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沒和母親結婚前,父親有一個很相愛的戀人。這是個秘密,除了父親和那個女孩彼此心照不宣,其他人誰都不知道,包括爺爺奶奶。那個女孩的太爺爺是我奶奶的遠房表哥,論輩分她該叫我父親“叔叔”,可她從沒叫過,她愛我父親,她要做他的妻子。這個秘密是我8歲那年從母親口中得知的。直到大學畢業,我才從父親那里知道了故事的全部。
“我們打小一塊兒玩,她是我的玩伴中唯一的女孩子。任性的她從小就特別黏人,我的‘隊伍’只要被她瞄見,就擺脫不掉了,她會很快進入‘副總’角色,甩也甩不掉……”
說這話時,父親臉上洋溢著一個收藏家談及自己的稀世珍品時才有的表情――迷醉的眼神、微微上揚的嘴角。我仿佛看到了夕陽西下時,一個扎著羊角辮的小女孩扯著一個男孩的衣角歡呼雀躍,拖著長長的影子歡快地結伴回家。
“你們什么時候開始的?”
父親好像沒有聽到我的發問,自顧自地說下去:“不知不覺我們就到了對性別很敏感的年齡。她粲然顯露的美,讓我既自豪,又自卑。說不清什么時候開始的。是我得了胸膜炎,她以借東西的名義探頭探腦時?還是那幫小子起哄時?抑或是家人開玩笑說給我找媳婦,她投來羞澀又幽怨的眼神時?或者我沒考上大學回家當了會計,她放棄了城里姨媽給她安排好的工作,回家告訴我時?我真不知道。”
“那段日子,我的心總被一種莫名的希冀撞擊著,我自己也不清楚那是什么。我只知道,當別人提到她的名字時,我會立刻豎起耳朵,表面上卻裝得漫不經心。一想到現實問題,我就會陷入痛苦焦灼的矛盾之中。但該來的還是來了,我必須得相親了。24歲的我沒有任何理由再去拒絕父母的要求。你爺爺奶奶是很傳統的人,他們接受不了,更無法理解我和她的關系。我的心能頂住世俗的目光,卻無法抗拒老人的眼淚。”說到這里,父親深深地埋下了頭,像一個丟失糖果的孩子。
“你相親的人就是我媽媽吧?”
也許我不該在這個時候提到母親,可我忍不住為母親難過,我不甘心母親是父親生命中的第二。至今我依然記得8歲那年的事。童年的我喜歡極了隔壁的那個長得像花兒一樣的藍姐姐。我想回家問媽媽,那個姐姐喜不喜歡我,是否抱過我?來不及把氣兒喘勻,我就竹筒倒豆子般對著正在做飯的媽媽稀里嘩啦說了一通。媽媽半天沒吭聲,像是要哭了。我小心地走過去拉母親的手,我感覺到母親的眼淚撲簌簌落在我的發間。母親突然開口了:“就是她,是她逼問你爸爸后不后悔,她有什么資格?”8歲的我斷然是聽不明白母親的話的,可我還是從母親反常的行為里感到了一些不和諧的東西。母親也許不知道那件事在我幼小的心靈上留下的痕跡。回想起母親那天包的餃子,一定是放了很多的蔥和姜,全是辣的。
“你媽媽是個很稱職的妻子,比我小兩屆,是學校里的才女。見面那天,你媽媽穿的是白色的確良襯衫,淡藍色的褲子,兩條不長不短的麻花辮兒垂在胸前,靜靜地站著。她的眼睛很漂亮,還有一張電影明星般的瓜子臉,我心想就是她了!”
“你就那么自信我媽一定會看上你?”
“這點兒自信還是有的,我覺得我都帥呆了!”“哈哈……”父親大笑起來,我也大笑起來。
“就在我和你媽相親的頭天晚上,她找過我,問我能不能帶她走?我沒回答她,更沒法答應她。她哭著跑了,我的心像被刀子剜了一樣。這輩子注定給她幸福的人不是我。那時你爺爺奶奶都老了,我想是該為他們活著了,我要給他們幸福,他們需要我,未來的家庭也需要我。你媽媽賢淑溫順,家里的一切都被她打理得井井有條。婚后的生活雖然波瀾不驚,但我卻能感受到實實在在的幸福。一年后你出生了,家里更是笑聲不斷,你就是我們的‘開心果’。”
“那你愛我媽媽嗎?”
最近一段時間,我明顯地感覺到,老公在床上有些心不在焉,每個月的那幾次,往往是草草收兵,一副例行公事的樣子。
記得剛結婚那陣子,每天,我們都會有一個美好的夜晚。
婚前,我對書刊上的一些夫妻的描繪表示懷疑,等結了婚才知道,原來男女間的事情竟然如此美妙。
愛如潮水般散去后,老公都會溫柔地對我說:“丫頭,我是不是位高超的舵手?”當老公用那種親親的柔柔的眼神看著我說這句話時,我都會用我的拳頭不住地捶打著他那寬厚的肩膀,嘴里說著你壞你壞,心里卻幸福得要死。我想,雖然我只是蕓蕓眾生中一個普通得不能再普通的女人,可我卻是這世界上最最幸福的小女人。
我無數次地憧憬著,我和老公的這艘愛情航船會永遠這樣駛往幸福的彼岸,可我沒想到,在我和老公結婚七年后,我們這艘婚姻的航船竟在險灘上擱淺了。也不知道從什么時候開始,老公這個舵手時常“開小差”,我們的不再琴瑟和諧。每逢我有那個要求,他常常以累了困了為由婉言拒絕我。
可是我發現,老公的身體并沒有病!他只不過對我失去了興趣而已。
老公,你這是怎么了?難道,真應了“七年之癢”這句話了嗎?
