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圓的面積課件

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圓的面積課件

圓的面積課件范文第1篇

為了解決這些問題,我們需要正確地處理理論和實(shí)踐的辯證統(tǒng)一關(guān)系。下面從課堂改革、考核改革、答辯改革和課外改革四個(gè)方面提出實(shí)踐教學(xué)改革的方案。

一、 實(shí)踐教學(xué)改革方法

1.n堂改革

傳統(tǒng)的課堂教學(xué)突出了教師的主體地位,學(xué)生缺少實(shí)際操作的機(jī)會(huì)。為此我們提出對(duì)課堂教學(xué)進(jìn)行改革,即將課堂教學(xué)轉(zhuǎn)移到機(jī)房中去,可以采取屏幕廣播的形式來學(xué)習(xí)課件、微課視頻,并在完成一個(gè)知識(shí)點(diǎn)的學(xué)習(xí)后,馬上讓學(xué)生進(jìn)行練習(xí)。這就很好地結(jié)合了理論與實(shí)踐。

2.考核改革

傳統(tǒng)的考核以平時(shí)作業(yè)、考勤和期末試卷為評(píng)價(jià)指標(biāo),缺乏對(duì)實(shí)踐操作的考核。因此需要對(duì)教學(xué)導(dǎo)向的考核方式進(jìn)行改革。地方美院可以通過上機(jī)考試的形式進(jìn)行測(cè)試,但上機(jī)考試時(shí)間有限,學(xué)生能做的操作一般比較簡單,不便于開發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新能力,也不便于緊密結(jié)合學(xué)生所學(xué)的具體專業(yè),因此還需要對(duì)答辯這一環(huán)節(jié)進(jìn)行改革。

3.答辯改革

為了提高學(xué)生學(xué)習(xí)的趣味性,教師可布置一項(xiàng)綜合作業(yè)或者作品。完成作品后,引入答辯環(huán)節(jié),通過學(xué)生講解、老師提問等方式進(jìn)行評(píng)價(jià)。這樣一方面培養(yǎng)了學(xué)生的專業(yè)意識(shí),也培養(yǎng)了學(xué)生的表達(dá)能力,同時(shí)測(cè)試了學(xué)生靈活運(yùn)用知識(shí)的能力。由于采取了答辯的方式,學(xué)生不僅僅需要制作作品,同時(shí)也必須熟練掌握其中的制作過程。這就避免了部分學(xué)生復(fù)制別人作品的可能。

4.課外改革

為了加強(qiáng)課外的實(shí)踐練習(xí),在保證充足的實(shí)踐學(xué)時(shí)的同時(shí),可以通過世界大學(xué)城的方式課外作業(yè),利用學(xué)生的課余零散時(shí)間進(jìn)行訓(xùn)練。為了加強(qiáng)這部分的管理,課外練習(xí)的情況也應(yīng)作為考核的一部分。

二、實(shí)施與效果

通過對(duì)我們所教的班級(jí)實(shí)行上述的課堂改革、考核改革、答辯改革和課外改革等四項(xiàng)改革,有效地改進(jìn)了地方美院計(jì)算機(jī)應(yīng)用實(shí)踐教學(xué)中存在的一些問題。通過對(duì)學(xué)生成績、學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性、對(duì)專業(yè)課程的支撐等方面進(jìn)行調(diào)查,學(xué)生普遍反映良好,實(shí)踐教學(xué)的效果和質(zhì)量都得到了提升。

地方美院計(jì)算機(jī)應(yīng)用的實(shí)踐教學(xué)對(duì)培養(yǎng)應(yīng)用型人才、提高學(xué)生實(shí)踐能力有著舉足輕重的作用。我們提出的針對(duì)計(jì)算機(jī)應(yīng)用實(shí)踐教學(xué)的課堂改革、考核改革、答辯改革和課外改革等措施,適合地方美院的具體情況,有助于解決目前存在的一些問題,對(duì)提高學(xué)生的學(xué)習(xí)效果和實(shí)踐能力有很大的幫助。

參考文獻(xiàn):

圓的面積課件范文第2篇

一、教學(xué)現(xiàn)狀與問題不容忽視

(一)教學(xué)觀念與教學(xué)模式陳舊

在社會(huì)經(jīng)濟(jì)、信息與科學(xué)技術(shù)迅猛發(fā)展的浪潮中,使中國當(dāng)代廣告業(yè)進(jìn)入了前所未有的發(fā)展時(shí)期,如今的廣告已經(jīng)不再只是以往傳統(tǒng)的媒介傳播載體與形式,成為融匯其他知識(shí)、數(shù)字媒介以及信息科學(xué)等領(lǐng)域進(jìn)行交叉整合的大眾傳播。在這一巨大變革的趨勢(shì)下,教育意識(shí)和觀念是否也隨之改變了呢?平面廣告設(shè)計(jì)是廣告學(xué)和視覺傳達(dá)設(shè)計(jì)專業(yè)的主干課程,是融匯多學(xué)科知識(shí)和能力等多元化交叉的一門課程。所以,教師首先應(yīng)具有先進(jìn)教學(xué)理念和超前的意識(shí),要與時(shí)俱進(jìn)。傳統(tǒng)的、陳舊的教學(xué)觀念和教學(xué)模式已經(jīng)不能適應(yīng)當(dāng)前的社會(huì)形勢(shì)和廣告行業(yè)的發(fā)展。目前有很多所學(xué)校還在延用多年不變的課程大綱,教學(xué)觀念落伍,教學(xué)模式單一,教學(xué)內(nèi)容陳舊。沒有結(jié)合當(dāng)前社會(huì)發(fā)展對(duì)藝術(shù)設(shè)計(jì)人才的需求更新課程大綱和教案,封閉式教學(xué)。教師的教學(xué)理念落后,更談不上意識(shí)的超前,不了解廣告行業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀,脫離現(xiàn)實(shí),缺少探索和實(shí)踐,沒有真正給予學(xué)生正確的創(chuàng)新思維和能力的培養(yǎng),學(xué)生綜合能力差,就業(yè)后難以適應(yīng)相關(guān)工作。因此,更新教育理念和改進(jìn)教學(xué)模式成為當(dāng)今教育工作者不容忽視、刻不容緩的義務(wù)和責(zé)任。

