試驗樣品測定復合材料中濾出物質對細胞生長、增殖的影響,僅為預測材料植入體內的潛在危害提供了初步依據,其結果尚有一定的局限性;因此,需在浸漬試驗良性結果的基礎上再采用直接法將成骨細胞與材料聯合培養,以進一步考察材料本體的結構性能對細胞生物學的影響。本研究表明,成骨細胞在復合材料上具有良好的黏附、鋪展和增殖行為,即nHA-PEA復合材料具有成骨細胞相容性和良好的細胞相容性等特性。
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(一)深化普法依法治理。今年是“六五”普法收官之年,我們進一步加強陣地和載體建設,上半年迎接了督查組對我區“市級民主法治示范村”和__市首批“法治文化建設示范基地”、“法制宣傳教育示范基地”的復核驗收,申報的南張街道艾平村被司法部、民政部表彰為“全國民主法治示范村”,成為__區首個“全國民主法治示范村”。發揮傳統媒體和新媒體在普法中的作用,成功舉辦第二屆城區法制宣傳員選拔賽,切實提升全區青少年法律素質;配合辦好《法治__》電視欄目,聯系律師事務所,協調電視臺,尋找案源和合適的拍攝地點,堅持每周一期;今年上半年“法治__”普法微信公眾平臺已上線試運行,用戶只需要用微信搜索“法治__”即可關注,真正實現指尖學法,截至目前已發信息48期,上海、廣州、武漢等很多大中城市對這個平臺進行了關注并互動,充分發揮自媒體受眾范圍廣、不受地域限制等優勢。繼續深化“法律六進”,在機關舉行《法治政府建設新起點》專題報告,邀請北京大學法學院王錫鋅主講,全面深刻的闡述了依法行政;為進一步增強全區師生的法治觀念和法律意識,在原有98名法制副校長的基礎上,又聘任14名同志為__市第十二中學等學校的法制副校長;在社區和鄉村,到喻屯鎮萬福家園積極參與“文化、科技、衛生、惠民”宣傳,捐贈價值4000余元的法律書籍一批,并現場開展開展免費法律咨詢活動。今年上半年共申報創建“民主法制示范村”20個、制作普法宣傳專題片1部、制作《法治__》欄目21期、會同司法所、律師事務所等為中小學生做法制報告5場次,經層層推薦、嚴格考核,我區被評為第三批“全國法治縣(市、區)創建活動先進單位”,也是__市唯一獲此殊榮的縣(市、區)。
(二)抓好基層基礎工作。持續推進規范化司法所創建活動,今年上半年對全區司法所進行了2輪不同層次的摸底調研,充實17名人員到各司法所,目前全區司法所基本達到每所3人,解決了人員不足和分配不均的問題。上半年還投資10余萬元,對唐口、金城、喻屯、長溝司法所進行了改建,與安居街道辦事處合建新的司法所業務用房,目前正在準備相關手續。人民調解工作常抓不懈,上半年全區各級調解組織共調處案件758件,成功調處744件,調處成功率98%以上。進一步拓寬調解領域,繼消費者糾紛調解委員會、道路交通事故調解委員會之后,又在__市__保安服務有限公司成立了“__市__保安人民調解委員會”,目前全區行業性專業性調委會已經達到8個,覆蓋面進一步擴大。創新調解模式,仙營司法所和轄區內的派出所聯合成立“公調中心”,依托派出所的“110接警平臺”,目前已處理各類矛盾糾紛27件,更加及時有效的化解矛盾。全力推進基層法律服務,在二十里鋪街道試點推行“法治村主任”派駐,通過召開座談會、開通“法律服務村居行”QQ群和微信群等方式,實現村居和
法治村主任無縫隙對接,現已初見成效,自“法治村主任”派駐以來,為村里修改了重要合同16份,修改了村規民約42份,化解重大矛盾糾紛4起,贈送普法類書籍2000余本,區級以上案件同期減少20%。 (三)管控特殊重點人群。開展社區矯正開展“監管教育雙輪驅動”活動,上半年共接收社區矯正對象209人,解除209人,目前共有社區矯正對象679人,其中,緩刑575人、管制54人 、假釋46人、暫予監外執行4人。上半年共接收安置幫教對象87人,目前共有安置幫教對象1437人。沒發生重新違法犯罪現象。共開展集中入矯宣告活動10次,并對29名社區矯正對象給予警告處分。每周五定期對新入矯社區矯正人員舉行集中入矯宣告儀式,要求他們及監管人按時參加,使之充分認識社區矯正紀律的嚴肅性以及違規后果的嚴重性。除了做好這些日常監督管理工作外,還定期舉辦專題培訓,針對社矯正人員犯罪后的心理情況等實際問題,特邀山東省心理學會會員、國家二級心理咨詢師等專家授課,提高工作人員業務能力。進一步規范社區矯正監管工作,為各司法所配備了人臉識別報到機,社區矯正監控平臺已全部安裝完畢,現正在調試運行。