癥結出在哪里呢?我是個遇事較真的人,我決定找出老公對我喪失興趣的原因。
(2)
夫妻間的這種事情畢竟屬于難言之隱,我決定先從自身查找原因。
我知道,熟悉的地方沒景色,再好吃的食物要是頓頓吃,用不了多久就會膩了。在男人面前,女人就是風景就是食物。結婚幾年,老公對我熟悉得不能再熟悉了,我決定悄悄“包裝”一下自己,給老公煥然一新的感覺。
老公不止一次對我說,雖然男人更多的時候喜歡文靜的淑女,但女人在穿著上有時也要學會一點點“野性”,可我對此并沒有上心。我反駁他說,居家過日子,哪來的那些浪漫?可這次,為了取悅老公,我只好“改頭換面”了。
那天,我穿了一身遠遠望去有點夸張的艷麗裙子,化了比平時稍重的妝。我這樣做,就是想吸引老公的注意。然后,我給老公打了電話,讓他陪我逛公園。老公開始有些遲疑,但最后還是答應了。
等見了面,老公用非常驚訝的眼神看著我,然后拉過我的手笑著說:“我發現,其實,你有一副很漂亮的身材,按當今流行的標準來說,你屬于那種寬肩、蜂腰、圓臀、長腿的體型。你今天的這身打扮,看上去要比實際年齡小一些,我第一眼看到你的時候,以為哪來的明星呢!”
那天,一直到離開公園,我們的手也沒分開過。老公說:“我們好久沒這么開心過了,我好像又回到我們相戀的日子。”
我知道,我“包裝”自己的預期效果達到了,甚至比想象的還要好。
到了晚上,我將臥室布置得溫馨浪漫。有人說,朦朧的粉紅色的燈光,最能喚起夫妻對性生活的感覺。我將床頭燈悄悄換成了柔和的粉紅色燈,晚上,在洗完澡后換上新買的性感內衣,灑上老公喜歡聞的香水,先上了床,準備給他一個驚喜。
老公在微微驚愣之后,很快,就將我擁在懷中。
那天晚上,老公又成了浪尖兒上勇猛的舵手,帶領我沖上一個又一個快樂洶涌的巔峰。我依偎在老公的懷里,慶幸自己找到了久違的感覺。
我知道,老公之所以“性”趣大減,一定是我對老公造成了審美疲勞的緣故。
我本以為老公會因此回到從前,可沒過多久,即便我將自己打扮得再漂亮性感,再怎樣調他胃口,老公又對我愛搭不理了。我明白了,雖然我將自己包裝了一下,可換皮沒換瓤,我只不過是稍稍刺激了一下老公的激情。
難道,老公在外頭有了別的女人或者精神背叛了我?我知道,精神的背叛有時候比肉體的背叛更為可怕……
(3)
我真真切切地感覺到,在我和老公中間,一定有那么一個女人,就是這個女人抓走了老公的心。現在,老公雖然沒有跟我提出離婚,可他的心已經走了。
我開始格外留心老公的一言一行,并將可能跟老公有“親密接觸”的女性像過篩子似的篩了篩,可我并沒有發現老公移情別戀的蛛絲馬跡。
難道是我多疑了?
就在我為自己的判斷喪失耐心的時候,我忽然有了新的發現。這天,我竟然在衛生間的垃圾筒內發現了一只用過的安全套。現在,老公正和我打著身體的冷戰,即便偶爾有的那么一次,也沒用過安全套啊!
我當時就暈了。盡管我料到老公會移情別戀,可那只是我的推測,當事情真正擺在面前的時候,我還是受不了。我當時就想拿著這只骯臟的東西沖到老公面前質問他,可我想了想,還是忍住了。
就在我滿腹狐疑的時候,終于發現了老公的秘密。
這天晚上,都十點多鐘了,老公還在書房里。我悄悄下床,想為老公做點夜宵。隔著玻璃,我見老公坐在轉椅里,正在瀏覽網上的美女圖片。讓我怎么也想不到的是,老公竟然在!
看著老公陶醉的神情,我只好悄悄回到臥室。我終于明白,老公之所以對我不感興趣,是因為他用的方式在想象中感受著和那些網上的美女歡愛時給他帶來的。
第二天一早,我果然又在垃圾筒的底部發現一只用過的安全套。
我終于明白:夾在我和老公之間的“那個女人”,其實就是這些網絡上的。
我不禁在心底涌起一縷悲哀。我沒想到,網上的居然成了我的“情敵”!我想不通,再好,畢竟是沒有生命的,也不及我這個大活人具備真實感吧!可現在,我居然敗給了這些虛幻飄渺的。我怕老公難堪,沒有將這件事情揭穿。
我在一本雜志上看過這樣一句話,夫妻是這條鋼絲繩上的兩個演員,誰先掉下來就意味著夫妻生活的失敗。即便我們誰都不是贏家,但率先失敗的卻是我。
我再一次陷入困惑和迷茫之中。
(4)
有一天晚上,因為一點瑣事,我們吵過后,老公對我說:“我們離婚吧!”我驚呆了。我怎么也沒想到,他會對我說出這種話來!