(二)教學(xué)模式單一

目前平面廣告設(shè)計(jì)的課堂教學(xué)模式陳舊單一,一言堂講授形式仍在沿襲,紙上談兵,缺乏實(shí)戰(zhàn)。課堂上只講授書本知識(shí),課堂缺少互動(dòng),下課前布置學(xué)生作業(yè),導(dǎo)致學(xué)生不會(huì)思考,更不善于提出問題,溝通和實(shí)踐能力弱。在教學(xué)內(nèi)容上,沒有設(shè)計(jì)思維方法訓(xùn)練的環(huán)節(jié),更沒有結(jié)合市場和企業(yè)實(shí)際設(shè)計(jì)項(xiàng)目訓(xùn)練學(xué)生,不做市場調(diào)研,導(dǎo)致學(xué)生閉門造車,形成了學(xué)生不懂市場規(guī)律,不了解產(chǎn)品和消費(fèi)心理,產(chǎn)品定位和訴求不明確,沒有廣告策劃和創(chuàng)意方案,只會(huì)盲目地上網(wǎng)尋找圖形素材,再用電腦軟件拼貼規(guī)定的廣告版面上。前幾年還有不少學(xué)生用繪圖軟件繪制圖形和設(shè)計(jì),現(xiàn)在學(xué)生直接上網(wǎng)下載現(xiàn)成的圖形素材拼湊,作業(yè)就這樣交差了。誰也看不明白這些廣告作業(yè)在宣傳什么主題,訴求什么商品,看起來像是一幅裝飾畫,因?yàn)檫@些圖庫內(nèi)的素材圖形不規(guī)范、更缺少藝術(shù)性和審美性,沒有真正清晰地傳達(dá)出廣告的主題和有價(jià)值的信息。

二、明確目標(biāo)定位勢(shì)在必行

為什么我們的學(xué)生畢業(yè)難以適應(yīng)社會(huì),我們有沒有反思教育出現(xiàn)了哪些問題,一定是培養(yǎng)目標(biāo)方向出現(xiàn)了偏頗。那么社會(huì)需要的是什么樣的設(shè)計(jì)人才呢?他們需求的是具有創(chuàng)新思維、良好的心理素質(zhì)、文化與專業(yè)素養(yǎng)、實(shí)際動(dòng)手能力、語言表達(dá)能力、獨(dú)立決策能力、與人合作和社交溝通能力、吃苦耐勞精神的復(fù)合型人才。我們是否根據(jù)社會(huì)對(duì)人才的需求制定教學(xué)目標(biāo)和培養(yǎng)規(guī)格呢?本人結(jié)合社會(huì)需求和在教學(xué)大綱的基礎(chǔ)之上,從多年的教學(xué)實(shí)踐與積累中,歸納出平面廣告設(shè)計(jì)課程教學(xué)目標(biāo)和培養(yǎng)規(guī)格。1.教學(xué)目標(biāo):使學(xué)生能通過廣告的基本理論和創(chuàng)意思維方法的訓(xùn)練和學(xué)習(xí),在市場背景下,經(jīng)過調(diào)研、分析,策劃,創(chuàng)造性的獨(dú)立完成廣告創(chuàng)意與設(shè)計(jì)。2.培養(yǎng)規(guī)格:注重專業(yè)能力、審美能力、溝通能力、策劃能力、創(chuàng)新能力以及實(shí)踐能力的培養(yǎng)。3.培養(yǎng)模式:注重互動(dòng)式課堂教學(xué)與實(shí)習(xí)、實(shí)訓(xùn)和創(chuàng)新等多元化教學(xué)模式相結(jié)合。一是理論講授與課堂實(shí)踐密切融合,二是除了研究性課題外,結(jié)合社會(huì)、企業(yè)的項(xiàng)目課題進(jìn)行實(shí)踐訓(xùn)練,為學(xué)生積累就業(yè)經(jīng)驗(yàn)。只有明確教學(xué)目標(biāo)和定位,才會(huì)在課程大綱中具體體現(xiàn)其平面廣告設(shè)計(jì)教學(xué)的核心和知識(shí)體系架構(gòu)。

三、多元化教學(xué)模式下課程設(shè)計(jì)的探索與實(shí)踐

(一)多元實(shí)踐項(xiàng)目引入課堂

將企業(yè)項(xiàng)目引入課堂,學(xué)生通過以實(shí)際的企業(yè)的品牌為課題選項(xiàng),走出教室對(duì)其進(jìn)行市場調(diào)查、分析研究、廣告策劃與定位、創(chuàng)意方案設(shè)計(jì)等模擬訓(xùn)練環(huán)節(jié)。這些真實(shí)的項(xiàng)目來源可以從多個(gè)渠道獲取調(diào)研信息,比如讓學(xué)生可以從網(wǎng)上搜尋企業(yè)品牌的背景資料,也可以在商場或?qū)嶓w店獲取一手相關(guān)的商品信息資料,還可以通過參與某些經(jīng)老師認(rèn)可的廣告設(shè)計(jì)大賽,要求是這些大賽一定要具備真實(shí)完整的市場背景資料。項(xiàng)目式課題訓(xùn)練是一項(xiàng)實(shí)戰(zhàn)性課程改革,是較為全面地培養(yǎng)學(xué)生綜合能力的多元化教學(xué)實(shí)踐,鍛煉學(xué)生的社會(huì)實(shí)踐能力,訓(xùn)練學(xué)生的表達(dá)能力,讓學(xué)生走上講臺(tái)模擬與廣告主對(duì)話,闡釋自己的策劃和創(chuàng)意方案。不僅讓學(xué)生在課題實(shí)戰(zhàn)中了解商業(yè)廣告產(chǎn)生的整個(gè)流程,更重要的是培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新思維能力、自主能力、團(tuán)隊(duì)合作能力以及溝通能力。