(四)提供優質法律服務。加強對律師事務所和律師的日常監管,對23家律師事務所報送的年審材料逐項進行審核把關形成初審意見,加強指導的實效性。組織全區各所開展“三牽手三促進”律師法律服務活動,通過構筑“三大平臺”,提供“三式”服務,開展“三個一”法律服務活動,確保每家律師事務所至少牽手一個重點工程,每名律師至少牽手一個中小企業和一個村居(社區)。在法律援助工作中加大宣傳力度,先后到喻屯鎮萬福家園社區、惠普人力資源市場、市文化廣場開展不同受眾、不同主題的宣傳活動。同時利用各類媒體強化宣傳力度,今年法律援助中心聯合__市廣播電視臺在__新聞廣播《依然熱線》和__交通廣播《我的汽車有話說》欄目中,開設了律師“在線釋法”平臺,全方位提高法律援助知曉率。上半年共辦理法律援助案件360件,結案215件;共解答法律咨詢625人次,其中電話咨詢65件。
(五)建設過硬司法行政隊伍。根據區委、區政府部署開展“解放思想—科學發展融合發展大討論”活動要求,通過召開動員大會,開展集中學習討論,座談交流,征文比賽,演講比賽等方式,迅速在全局掀起思想大解放的熱潮,為全區司法行政科學發展融合發展注入強勁動力。制定黨員集中培訓方案,翻印下發了學習資料,安排每周四下午進行集中學習,邀請市委黨校呂明偉教授為全體黨員干部作了題為《加強作風建設 提升執行力》的專題報告。加強隊伍作風建設,開展“作風建設集中整治月”活動和“三嚴三實”專題教育,及時下發實施方案,學習規定內容,深刻查擺問題,引導全系統黨員干部不斷提升自身素質,激發黨員干部的向心力和凝聚力,打造為民務實清廉的司法行政隊伍。
上半年我區司法行政工作取得了一定成績,但是當前全區司法行政工作面臨的基層基礎工作薄弱,司法所任務重、人員力量薄弱的狀況仍然突出;人民調解、法律援助、法律服務、社區矯正等管理與服務不規范的問題仍不容樂觀;工作中創新思路不多,爭先創優氛圍不濃,提煉總結不夠,特色亮點工作不突出;個別同志擔當意識不強,務實作風不強,進取精神不強,這些困難和問題需要我們在今后的工作中認真加以解決。
(一)著力推進法治宣傳和“六五”普法檢查驗收工作。一是要拓展普法新陣地,形成濃厚法治文化氛圍。下半年擬在__濕地公園建成一處法治文化廣場,集休閑健身和法制宣傳于一體,有效發揮廣場陣地的教育引導功能,增強法治文化的滲透力和感染力,更好地滿足人民群眾的法治文化需求。二是努力推動“誰執法誰普法”的責任制落實,扎實構建全區“大普法”格局;協調區內有關部門、單位承擔公益普法的社會責任,繼續利用廣播、電視、報紙、手機的傳媒優勢,制作播放普法公益宣傳內容,擴大法治宣傳社會覆蓋面。三是做好“六五”普法檢查驗收相關工作。6月24日召開了全區普法依法治理工作領導小組全體會議,下一步我們將按照區里檢查驗收方案和省市文件要求,全面進行安排部署,確保交一份合格答卷。
(二)大力構建人民調解工作體系,維護全區和諧穩定。一是要強化人民調解基層基礎,依托村(社區)調委會,成立一批品牌調解工作室。二是進一步拓寬調解領域,抓好專業性、行業性人民調解組織建設,在現有8個專業調委會的基礎上,推動人民調解組織向物業管理、消費、環保等新領域拓展。三是提升人民調解能力水平,專題舉辦全區人民調解員培訓班。深入開展矛盾糾紛排查調處專項活動,認真做好抗戰勝利70周年紀念、國慶節、黨代會期間的矛盾排查調處工作。推進人民調解員等級管理制度,提高全區人民調解員業務素質和工作能力。
(三)努力構建規范的社區矯正管理體系,預防和減少重新違法犯罪。一是提升社區矯正工作規范化水平,繼續開展好“監管教育雙輪驅動”活動,進一步提升教育矯正的質量和效果,實現執法環節規范化。二是狠抓重點時段安全管控。確保在抗戰勝利70周年紀念、國慶節、黨代會期間全區穩定,確保無特殊人員脫管、漏管、失控現象發生。三是進一步整合各界資源,強化合力,形成協助矯正力量,同時對監獄服刑人員未成年子女進行排查統計,對其中的失學兒童協調有關部門進行幫扶。