“為什么?”我強忍著,不使眼中的淚水落下來。
老公嘆息了一聲,說:“不為什么,就是過夠了。”
在我的心中,老公就是天空,我從沒想過有一天我們會分開。盡管我一再追問老公為什么,可他最終還是沒有說出來。
盡管我和老公的婚姻沒有因此終結,可老公比以前更孤獨了,每日回到家就將自己關在書房里,我們之間的交流越來越少,枕席間的交流更趨于零。我想,如果沒有女兒,他真的會義無反顧地離開我。現在,維系我們的僅僅是道義和責任。
就在我近乎絕望的時候,忽然想到了一位開心理診所的朋友。聽了我的講述,朋友說:“你每天在他面前晃來晃去,甚至寸步不離,深層的原因就是你不再創新自己,甘于為丈夫作陪襯,這種行為最初還能被丈夫接受,但久而久之,夫妻間的思想距離、觀念距離、生活方式距離隨著時代的變化而越拉越大,丈夫不再愿意像從前那樣廝守一個觀念落伍、整日以家庭居室為樂的妻子。還有,造成夫妻處于困惑和迷茫之中的原因還有一個,那就是工作壓力過大。現在生活節奏日益加快,尤其是男人。他們肩上擔負著養家糊口的重任,很容易造成生理和心理上的失衡。所以,他在網絡上尋找宣泄也在情理之中。”
最后,朋友坦言,對于上述夫妻失調者,搶救的辦法只有一個,就是提高自身素質,提高生活質量,為老公減壓,才能找回“性”福。
朋友一言中的。
老公是做售后的,收入雖豐但不穩定,老公常嘆息說要改行,可又舍不得他深愛的專業。現在,我閑在家里,身為一家之主的他,一定感到了肩上沉重的壓力。誰不渴望有個寬松的生活環境呢?
于是瞞著老公,我應聘到了一家醫藥公司上班。上班時,我兢兢業業;下班后,我對老公溫言軟語,不時地還撒個嬌。我驚喜地發現,老公看我的眼神也從最初的驚訝到欣賞直至后來的親切。
讓我感到溫馨的是,每天下班后,只要有時間,老公竟然將飯菜做好等著我回來。以前,他可是從不做家務的。老公對我越來越體貼了。當聽說我被提為藥房店面經理,老公說:“老婆,你真是越來越能干了!這下,我就沒后顧之憂了,可以放手大干一場了。兩年內,咱們換房,買車。老婆,我不會讓你失望的!”見我靜靜地聽著,老公突然摟著我的腰說:“其實,你是個挺有味道的女人。”說罷,溫柔地擁我入懷。聽著老公的夸獎,我激動得想哭。
那天晚上,老公又成了一個勇猛的舵手,一次次把我帶上愛潮的巔峰……
打那兒以后,我和老公的終于峰回路轉,我們又遠航了,我再也沒有在垃圾筒內發現安全套。一次激情過后,老公對我說:“有件事情其實我很對不住你。在咱們冷戰的日子,我迷上了網絡圖片。有一次我實在沒控制住,竟然了,從此,一發不可收,在的時候用了安全套,咱們家床頭柜里的安全套差不多都讓我用光了。”
我喜歡老公的真誠。看著他孩子般羞紅的臉,我一樂:“傻瓜,網絡中的美人再好,也比不上我這個大活人吧?”
在我的戲謔下,老公詭笑:“男人嘛,要么征戰在沙場,要么馳騁在床上。”我點著他的額頭,說:“瞧你那沒出息的樣兒。”心里卻像被蜜浸過一般的甜。
關鍵詞 葡萄 品種 選育 早霞玫瑰 極早熟 白玫瑰香 秋黑
2000年以來,我國自行選育和引進的葡萄新品種已近百個,但目前市場上中晚熟品種多、早熟品種少的局面仍沒有徹底改變,大多數早熟葡萄品種果粒大,但缺乏香氣、含糖量低。我院葡萄研究室針對這一問題,自20世紀90年代末即開始以選育早熟、有香味、含糖量高的早熟品種為育種目標,先后選配了100余個雜交組合,經過10余年的不懈努力,選育出了極早熟、具有濃郁玫瑰香味、含糖量較高的新品種早霞玫瑰。
1 選育經過
早霞玫瑰原代號99-4-9-1。我們于1997年在大連市農業科學研究院葡萄試驗園中,以白玫瑰香作母本、秋黑作父本進行人工雜交,共雜交5個花穗,秋季獲得雜交種子127粒,1998年播種雜交種子,獲得雜交實生苗10株,1999年將雜交實生苗定植到葡萄實生苗圃中,雜交實生苗于2000年開始結果,經植物學特征和生物學特征鑒定,從中選出優良單株99-4-9-1,該優良單株表現為極早熟、果粒紫紅色、著色好、具有濃郁的玫瑰香味、含糖量高、果肉偏硬,其綜合品質和早熟性明顯好于葡萄品種園中其他早熟葡萄品種,隨后選為優良品系。2005年開始通過綠枝嫁接、硬枝扦插等方法擴繁苗木,并在葡萄品種園內與其他早熟葡萄品種進行系統的對比試驗。2005-2012年在大連市甘井子區、金州區、瓦房店市、旅順區,沈陽市新民、上海、陜西等多地設立試驗點,經過連續多年的多點調查記載,證明該品系優良性狀穩定,具有較高的生產應用價值。2012年6月通過遼寧省種子管理局組織的品種備案。
2 主要性狀
2.1植物學特征
早霞玫瑰為歐亞種。嫩梢綠色,略帶紅暈,其雙親嫩梢均為綠色。新梢無茸毛,節間色澤與雙親同為紅褐色至綠色,卷須與雙親同為隔1節互生,成熟枝條紅褐色。幼葉綠色,葉尖略帶有紅褐色,葉背密生白色絮狀茸毛。成葉心臟形,深綠色,較小,較硬,葉背密生灰白色絮狀茸毛,葉片邊緣向背面卷筒狀;葉片主脈長度介于雙親(白玫瑰香14.50cm,秋黑16.50cm)之間,為15.50cm;裂刻5~7裂,上下裂刻均較深;葉緣鋸齒多,鋸齒與雙親品種同為銳齒;葉柄洼寬拱形,葉柄紅色,葉柄長度不及雙親。兩性花,第1花序多著生在結果枝的第4節,若新梢分叉,花序則著生在分叉后新梢的第1節位。早霞玫瑰與親本品種和對照品種87-1植物學特征見表1。
2.2果實主要經濟性狀