(二)多元思維方法訓(xùn)練

大學(xué)教育宗旨應(yīng)該對(duì)學(xué)生授之以漁,而不是授之以魚。有很多大學(xué)生就業(yè)后不到兩年的時(shí)間就感到知識(shí)已經(jīng)透支了,很明顯,這些學(xué)生在學(xué)校的學(xué)習(xí)期間所接受的教育只是傳授了一些基礎(chǔ)專業(yè)知識(shí),而沒有傳授給學(xué)生掌握知識(shí)的能力,知識(shí)是須要不斷更新的,特別是學(xué)習(xí)廣告設(shè)計(jì),需要掌握正確的思維方法才能創(chuàng)作出優(yōu)秀廣告設(shè)計(jì)作品,而且,單一的思維模式難以應(yīng)對(duì)復(fù)雜的設(shè)計(jì)現(xiàn)象,綜合的思維才能滿足設(shè)計(jì)對(duì)思維的要求。清華大學(xué)博士生導(dǎo)師高中羽教授在《啟動(dòng)自己》中提出:思維的重要功能是對(duì)頭腦中保持的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行改造,按新樣式組合起來,當(dāng)然這不是簡單的機(jī)械性組合,參與到新關(guān)系中的個(gè)別思考發(fā)生著變化,同別的思考結(jié)合為新的伙伴關(guān)系,形成新思考,思想的新復(fù)合常常具有創(chuàng)造性意義。設(shè)計(jì)思維需要新觀念、新組合,各種設(shè)計(jì)思維互為影響、互為交叉,呈現(xiàn)出動(dòng)態(tài)的、多元的設(shè)計(jì)風(fēng)格和樣式。所以,要教會(huì)學(xué)生如何掌握自主學(xué)習(xí)的能力和多元思維方法,才是真正做到了授之以漁。由此可見,思維方法訓(xùn)練是課堂教學(xué)的一項(xiàng)重要學(xué)習(xí)環(huán)節(jié)。以平面廣告設(shè)計(jì)課堂教學(xué)為例,將發(fā)散性思維方法結(jié)合廣告創(chuàng)意主題進(jìn)行訓(xùn)練:以廣告創(chuàng)意主題(訴求點(diǎn))為發(fā)散中心點(diǎn)進(jìn)行放射性發(fā)散多個(gè)語義點(diǎn),這些語義點(diǎn)可以文字表述也可以圖形表達(dá),一名學(xué)生可以在一節(jié)課內(nèi)發(fā)散出幾百個(gè)語義點(diǎn),也可以圖文并茂,繪制出一幅或多幅發(fā)散聯(lián)想圖,這個(gè)發(fā)散圖就像是一顆茂盛的大果樹,每一顆果實(shí)就是一個(gè)語義點(diǎn),然后將這些語義點(diǎn)與廣告主題相關(guān)聯(lián),就像嫁接果實(shí)一樣,生長成一顆全新的果實(shí),這個(gè)新的果實(shí)就是一個(gè)全新創(chuàng)意點(diǎn),這就意味著一幅發(fā)散圖可以產(chǎn)生無數(shù)個(gè)廣告創(chuàng)意。這一訓(xùn)練方法有效地拓展了學(xué)生的思維,并可快速獲取多個(gè)具有原創(chuàng)性的好點(diǎn)子,輕松掌握了廣告的創(chuàng)意思維方法。

(三)構(gòu)建多元知識(shí)體系

平面廣告設(shè)計(jì)涉及多元學(xué)科知識(shí),比如與社會(huì)學(xué)、文學(xué)、市場學(xué)、藝術(shù)學(xué)、設(shè)計(jì)學(xué)、消費(fèi)心理學(xué)、信息傳播學(xué)以及媒體技術(shù)等都有著密切關(guān)聯(lián)。而該課程的課時(shí)量有限,不可能一一講述這么多的知識(shí)內(nèi)容,因此,在課程設(shè)計(jì)過程中,盡可能將這些學(xué)科知識(shí)融會(huì)貫通在講授內(nèi)容中。比如廣告中的文案撰寫就與文學(xué)、市場學(xué)和消費(fèi)心理學(xué)有直接的關(guān)聯(lián),廣告的策劃定位與上述八個(gè)學(xué)科都有關(guān)聯(lián),廣告設(shè)計(jì)與傳播更需要藝術(shù)、設(shè)計(jì)學(xué)、信息傳播學(xué)以及媒體技術(shù)等學(xué)科知識(shí)的支撐。所以,該課程教學(xué)的理念既注重學(xué)生的理論知識(shí)的學(xué)習(xí),更強(qiáng)調(diào)學(xué)生的動(dòng)手實(shí)踐能力的培養(yǎng)。

(四)多元化表現(xiàn)

圓的面積課件范文第3篇

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎病毒 免疫逃逸變異 HBsAg G145R變異 單克隆抗體

新近資料顯示, 不同試劑對(duì)G145R變異HBsAg(mtHBsAg G145R)的檢測(cè)能力僅為對(duì)野毒型HBsAg檢測(cè) 的50 %或更低[1], 這給HBV感染的免疫學(xué)診斷、 血源篩選和乙肝疫苗的研制提出了新的問題。為深入開展乙肝病毒免疫逃逸變異的臨床與流行病學(xué)研究, 我們?cè)诩韧ぷ鞯幕A(chǔ)上采用雜交瘤技術(shù)進(jìn)行抗乙肝病毒表面抗原G145R變異單克隆抗體(抗G145R HBs mAb)的研究。

1 材料和方法

1.1 材料 RPMI1640培養(yǎng)基購自Gibco公司; BALB/c小鼠由湖北省疾病預(yù)防控制中心動(dòng)物室提供; Al(OH)3凝膠和重組野生HBsAg(wtHBsAg, CHO細(xì)胞表達(dá), 純化疫苗前體)等由中國生物制品總公司武漢生物制品研究所提供; Sp2/0細(xì)胞由中國典型培養(yǎng)物保藏中心提供; PEG4000、 HAT與HT、 以及小鼠免疫球蛋白亞類檢測(cè)試劑等均購自Sigma公司; 山羊抗小鼠IgG及HRP標(biāo)記山羊抗小鼠IgG抗體購自美國Pierce公司; HRP標(biāo)記山羊抗HBs多克隆抗體, 純化mtHBsAg G145R、 mtHBsAg G145R-ELISA質(zhì)控參照品及其抗HBs G6 mAb(下稱G6 mAb)等由本室制備[2, 5]。衛(wèi)生部國家臨床檢驗(yàn)中心(NCCL)頒定之HBsAg ELISA質(zhì)控血清由湖北省臨床檢驗(yàn)中心提供??笹145R HBs GL2.001.2 mAb由德國ESSEN大學(xué)病毒研究所陸蒙吉教授惠贈(zèng)(下稱 GL2.001 mAb, 該抗體能與mtHBsAg G145R結(jié)合)[3]。2A8細(xì)胞系(分泌mtHBsAg G145R)由本院臨床免疫研究室提供[4]。

受檢血清200份(年齡20~56歲)自本院檢驗(yàn)科和感染病病原實(shí)驗(yàn)室采集, 類型為: (1)臨床報(bào)告HBsAg呈陰性, 但有一項(xiàng)或幾項(xiàng)除HBsAb以外的HBV標(biāo)志物呈陽性; (2)HBsAg、 HBsAb雙陽性。正常對(duì)照血清40份, 均有成功的乙肝疫苗接種史, 抗HBs陽性, 其他HBV標(biāo)志陰性, 且生化指標(biāo)及其他肝炎病毒標(biāo)志均正常。

1.2 方法

1.2.1 雜交瘤細(xì)胞株的建立 (1)小鼠免疫:初次免疫用純化的 mtHBsAg G145R(5 μg/只)與Al(OH)3混合置4℃過夜, 經(jīng)背部皮下多點(diǎn)注射進(jìn)行免疫。2周后, 用相同劑量的抗原及相同的方法進(jìn)行2次免疫。于細(xì)胞融合前3 d, 再用同等劑量的抗原(未佐劑化)腹腔注射進(jìn)行加強(qiáng)免疫。(2)細(xì)胞融合: 按本室以往報(bào)道方法進(jìn)行[6]。(3)雜交瘤細(xì)胞的篩選: 采用ELISA A及ELISA B分兩步進(jìn)行, 用于篩選A法強(qiáng)陽性而B法陰性的雜交瘤細(xì)胞克隆。ELISA A: 先用山羊抗小鼠IgG包被(包被濃度2.5 mg/L), 4℃過夜。次晨洗板5次, 每次1 min, 再以10 g/L的BSA封閉, 37℃放置2 h后, 加入待篩選的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清, 37℃反應(yīng)45 min, 洗板后依次與2A8細(xì)胞培養(yǎng)上清及HRP標(biāo)記的山羊抗HBs多克隆抗體反應(yīng), 反應(yīng)條件同上, 洗板后加TMBH2O2顯色15 min, 以2 mol/L H2SO4終止反應(yīng)并測(cè)定A450值。ELISA B: 以wtHBsAg包被(10 mg/L), 4℃過夜。洗板、 封閉同前。然后依次加入第一步篩選陽性的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清、 HRP標(biāo)記的羊抗鼠IgG, 同前反應(yīng)(37℃反應(yīng)45 min), 洗板后顯色并測(cè)定A450值, 以S/N≤2.1判為陽性。(4)克隆化: 共3次, 采用有限稀釋法。

1.2.2 腹水制備與檢測(cè) 腹水制備采用降植烷腹腔誘導(dǎo)法。腹水蛋白含量檢測(cè)采用紫外比色法, 以BSA為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算其總蛋白含量。

1.2.3 雜交瘤細(xì)胞染色體鑒定 采用秋水仙素分裂阻斷法進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞染色體鑒定。

1.2.4 抗體效價(jià)測(cè)定 采用ELISA A篩選法進(jìn)行。以P/N最接近2.1的反應(yīng)孔所加待測(cè)標(biāo)本稀釋度的倒數(shù)作為所測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清(或腹水)的效價(jià)。

1.2.5 小鼠mAb Ig亞類鑒定 采用膠體金免疫層析試紙條法, 按產(chǎn)品說明書操作。

1.2.6 抗體的純化 腹水mAb經(jīng)飽和硫酸銨分級(jí)沉淀[7]后, 再以Protein A親和層析法進(jìn)行純化, 操作按試劑的說明書進(jìn)行。

1.2.7 4E12ELISA方法的建立 采用純化的4E12 mAb包被, HRP標(biāo)記的山羊抗HBs多抗示蹤建立雙抗體夾心ELISA方法。并采用棋盤滴定實(shí)驗(yàn)對(duì)包被抗體和示蹤抗體進(jìn)行檢定。

1.2.8 敏感性判定 將該方法用于檢測(cè)各個(gè)濃度的G145R變異重組HBsAg ELISA質(zhì)控參照品, 判定其檢測(cè)下限。并同時(shí)用GL2.001 mAb 進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)。

1.2.9 特異性判定 (1)抗原取代實(shí)驗(yàn): 以4E12 mAb和GL2.001 mAb平行包被酶標(biāo)板, 分別加入2A8細(xì)胞培養(yǎng)上清, 濃度為5 mg/L、 1 mg/L、 100 μg/L、 10 μg/L、 1 μg/L的wtHBsAg, NCCL頒定HBsAg ELISA質(zhì)控血清(10 μg/L), 狂犬疫苗, 腺病毒, 最后以HRP標(biāo)記的山羊抗HBs示蹤, 加TMD底物顯色后觀察結(jié)果。(2)抗體中和實(shí)驗(yàn): 以GL2.001 mAb包被酶標(biāo)板, 將4E12 mAb腹水系列稀釋成1×101~1×106, 與等體積2A8上清混合, 37℃溫育45 min, 將混合物分別加至包被板各相應(yīng)孔中, 每孔100 μL, 同上溫育45 min后, 依次加入HRP標(biāo)記的山羊抗HBs及TMD等做GL2.001ELISA, 并根據(jù)未中和孔計(jì)算各孔中和率。計(jì)算公式為: 阻斷率=(阻斷孔光密度值-陰性對(duì)照孔光密度值)/(非阻斷孔光密度值-陰性對(duì)照孔光密度值)×100%。