早霞玫瑰果穗圓錐形,有1~2個副穗,穗長19.50cm、寬16.50cm,平均單穗重650.0g,最大單穗重1680.0g,果粒著生中等緊密。幼果黃豆粒大小時有十分明顯的溝棱。果粒圓形,縱徑2.14cm、橫徑2.01cm。中等大,粒重6.0~7.0g,最大粒重8.0g,著色初期果皮鮮紅色,逐漸變為紫紅色,光照充分為紫黑色。果皮中等厚,果粉中多。每個果粒有種子1~3粒,種子小,褐色,喙中等長。果肉與種子不易分離,肉質硬脆,無肉囊,汁液中多,具有濃郁的玫瑰香味,品質極佳。可溶性固形物含量16.10%~19.20%,總糖含量15.18%,可滴定酸含量0.46%,維生素C含量78.60mg/kg(表2)。果實成熟后不裂果,不脫粒,極耐貯運。
早霞玫瑰果實為紫黑色,其母本品種白玫瑰香為黃綠色,父本品種秋黑為藍黑色。早霞玫瑰可溶性嗣形物含量、總糖含量、可滴定酸含量、維生素C含量、單寧含量與雙親品種和對照87-1相近(表2)。
2.3生長結果習性
早霞玫瑰生長勢與雙親品種同為中庸,生長勢不及對照品種87-1。枝條節間短,新梢生長至5~6節位多出現分枝,分枝率98.00%。萌芽率為78.70%,平均95.45%的芽眼萌發后抽生成長枝,成枝力與對照品種白玫瑰香大體相當,結果枝率93.30%,結果系數1.62。結果枝著生2個果穗的較多,占結果枝總數的50.80%,著生3個果穗的結果枝占結果枝總數的7.10%;花序多著生在結果枝的第4節,若新梢分枝,則花序著生在分枝后新梢的第1節位。坐果率適中,與雙親品種相近,平均坐果率為40.90%,自然坐果后果穗松緊適中。新梢摘心后有少量二次果現象。二次果在大連地區9月上旬充分成熟,品質更佳(表3)。
2008年在大連市農業科學研究院葡萄試驗同內以行株距3.0m×0.7m棚籬架分別建園,苗木定植第2、3、4年平均株產分別為2.1、3.1、4.6kg,折合每667m2產量分別為667.0、984.6、1461.0kg。若花期不疏花常有超產現象,超產后成熟期推遲,但與對照品種87-1相比,超產后的早霞玫瑰果肉硬度仍然較大,充分成熟后品質仍然較好,而87-1則幾乎全為水紅粒。經過連續幾年的產量調查記載,早霞玫瑰進入結果期早,豐產穩產。
2011-2012年在大連市農業科學研究院溫室試驗園進行生產試驗,采取“單主蔓吊蔓式V形架”栽培,雙行栽植,大行距2.4m,小行距0.5m,株距0.8m,每667m2定植700株,定植第2年后每株留結果枝3~5個,每667m2留結果枝2100~3500個,每個結果枝留1穗果,每個果穗0.5~0.75kg,折合667m2產量1000~2000kg,實踐證明,早霞玫瑰在日光溫室內早果性、豐產性極好,中密度定植即可實現第2年豐產。
2.4物候期
在大連地區露地栽培,早霞玫瑰4月中下旬萌芽,6月初始花,7月上旬果實開始著色,7月下旬成熟,8月上旬漿果充分成熟,從萌芽至果實充分成熟約需105天,果實發育期55天,成熟期比早熟對照品種京秀早15~20天,比對照品種87-1早5~8天(表4),屬極早熟葡萄品種,果實成熟一致。枝條開始成熟期為8月中旬。11月中下旬落葉。
在日光溫室栽培,物候期隨溫室內環境調控不同而有所差異,2011-2012年在大連市農業科學研究院日光溫室內試栽,1月6日開始升溫,2月16日萌芽,3月26日始花,5月1日開始著色,6月1日充分成熟。如12月開始升溫,5月1日之前成熟上市,成熟期比對照品種87-1提前。
2.5抗病性調查
2.5.1葡萄黑痘病
于發病盛期調查,每小區調查2株樹,每株樹分上、下、左、右、中5點取樣,每點取當年生新梢2條,分別調查每條枝蔓上的病葉數、葉片上的病斑面積,按平均每片葉病斑占葉面積的百分率分級為:0級,無病斑;1級,病斑面積占整個葉片面積的5.0%以下;3級,病斑面積占整個葉片面積的5.0%~15.0%;5級,病斑面積占整個葉片面積的15.1%~25.0%;7級,病斑面積占整個葉片面積的25.1%~50.0%。計算病葉率和病情指數。
病葉率(%)=(病葉數/調查總葉數)×100
病情指數=[∑(各級病葉數×相對級數值)/(調查總葉數×7)]×100
2.5.2葡萄霜霉病
于葡萄霜霉病發病盛期調查,每小區隨機調查當年抽生新蔓10條,自上而下調查全部葉片葡萄霜霉病病斑面積,分級方法為:0級,無病斑;1級,病斑面積占整個葉片面積的5.0%以下;3級,病斑面積占整個葉片面積的5.0%~25.0%;5級,病斑面積占整個葉片面積的25.1%~50.0%;7級,病斑面積占整個葉片面積的50.1%~75.0%。計算病葉率和病情指數。
病葉率(%)=(病葉數/調查總葉數)×100
病情指數=[∑(各級病葉數×相對級數值)/(調查總葉數×7)]×100
2.5.3抗病調查結果
在相同栽培水平及管理條件下,早霞玫瑰葡萄黑痘病病葉率和病情指數均比對照品種白玫瑰香低,比對照品種秋黑高,其病葉率為8.72%,病情指數為1.65;早霞玫瑰抗葡萄黑痘病能力比白玫瑰香強,不及秋黑。早霞玫瑰葡萄霜霉病病葉率和病情指數均低于對照品種白玫瑰香、秋黑,其病葉率為1.00%,病情指數為0.14,早霞玫瑰對葡萄霜霉病抗性比白玫瑰香、秋黑強(表5)。
早霞玫瑰抗裂果能力較強,在沙壤土、壤土及偏黏重土壤上栽植均未出現過裂果現象。自根苗抗寒力較強,大連地區冬季防寒培土厚度15~20cm,未發生凍害。采用貝達作砧木嫁接,可在大部分地區安全越冬。
3 適宜栽培區域
早霞玫瑰屬于適應性較強的品種。2005-2008年在大連市6個縣(市、區)試栽,表現出結果早、豐產性好、抗病性強、成熟期早、風味濃郁。2008-2010年在遼寧(沈陽市新民)、黑龍江、上海、陜西等地試栽,生長結果正常。早霞玫瑰保護地促成栽培,著色容易,保護地弱光條件下無需更新也能連續成花。因其生長勢中庸且抗病性強,同樣適宜生長季長、生長量大的南方地區栽培。
4 栽培技術要點
(1)栽植 適宜傳統小籬架及雙十字V形架,不宜采取棚架栽培,行距2.0~2.5m,株距0.5~1.0m,每667m2栽800~1000株。
(2)整形修剪 冬剪采取扇形整枝或單株單蔓新梢V形引綁的雙十字架。以短梢修剪為主,幼樹期不宜急于追求產量,以培養樹形,壯大樹勢為主。夏剪待坐果后再進行結果枝摘心,適當降低坐果率。中后期多留葉片,以提高光合效率。
(3)花果管理 新梢伸展后,及時摘除多余花序,弱枝及中庸枝不留果,強枝留1個果穗。對較大的副穗和穗尖及時疏除,注意多留結果枝,每個結果枝留果不超過0.5kg。花后對發育不良的小果及時摘除。
關鍵詞:煤礦井下軌道;運輸新技術
一、延長蓄電池電機車在煤礦井下的使用壽命
煤礦井下采區的平巷運輸多采用蓄電池式電機車運輸。由于各單位管理和使用方法有較大區別,蓄電池的使用壽命也存在較大差異。
管理方法不同。有些煤礦在采區使用地點就地充電,由機車的使用人員代管。機車上使用一塊電池,將備用電池充電。其缺點是充電機的利用率低;蓄電池中的電解液蒸發后得不到及時的補充;充電點不能保證建在總回風巷附近;充電時間沒有保證。有的煤礦在井下充電室按《煤礦安全規程》規定使充電室內的回風流直接進入總回風巷,并安裝多臺充電機同時對多組蓄電池進行充電,為井下所有的蓄電池電機車提供足夠的電源,在機車使用地點設換電點。其缺點是須提前指定運輸地點。
充電方式不同。分散充電―隨掘進工作地點的變更隨之移動充電機的位置,多數單位對一臺充電機充電過程中產生的有毒氣體不如對待瓦斯那樣重視,違反了《煤礦安全規程》中的規定,含有氫氣的風流對現場人員身體健康有傷害。集中充電―充電室位置設計符合《煤礦安全規程》的規定,充電過程產生的有毒有害氣體能直接進入到總回風巷中,對現場人員身體健康沒有傷害。
電解液配制。電解液密度過大或過小都影響到蓄電池容量和使用壽命。蓄電池初充電。電解液的高度在單只蓄電池中以高出極板15mm為宜。液面過高,初充電過程中由于產生熱量而膨脹溢出箱體外,腐蝕箱體和地面;液面過低,因發熱蒸發露出極板,使蓄電池容量降低。初充電完畢停電24h后再調整單組蓄電池中的電解液密度。如果電解液密度高于1.26kg/L則補充蒸餾水;如電解液密度低于1.23kg/L則補充密度為1.30kg/L的電解液。
二、變頻調速技術在電機車電動機的應用
電機車是礦井軌道運輸的主要牽引設備。其中,架線式牽引機車多年來一直沿用結構復雜、故障率高和維修費用大的直流電動機,且目前國內絕大多數礦山牽引機車還在使用觸頭電阻調速方式,處于耗電量與維修量大的狀態。由于變頻調速牽引機車采用了故障率低和性能可靠的三相異步交流鼠籠式電動機,結合技術先進與節電效果顯著的變頻調速器,取代直流電機車比較落后的驅動技術,達到了當代世界先進技術水平。由于工作環境特點所致,礦用電機車調速系統處于頻繁的啟動、制動和加減速等狀態,還要適應負荷上下坡和顛簸路況等情況,因此要求電動機啟動轉矩大、過載能力強。另外,調速系統不但要能四象限運行,還要能再生制動到低速。這樣,當負載轉矩增大時,轉速就能迅速下降,而電動機輸出功率基本不變,從而使電動機不易因負載增大而引起過載。反之,當負載變小時,電動機轉速能自然上升,以利于提高生產效率。此外,為防止主輪打滑,調速系統還應考慮具有最大轉矩限幅功能。由于逆變器和電動機都安裝在電機車上,所以整個調速系統應盡可能設計得體積小、重量輕、硬件結構簡單和控制方便。對于直接轉矩控制而言,在高速運行階段,除了電動機定子電阻不需知道其它參數,所以直接轉矩控制對電動機參數的依賴性比矢量控制要低許多。其產品包括5t、8t和10t隔爆型電動機斬波調速控制裝置,目前已廣泛應用于以電池為動力源的交流電動機牽引驅動礦山電機車上。
三、煤礦工作面移動變電站運輸安全制動系統
我國煤礦機械化水平不斷提高,設備向重型化、復雜化發展,井下采煤工作面綜采設備被廣泛使用,與其相配套的采煤工作面移動變電站設備龐大。一個大型煤礦工作面移動變電站使用的設備往往要幾十輛平板車裝載運輸,但采煤工作面巷道起伏坡度大、地質條件復雜,且變電站隨工作面推進而頻繁移動,尤其在坡道上由于斷繩、斷銷、斷連桿等原因有時會形成跑車事故,給人員和設備安全帶來很多隱患,同時可能造成工作面水、電、液和部分設備供應中斷,給煤礦生產造成直接或間接經濟損失。為解決這個問題,對工作面移動變電站運輸安全制動系統進行研究,設計一種自帶制動的平板車與其它車輛配套使用,設備安裝在制動平板車上,確保設備運行安全,是完全必要的。