1.2.10 GL2.001ELISA 其方法與4E12EL ISA同, 包被改用GL2.001 mAb, 具體操作見文獻(xiàn)報(bào)道[2]。

1.2.11 G6 ELISA 用于上述兩法陽性標(biāo)本的復(fù)核, 其操作見文獻(xiàn)報(bào)道[6]。

2 結(jié)果

2.1 雜交瘤細(xì)胞的建立 常規(guī)融合、 篩選及克隆化后, 獲得1株可分泌高效價(jià)mAb的雜交瘤細(xì)胞, 命名為4E12 mAb。將此株雜交瘤細(xì)胞體外連續(xù)傳代20代并培養(yǎng)3個(gè)月以上, 反復(fù)凍存復(fù)蘇4次后, 其培養(yǎng)上清抗G145R HBs ELISA效價(jià)保持在(0.5~1)×103范圍。

2.2 腹水制備及檢測(cè) 采用降植烷腹腔誘導(dǎo)法誘生4E12 mAb腹水, 實(shí)驗(yàn)采用兩只經(jīng)產(chǎn)BALB/c小鼠, 平均腹水產(chǎn)量5.1 mL, 蛋白含量為12.3 g/L, 抗G145R HBs ELISA效價(jià)為1×106~1×107。

2.3 染色體檢測(cè) 采用秋水仙素阻斷法對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行染色體分析, 該雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)量在88~92條之間, 平均染色體90條。

2.4 Ig亞類分析 膠體金免疫免疫層析試驗(yàn)顯示, 4E12 mAb為IgG1a亞類,

其輕鏈為κ型。

2.5 4E12ELISA方法的判定期 以S/N值≥2.1判為陽性。mtHBsAg G145R ELISA質(zhì)控參照品濃度在2 μg/L以上時(shí), 結(jié)果為陽性, 而GL2.001ELISA的最低陽性檢測(cè)濃度為1.0 μg/L。采用4E12ELISA與GL2.001 ELISA作復(fù)孔(3孔)檢測(cè), 以S/N值≥2.1判作陽性標(biāo)準(zhǔn)(圖1)。當(dāng)抗原為2A8細(xì)胞培養(yǎng)上清時(shí), 二者平均A450值為2.1及2.0; 當(dāng)抗原為5 mg/L及1 mg/L wtHBsAg時(shí), 后者平均A450值分別為0.21與0.19, 而前者檢測(cè)A450低于0.07。在系列稀釋的4E12 mAb腹水1×10-1~1×10-6)中加入等體積2A8上清, 37℃育溫30 min后以GL2.001ELISA進(jìn)行檢測(cè), 根據(jù)非中和孔計(jì)算其中和率, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2。不同稀釋腹水對(duì)2A8上清的中和率依次為77%、 71%、 70%、 39%、 29%、 18%, 當(dāng)4E12 mAb腹水稀釋至10-3時(shí)中和實(shí)驗(yàn)仍呈顯著的陽性結(jié)果。

圖1 抗原取代實(shí)驗(yàn)(略)

1: 2A8細(xì)胞培養(yǎng)上清; 2: wtHBsAg(5 mg/L); 3: wtHBsAg (1 mg/L); 4: wtHBsAg(100 μg/L); 5: wtHBsAg(10 μg/L); 6: wtHBsAg(1 μg/L); 7: NCCL血清(10 μg/L); 8: 狂犬疫苗前體; 9: 腺病毒.

圖2 抗體阻斷實(shí)驗(yàn)(略)

采用4E12 ELISA對(duì)一組臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè), 并與GL2.001ELISA進(jìn)行比較。正常對(duì)照血清均為陰性。實(shí)驗(yàn)標(biāo)本(200份)兩法檢測(cè)陽性分別為17例與23例, 兩法同時(shí)檢測(cè)陽性15例, 單獨(dú)陽性者前法2例而后法8例。陽性率為8.5%與11.5%, 前法較后法陽性率略低, 但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

采用本室既往建立的G6ELISA對(duì)25份陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)核, 兩法任一方法陽性標(biāo)本在G6ELISA中均呈陽性結(jié)果。

3 討論

隨著乙肝疫苗接種的普遍推廣, 可逃逸HBV 中和抗體的表面抗原變異株感染日益受到重視[9]。對(duì)乙肝疫苗免疫后攜帶者和未免疫攜帶者表面抗原基因變異的流行狀況調(diào)查表明, S抗原第145位氨基酸是HBsAg“a”抗原決定簇最常見的氨基酸變異位點(diǎn)之一[10]。該位點(diǎn)由甘氨酸變成精氨酸后, 氨基酸的置換影響了抗原的空間構(gòu)型, 導(dǎo)致其抗原性明顯降低, 因此不能被HBV 的中和抗體所識(shí)別, 并由此導(dǎo)致采用野毒株HBsAg制備的mAb或多抗不能很好的檢測(cè)G145R 變異株感染。這對(duì)HBV 感染的免疫學(xué)診斷、 獻(xiàn)血員篩選和乙肝疫苗的研究提出了新的挑戰(zhàn)。

ELISA法一直以來被廣泛運(yùn)用于乙肝感染的檢測(cè), 然而由于S基因的變異, 造成HBsAg的抗原性發(fā)生改變, 導(dǎo)致原有的主要針對(duì)wtHBsAg的試劑盒不能檢出。這是臨床漏檢的主要原因。迄今為止, 盡管尚無進(jìn)行免疫逃逸變異抗原檢測(cè)的直接報(bào)道, 但由于不同市售試劑多數(shù)具有一定逃逸變異檢測(cè)的能力, 因此, 在野生HBsAg檢測(cè)的同時(shí), 也不同程度地進(jìn)行了變異HBsAg的檢測(cè)。但是, 由于既往試劑并非為檢測(cè)免疫逃逸HBsAg而開發(fā), 不同試劑對(duì)變異HBsAg檢測(cè)的能力存在較大的差別。盡管自21世紀(jì)初期起國外已經(jīng)出現(xiàn)商品化的泛變異檢測(cè)試劑, 但因價(jià)格昂貴, 其應(yīng)用目前在臨床尚未普及。