新研制的工作面移動變電站運輸安全制動系統設計為多臺制動平板車串聯聯接,通過液壓系統實現同時快速制動。這種制動平板車主要由車架、制動器、輪對、快速釋放閥、液壓系統等組成。制動器采用了提閘式抱軌制動,制動力由碟形彈簧產生,屬失效安全型。制動器在制動平板車運行過程中抬離軌面,故可適于普通道岔的巷道,并與其它輔助設備配套使用。
四、制動平板車
順槽移動變電站是綜采工作面水、電、液和部分備件的臨時供應中心,通過絞車的雙向牽引,實現同綜采工作面的同步移動,極大提高了工作效率。在絞車牽引過程中,由于斷繩、斷銷、斷連桿等原因,有時會發生跑車事故,給人員、設備等造成威脅,同時可能造成綜采面的供應中斷。
新研制的制動平板車在正常工作時可以自由牽引;遇到斷繩等事故發生時,可推動手動緊急釋放閥,實現緊急制動;還可以根據需要實現慢速工作制動。緊急制動閘由閘塊、閘鉗、缸體、彈簧等組成。正常工作時,制動缸體A腔內的液壓力把彈簧壓緊,帶動閘鉗轉動,把閘塊抬離軌面,從而保證制動平板車行走、移動時能正常通過軌道和道岔。當需要制動時,釋放制動缸體A腔的液壓力,彈簧便壓緊活塞并帶動缸體一起移動,通過閘鉗使閘塊壓緊軌道,實現制動功能。閘塊是制動平板車的關鍵部件之一,由基體和粉末冶金燒結而成。粉末冶金屬脆性材料,故正常停車制動時要求采用慢速停車制動,防止閘塊同軌道的沖擊而降低閘塊的使用壽命。
試驗中發現多臺車聯動的響應速度偏低,原因是緊急制動時聯動管路內的乳化液壓力難以瞬時降低,從而導致快速釋放閥閥芯不能迅速移動,致使快速釋放失敗。后來對液壓系統進行了改進,并增設了先導閥。由于聯動先導閥口的管路乳化液少且無任何補充,所以壓力釋放快,又因為各車壓力釋放系統相對獨立,故各聯動車輛能實現真正的快速反應。
五、斜巷常閉擋車欄自動控制裝置研究應用
其工作原理如下:當列車正常下行的時候,只要行駛至測速區AB(傳感器)處,傳感器A接收到礦車下行的指令對其進行檢測。傳感器B發出信號傳遞給可編程自動化控制器,由可編程自動化控制器判定礦車是否在正常行駛速度范圍內。若礦車正常運行,可編程自動化控制器觸發電磁氣控閥動作,擋車欄抬起,指示燈變為紅色;若礦車超速運行,則常閉擋車欄不動作并且發出報警信號,將信息反饋給轎車司機,預防事故的發生;當礦車下行并通過傳感器C的時候,傳感器C發出信號給可編程自動化控制器,可編程自動化控制器觸發電磁氣控閥動作,擋車欄常閉,指示燈變為綠色。礦車上行時首先經過傳感器C處,傳感器C接收到礦車上行的指令,傳感器C發出信號傳遞給可編程自動化控制器,可編程自動化控制器判定礦車是否在正常行駛速度范圍內。若礦車正常運行,可編程自動化控制器觸發電磁氣控閥動作,擋車欄抬起,指示燈變為紅色;若礦車超速運行,則常閉擋車欄不動作并發出報警信號;當礦車上行行并通過傳感器B的時候,傳感器B發出信號給可編程自動化控制器,可編程自動化控制器觸發電磁氣控閥動作,擋車欄常閉,指示燈變為綠色。操作系統還具有電手動操作和氣手動操作。
【摘要】 建立氯霉素,克倫特羅和雌二醇 3種獸藥殘留同時檢測的懸浮芯片法。通過將3種獸藥的BSA蛋白結合物偶聯于懸浮芯片的固相載體——聚苯乙烯熒光微球上作為檢測探針,采用間接競爭法,在液相反應體系中,3種小分子獸藥抗原和微球上的獸藥結合物共同競爭液相中各自特異性的生物素化單抗,再加入藻紅蛋白標記的鏈霉親和素,反應后檢測獲得熒光信號,繪制出3種獸藥殘留檢測的標準曲線。同時進行3種獸藥的常規酶聯免疫吸附法標準曲線的測定。在檢測技術、檢出限、檢測區間、特異性、盲樣測定和多元分析等方面對兩種方法進行比較。除了特異性外的其它指標的比較中,懸浮芯片法均具有明顯優勢。兩種方法的特異性檢測具有良好的一致性。高通量懸浮芯片技術,具有操作簡單、靈敏快速和成本低廉等優點,為多種獸藥殘留的快速檢測提供了新方法。
【關鍵詞】 懸浮芯片, 酶聯免疫吸附法, 殘留, 微球, 中位熒光強度值
Abstract A novel suspension array technology was established for the detection of three kinds of veterinary drug residues: chloramphenicol, clenbuterol and 17βestradiol. The three conjugates in which veterinary drugs coupled with BSA were immobilized on the solid carrier of the suspension microarraypolystyrene fluorescent microspheres/beads as detective probes. Indirect competitive technology was employed. Competitive reactions between the veterinary drugs in the aqueous phase and the veterinary drugsBSA conjugates on the beads for coupling with their complimentary specific biotinylated monoclonal antibodies were carried out. And then, straptavidinphycoerythrin was added for coupling and the fluorescent signals were captured. Afterwards the detective standard curves were plotted. The regular ELISA standard curves of the three veterinary drugs were also plotted. Comparison between suspension array and regular enzymelinked immunosorbent assay(ELISA) was in the respects of the detective technology, the detection limits, the detective ranges, the samples detection and the multianalysis. Suspension array technology is distinct advantageous except for specificity. There was well consistent performance between the two methods. The highthroughput suspension array provides a novel method for multianalysis of veterinary drugs with simple operation, sensitive, rapid and low costing.
Keywords Suspension microarray, Enzymelinked immunosorbent assay, residue, microspheres beads, median fluorescent intensity
1 引 言
近年來,食品安全已成為社會共同關注的公共衛生問題,而獸藥殘留成為食品安全監管的重要問題。獸藥殘留如克倫特羅 (clenbuterol, CL)、氯霉素(chloramphenicol, CAP)和雌二醇 (17βestradiol, E2)的濫用和食用可導致多種健康損害[1~6]。加強獸藥殘留檢測分析是監管和控制獸藥殘留的重要手段。因此,簡單、快速和靈敏的微痕量檢測技術的研究和創新尤為重要。目前,酶聯免疫吸附測定法(enzymelinked immunosorbent assay, ELISA)[7,8]是獸藥殘留的主要檢測方法之一具有簡單、快速、靈敏度高和特異性強等諸多優點[9]。懸浮芯片技術是一種多功能的液相芯片分析平臺,既具有固態片膜芯片的高通量特性,又具有操作簡便、重復性好、靈敏度高等優點。目前,對該技術的研究多集中于大分子蛋白質和核酸的檢測[10~12],并未見應用懸浮芯片同時檢測多種獸藥CAP、CL和E2的報道。本研究采用懸浮芯片法和常規ELISA法對3種獸藥進行同時檢測,并在靈敏度、特異性、檢出限等方面進行比較。
2 實驗部分
2.1 儀器和試劑
BioPlex懸浮系統,Model 680型酶標儀(美國BioRad公司);MALDITOFMS REFLEXⅢ型質譜儀(德國Bruker公司),DU530型紫外可見分光光度計 (美國Beckman公司);6930型冷凍離心機(日本Kubota公司);MS3型旋渦混勻器(德國IKA公司),YM10過濾柱 (孔徑1.2 μm,美國Millipore公司),Costar96孔酶標板 (美國Corning公司); 日立S4500型掃描電鏡 (日本Hitachi公司)。
3種不同編碼的熒光微球(beads,Φ=5.6 μm)和蛋白氨基偶聯試劑盒(包括激活緩沖液和儲備緩沖液)購自美國BioRad公司;CAP單克隆抗體和E2單克隆抗體(美國Biodesign公司);CL單克隆抗體 (英國Abcam公司);3種單抗的生物素化由本實驗室完成;CAP、CL、E2、EDC、SulfoNHS、沙丁胺醇、萊克多巴胺、N,N二甲基甲酰胺 (DMF)、鄰苯二胺(OPD)和E2BSA結合物(美國Sigma公司);鏈霉親和素藻紅蛋白(Straptavidinphycoerythrin, SAPE,美國Invitrogen公司);BSA(德國Roche公司); CAPBSA和CLBSA為本實驗室合成。其它試劑均為國產分析純。
2.2 實驗方法
2.2.1 懸浮芯片檢測微球的制備
參照試劑盒說明書,取3種熒光微球 (1.25×107 個/mL),磷酸鹽緩沖液 (PBS) 重懸后,加入到激活緩沖液中,并立即加入新鮮配制的偶聯試劑EDC和SulfoNHS(濃度均為50 g/L),室溫下攪拌20 min使其活化;活化后,分別加入3種獸藥的BSA結合物5 μg,并用PBS緩沖液(pH 7.4)定容至500 μL,室溫下中速旋渦振蕩混勻2 h,14000 g離心4 min,棄去上清液,封閉,清洗,加入儲備緩沖液, 4 ℃儲存。上機進行偶聯確證,以便用于下一步測試。