我們應(yīng)用自行純化的重組mtHBsAg G145R常規(guī)免疫BALB/c小鼠, 經(jīng)融合, 篩選, 克隆化及其一系列適應(yīng)性培養(yǎng), 獲得1株能持續(xù)穩(wěn)定分泌抗mtHBsAg G145R mAb的雜交瘤細(xì)胞。對(duì)比研究顯示該細(xì)胞株所分泌抗體(4E12 mAb)對(duì)mtHBsAg G145R的反應(yīng)性與國外同類抗體(GL2.001 mAb)相當(dāng), 其與wtHBsAg的交叉反應(yīng)前者(基本無反應(yīng))明顯低于后者。中和實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 4E12 mAb腹水在經(jīng)1×10-3稀釋后仍能明顯阻斷GL2.001 mAb與mtHBsAg G145R反應(yīng)。將4E12 ELISA與GL2.001ELISA一道用于臨床檢測(cè), 前法檢出率較后者稍低, 單一檢測(cè)陽性數(shù)前后兩法分別為2例與8例, 提示此二抗體所針對(duì)的反應(yīng)位點(diǎn)系S蛋白分子上兩個(gè)相互關(guān)聯(lián)但又各不相同的抗原表位。此2法檢測(cè)陽性標(biāo)本在 G6ELISA檢測(cè)時(shí)亦均為陽性, 在證實(shí)兩法對(duì)HBsAg反應(yīng)的特異性的同時(shí), 還進(jìn)一步印證G6ELISA對(duì)G145R變異相關(guān)HBsAg強(qiáng)大的檢測(cè)能力[6]。這一研究的成功為單一mtHBsAg(G145R HBsAg) 特異性檢測(cè)試劑的開發(fā), 獻(xiàn)血員篩選及其新型乙肝疫苗的研究提供了一定的物質(zhì)基礎(chǔ), 同時(shí)為其他變異HBsAg mAb的研究提供了方法上的參考。

參考文獻(xiàn)

[1] 徐麗宏, 梁國棟, 付士紅, 等. G145R突變后乙型肝炎病毒表面抗原在酵母系統(tǒng)的表達(dá)及其免疫學(xué)特性分析[J]. 病毒學(xué), 2005, 21(4): 253-258.

[2] 張 波, 李方和, 龔勁松, 等. 重組G145R HBsAg親和純化方法的建立及其應(yīng)用[J]. 中國生物制品學(xué)雜志, 2007, 20(10): 767-770.

[3] Zheng X, Weinberger KM, Gehrke R, et al. Mutant hepatitis B virus surface antigens (HBsAg) are immunogenic but may have a changed specificity[J]. Virology, 2004, 329(2): 454-464.

[4] 田擁軍, 覃 麗, 張正茂, 等. 穩(wěn)定表達(dá)乙型肝炎病毒G145R表面抗原細(xì)胞系的建立[J]. 中國病毒學(xué), 2005, 20(6): 574-577.

[5] 張 波, 李方和, 龔勁松, 等. G145R變異重組HBsAg ELISA檢測(cè)質(zhì)控參照品制備的初步研究[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 23(12): 1775-1778.

[6] 李方和, 張小燕, 嚴(yán) 兵, 等. 抗HBs mAb的研制及其對(duì)野生與免疫逃逸變異HBsAg的交叉反應(yīng)特征[J]. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2008, 24(6): 546-549.

[7] 朱立平, 陳學(xué)清. 免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法[M]. 北京: 人民軍醫(yī)出版社, 2003: 55-56.

[8] Ogura Y, Kurosaki M, Asahina Y, et al. Prevalence and significance of naturally occurring mutations in the surface and polymerase genes of hepatitis B virus[J]. J Infect Dis, 1999, 180(5): 1444-1451.

圓的面積課件范文第4篇

圓的面積是在學(xué)生了解和掌握了圓的特征、學(xué)會(huì)計(jì)算圓周長的計(jì)算以及學(xué)習(xí)過線段圍成的平面圖形面積計(jì)算公式的基礎(chǔ)上進(jìn)行教學(xué)的。而圓這樣的曲線圖形的面積計(jì)算,學(xué)生還是第一次接觸到,如果學(xué)生完全自主地探索如何把圓轉(zhuǎn)化成長方形或其他平面圖形是有很大難度的,所以教材首先出示了估算圖,再讓學(xué)生利用學(xué)具進(jìn)行操作,讓學(xué)生自主發(fā)現(xiàn)圓的面積與拼成的長方形的面積的關(guān)系,推導(dǎo)出圓的面積計(jì)算公式。從學(xué)生思維特點(diǎn)的角度看,五年級(jí)學(xué)生以抽象思維為主,已具有一定的邏輯思維能力,已經(jīng)具備了初步的歸納、類比、推理的數(shù)學(xué)經(jīng)驗(yàn),并具有了轉(zhuǎn)化的數(shù)學(xué)思想。所以在教學(xué)中應(yīng)組織學(xué)生利用學(xué)具開展探究性的數(shù)學(xué)活動(dòng),注重知識(shí)發(fā)現(xiàn)和探索過程,使學(xué)生從中獲得數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)的積極情感體驗(yàn)和感受數(shù)學(xué)的價(jià)值。

【教學(xué)目標(biāo)】:

1、通過猜想、觀察,操作,引導(dǎo)學(xué)生推導(dǎo)出圓面積的計(jì)算公式,并能運(yùn)用公式解答一些簡單的實(shí)際問題。

2、培養(yǎng)學(xué)生觀察、分析、推理和概括的能力,發(fā)展學(xué)生的空間觀念,并滲透轉(zhuǎn)化和極限的數(shù)學(xué)思想。

3、通過小組合作交流,培養(yǎng)學(xué)生的合作精神和創(chuàng)新意識(shí),提高動(dòng)手實(shí)際和數(shù)學(xué)交流的能力,體驗(yàn)數(shù)學(xué)探究的樂趣和成功。

【教學(xué)重點(diǎn)】:掌握求圓的面積的計(jì)算方法,并能正確的計(jì)算。

【教學(xué)難點(diǎn)】:理解圓的面積的推導(dǎo)過程。

【教學(xué)準(zhǔn)備】:多媒體課件、圓片、剪刀、圓的面積學(xué)具

【教學(xué)過程】:

一、創(chuàng)設(shè)情景,提出問題

1、課件出示:丹江公園草坪中間的“噴水器”灑了一圈水。

師:這是丹江公園的草坪,為了使草坪更加生機(jī)勃勃,園林工人在草地上裝置了自動(dòng)旋轉(zhuǎn)噴水器,噴水器旋轉(zhuǎn)一周,在草地上形成了一個(gè)(圓),要想知道噴過的草地有多大,其實(shí)就是求的(圓的面積)

2、揭示課題:這節(jié)課,我們就一起研究圓的面積。板書課題:圓的面積。圓的面積在哪呢?誰能上來摸一摸。動(dòng)畫演示圓的面積。你能像他這樣規(guī)范地摸一摸你們桌上圓的面積嗎?

二、自主探究,合作交流

(一)、圓的面積的概念

出示一個(gè)圓,結(jié)合其他平面圖形說一說圓的面積是什么?學(xué)生思考后回答提問。

(圓所圍成的平面的大小叫做圓的面積。)

(二)、推導(dǎo)圓的面積公式

1、利用多媒體把圓平均分成4份,然后分成兩半并拼在一起。

方法如上,把圓平均分成8份、16份、32份,并拼在一起。

觀察所拼成的圖形。仔細(xì)觀察所拼成的圖形變化情況。

2、讓學(xué)生使用學(xué)具。

提問:分的份數(shù)越多,拼成的圖形越接近什么形狀?

學(xué)生動(dòng)手?jǐn)[學(xué)具,并思考問題。(分的份數(shù)越多,每一份就會(huì)越小,拼成的圖形就越接近長方形。)

3、拼成的近似長方形的長和寬與圓的各個(gè)部分有什么關(guān)系?圓周長的一半(即C÷2)是長方形的長;圓的半徑(即r)是長方形的寬。

4、使用多媒體課件,師生一起推導(dǎo)圓的面積公式,

5、討論:

提問:要求一個(gè)圓的面積,必須知道圓的什么條件?學(xué)生回答:必須知道圓的半徑提問:知道圓的直徑可以求圓的面積嗎?學(xué)生思考,可以。

圓的半徑是直徑的一半。

(三)、利用公式計(jì)算圓的面積

1、出示例題:

已知圓的半徑是5厘米,求圓的面積是多少平方厘米?

S=πr2 3.14×52=3.14×25=78.5(平方厘米)

答:這個(gè)圓的面積是78.5平方厘米。

2、出示教材例題1:

圓形花壇的直徑是20米,它的面積是多少平方米?

①指名讀題,讓學(xué)生試做。

②學(xué)生板演20÷2=10(米)

3.14×102 =3.14×100=314(平方米)

答:它的面積是314平方米。

③集體訂正。

強(qiáng)調(diào)指出:列出算式后,要先算平方,再計(jì)算。

三、鞏固練習(xí)

1、直接寫出得數(shù)。22= 32= 52=

72= 92= 102= 0.22= 0.42=

2、求下面各圓的面積。(單位:厘米)

四、拓展提高。一個(gè)圓形場地的周長是50.24米,這個(gè)圓形場地的面積是多少平方米?

五、作業(yè)布置

教材練習(xí)十六第1、第2題

圓的面積課件范文第5篇

一、發(fā)揮多媒體的優(yōu)勢(shì)

1.直觀性的優(yōu)勢(shì)。教師在教學(xué)中根據(jù)圖形與幾何知識(shí)的教學(xué)目標(biāo)和教學(xué)重點(diǎn),從新知識(shí)的導(dǎo)入到新概念的建立;從新概念的建立到新知識(shí)的鞏固,均借助計(jì)算機(jī)的直觀演示,為學(xué)生創(chuàng)設(shè)和諧優(yōu)美的學(xué)習(xí)環(huán)境,使學(xué)生充分感知。例如,在教學(xué)三角形意義時(shí),學(xué)生回答在日常生活中見到過三角形物體后,計(jì)算機(jī)將紅領(lǐng)巾、三角板的顏色去掉,只留下其外框,教師指著這些外框讓學(xué)生數(shù)一數(shù)這些三角形有幾條線段圍成,這樣抽象出三角形的特征。隨后計(jì)算機(jī)屏幕上三條邊依然閃動(dòng)并發(fā)出聲音,對(duì)三角形是三條線段圍成的這一意義給學(xué)生深刻的印象,對(duì)新概念建立起到了教師用語言描述而達(dá)不到的作用。

2.趣味性優(yōu)勢(shì)。多媒體輔助教學(xué)一改過去課堂上盡是靜態(tài)信息輻射的局面,使原本呆板的東西動(dòng)起來。例如,在三角形意義這一概念建立時(shí),在屏幕上出現(xiàn)三條線段,然后通過畫面移動(dòng)三條線段圍成一個(gè)封閉的圖形。再如,在建立三角形高這一概念時(shí),屏幕中的三角形一個(gè)頂點(diǎn)及它的對(duì)邊閃過后,由這個(gè)頂點(diǎn)慢慢下來一條垂線,垂足落在它的對(duì)邊上,并且隨著打出“高”、“底”的字。這樣通過對(duì)屏幕上圖形移動(dòng)的變化,不僅加深了學(xué)生對(duì)三角形意義和高的意義這兩個(gè)概念的理解,而且吸引了學(xué)生上課的注意力,激發(fā)了學(xué)生學(xué)習(xí)的熱情。

3.形象性優(yōu)勢(shì)。在教學(xué)時(shí)有些概念的建立只靠教師語言傳遞,學(xué)生往往理解起來比較困難,而利用多媒體輔助教學(xué)則能彌補(bǔ)這一缺陷。如三角形的特性是“不變形,穩(wěn)定性”,當(dāng)問及日常生活中哪些物體應(yīng)用三角形這一特性時(shí),學(xué)生一下就能說出電線桿、凳子及自行車等,但是,當(dāng)具體問及這些物體的哪個(gè)部位利用三角形穩(wěn)定性原理時(shí),學(xué)生則露出無奈的神情。可見,三角形穩(wěn)定性在學(xué)生頭腦中仍然是非常抽象的?,F(xiàn)在計(jì)算機(jī)只要在其有關(guān)部位閃示幾下,學(xué)生就會(huì)一目了然,為什么要在這些部位應(yīng)用三角形這一特性,真是“此時(shí)無聲勝有聲”。

4.深刻性優(yōu)勢(shì)。在三角形中作高是本課時(shí)的教學(xué)難點(diǎn),為突破這一難點(diǎn),我通過軟件設(shè)計(jì),讓計(jì)算機(jī)演示在銳角三角形內(nèi)作高,顯示直角三角形的兩條直角邊為高及直角所對(duì)斜邊的高,演示作鈍角三角形的三條高(其中兩條在外)。在演示過程中,學(xué)生不僅了解了作高的過程和方法,了解了每一種三角形都有三條高,而且加深了對(duì)高的概念的深刻理解。

5.藝術(shù)性優(yōu)勢(shì)。計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)具有較高的藝術(shù)品位,在“聲”“形”“色”“體”的結(jié)合上給學(xué)生以美的享受,從而將教師的課堂教學(xué)設(shè)計(jì)與學(xué)生學(xué)習(xí)心態(tài)結(jié)合到一塊。它通過“聲”傳遞師生心靈深處的語言,通過“形”溝通師生之間的感情,通過“色”描繪師生所要描繪的五彩圖。

二、及時(shí)有效地把握時(shí)機(jī)

雖然多媒體計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),但是必須根據(jù)教學(xué)內(nèi)容的需要和環(huán)節(jié),嚴(yán)格及時(shí)地把握好應(yīng)用的時(shí)機(jī)。

1.輔助于建立清晰表象之時(shí)。表象是思維想象的依據(jù),能否在學(xué)生的腦中建立清晰的表象,直接關(guān)系到教學(xué)的成敗。在幾何知識(shí)教學(xué)中,往往要求學(xué)生掌握一些作圖的方法,教師常用三角板、圓規(guī)等教具在黑板上的板演,但由于受到教師的手、粉筆或視角的不同而形成視覺阻礙。教師在制作課件時(shí),將這部分內(nèi)容用計(jì)算機(jī)模擬演示,使模擬作圖過程或其它知識(shí)點(diǎn)的講授,既不受視覺阻礙,又產(chǎn)生強(qiáng)烈的感官刺激,易在學(xué)生頭腦中形成深刻的感性認(rèn)識(shí),為教學(xué)過程的進(jìn)一步深入埋下伏筆。

2.輔助于滲透數(shù)學(xué)思想及方法之時(shí)。小學(xué)數(shù)學(xué)課程標(biāo)準(zhǔn)中要求“在教學(xué)中要滲透一些數(shù)學(xué)思想和方法”,在幾何知識(shí)的教學(xué)中有一些公式的推導(dǎo)往往涉及到一些中學(xué)才涉及的數(shù)學(xué)思想方法,這些數(shù)學(xué)思想方法只可讓學(xué)生意會(huì),不可言傳,這在常規(guī)教學(xué)中往往是令教師頭痛的一件事,而采用多媒體輔助教學(xué)往往化難為易。課件《圓的周長》中,周長公式C=2πr的推導(dǎo)涉及到不完全歸納法,教師在課件中是這樣設(shè)計(jì)的:先出示直徑分別為8cm、12cm、14cm的圓,然后令其依次在一線段上滾動(dòng),在滾動(dòng)直徑的1倍、2倍、3倍距離時(shí)依次出現(xiàn)記號(hào),滾完后顯示其滾過路程的距離。演示完后,老師讓學(xué)生觀察圓滾過的路程既周長與圓的直徑關(guān)系,學(xué)生有這三個(gè)圓環(huán)滾動(dòng)的動(dòng)畫作為依據(jù),很容易歸納出圓的周長是圓的直徑的三倍多一些的結(jié)論。

3.輔助于概念闡明之時(shí)。在幾何知識(shí)教學(xué)中,涉及周長、面積、體積、高、棱等概念,由于這些概念帶有一定的抽象性,對(duì)于以接觸感性知識(shí)為主的小學(xué)生來說,往往易混淆圓的周長及面積的概念,弄不清體積與表面積的區(qū)別,不能正確理解高與底的對(duì)應(yīng)關(guān)系等,而采用多媒體輔助教學(xué)后,這些問題就迎刃而解了。在課件《圓的面積》的復(fù)習(xí)模塊中,為了幫助學(xué)生分清周長與面積的概念,教師設(shè)計(jì)了兩幅動(dòng)畫,第一幅是一只小貓繞圓一圈,跑過的地方同步改變顏色;第二幅是將圓的平面部分從上到下涂上黃顏色。配合師生的問答,學(xué)生很快理清了周長與面積的關(guān)系。

4.輔助于培養(yǎng)學(xué)生空間觀念之時(shí)。小學(xué)生的年齡特征決定了學(xué)習(xí)“體”部分知識(shí)的困難性,而采取常規(guī)教學(xué)手段往往難以取得理想的教學(xué)效果。針對(duì)這一情況,在長方體、正方體、圓柱體等軟件中,教師充分發(fā)揮了多媒體的三維動(dòng)畫的功能。如圓柱體的表面積一直是教學(xué)中的難點(diǎn)。在該課件中,教師運(yùn)用了三維動(dòng)畫的變形功能,將圓柱體的側(cè)面展開變?yōu)橐粋€(gè)長方形。學(xué)生看了動(dòng)畫后就很容易明白圓柱體的表面積是二個(gè)圓形面積加上以圓的周長為長、圓柱體高度為寬的長方形面積之和。這里三維動(dòng)畫軟件中所制作的動(dòng)畫,為幫助學(xué)生建立正確的空間觀念,弄清正方體、長方體、圓柱體的特點(diǎn)及其表面積公式的由來起到了不可替代的作用。

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