2.2.2 3種獸藥的懸浮芯片多元分析標準曲線的測定
實驗采用間接競爭法,在96孔反應板的每個反應孔中分別加入優化后的3種靶標物對應的生物素化單抗5、1和16 ng,分別將CAP、CL和E2的標準品(以下涉及到3種獸藥均按此順序)按照5×、5×和3×梯度分別稀釋成7個梯度加入。將3種熒光微球等比例混合,每孔加入3種熒光微球各2000個,并用PBS補足至50 μL/孔,同時再各準備一個不加標準品的陽性對照孔。37 ℃中速漩渦振蕩2 h,使熒光微球上的獸藥BSA結合物與溶液中相應的標準品共同競爭生物素化的單抗,然后加入1∶100的SAPE 50 mL/孔,37 ℃中速振蕩反應30 min。懸浮芯片讀取每孔100個熒光微球,獲得中位熒光強度值(MFI)。以各種靶標標準品的濃度為X軸,以檢測得到的MFIs為Y軸,繪制3種獸藥小分子的懸浮芯片檢測標準曲線。
2.2.3 3種獸藥的常規ELISA標準曲線的測定
采用間接競爭法[13~15],在酶標板上包被小分子獸藥的BSA結合物,以方陣滴定法篩選和優化3種獸藥常規ELISA的包被原量(分別是2、0.2和0.25 μg)和單抗工作濃度 (稀釋度分別為1∶80000、1∶20000和1∶80000),確定反應條件后,選擇3種獸藥標準品的濃度,繪制各自的標準曲線。
2.2.4 兩種方法對3種獸藥殘留的特異性測試
準備3組沙丁胺醇、萊克多巴胺、慶大霉素和紅霉素測試品,終濃度達到50、 1250和31250 ng/L,每個濃度平行做3個樣,同時準備一個陽性對照樣,懸浮芯片讀數并與陽性對照樣比較。以交叉反應率(CR%)測試常規ELISA檢測的特異性。
2.2.5 3種獸藥盲樣的檢測比較
準備3個濃度的3種獸藥盲樣,交由測試者進行檢測,每個盲樣平行測試3次。根據得到的標準曲線計算盲樣的濃度,并與實際濃度進行比對。
3 結果與討論
3.1 懸浮芯片法對3種獸藥檢測標準曲線的測定
按優化的比例加入相應的抗體和SAPE,使反應充分進行,可省去真正的懸浮芯片反應所需的抽濾步驟。因此,檢測更加簡單快速。在優化條件下,繪制標準曲線方程(見圖1和表1)。
由于每次檢測取100個熒光微球,每個熒光微球都有1個獨立的檢測值,也即每個樣品 (包括標準品)被重復測試了100次,樣本量有足夠的代表性。由于E2難溶于水,加入少量DMF可增加其溶解度,實驗發現,抗體活性并未受影響。CAP、CL和E2懸浮芯片的檢測區間分別為50~6.25×105 ng/L, 56~7.81×105 ng/L和1×103~7.29×105 ng/L; 它們的檢出限分別為50、56和1000 ng/L,檢測范圍跨2~4個數量級。在這些范圍內,可對這3種獸藥同時進行快速的定量測定,全部檢測過程只需約2.5 h。檢測標準曲線的這些指標和熒光微球上的抗原結合物的偶聯量、抗體的親和力、單抗的生物素化程度都有密切關系。
3.2 ELISA法對3種獸藥檢測標準曲線的測定
按照棋盤滴定所獲得的最佳抗原結合物包被量和最適抗體稀釋度,對CAP、CL和E2殘留進行標準曲線的測定和繪制,結果如圖2所示。標準曲線方程、檢出限和檢測區間等各參數見表1。比較懸浮芯片法和常規ELISA法可見:在 CAP的檢測中,常規ELISA法的檢測區間略比懸浮芯片法稍寬,但不存在絕對的優勢;而在CL和E2的檢測中,懸浮芯片法的檢出限明顯低于常規ELISA法,檢測區間比ELISA法寬,這在實際檢測中占有較大優勢。懸浮芯片法主要應用于多元靶標物的分析檢測,而常規ELISA每次只能檢測一個目標物,在多元分析中處于劣勢。表1 懸浮芯片法和ELISA法檢測3種獸藥殘留的比較(略)
3.3 懸浮芯片法和常規ELISA法在檢測技術上的比較
懸浮芯片法使用的檢測原理同常規ELISA法一樣,同為間接競爭法,所用試劑略有不同。但在檢測的靈敏度和檢測區間上懸浮芯片法明顯優于常規ELISA法。兩種方法存在性能差異的主要原因如下:
(1)懸浮芯片抗原以化學鍵進行偶聯,而ELISA法利用一種物理性的非特異性吸附,其連接的牢固程度和穩定性比懸浮芯片的抗原偶聯方式差很多。(2)懸浮芯片激光檢測器的分辨率明顯高于ELISA法采用的普通酶標儀,檢測更加靈敏。(3)懸浮芯片技術使用主要試劑是生物素親和素,其親和力高達1015L/mol[16,17],比抗體親和力高10000倍以上。懸浮芯片技術信號放大更靈敏,更穩定,受環境干擾較小。(4)懸浮芯片的抗原抗體反應在液相中進行,有效地保證了試劑的活性;而且檢測微球的比表面積遠大于酶標板的底部,使反應更加充分;而ELISA法反應在固相中進行。(5)懸浮芯片的標準曲線是多元參數的Logistic回歸曲線,檢測范圍寬;而常規ELISA法多用直線方程,使用曲線方程在一定程度上可增加其檢測范圍。
3.4 兩種方法檢測的特異性測定
由表2可知,不同濃度下的沙丁胺醇萊克多巴胺的MFI和陰性對照組無顯著性差異,P>0.05;加入不同濃度慶大霉素和紅霉素對檢測無明顯干擾,P>0.05。因此,懸浮芯片檢測的特異性良好,與其它藥物無明顯交叉反應。同時,用ELISA對表2中藥物的CR進行測定,CR均
3. 5 盲樣的測定
測試結果和實際濃度值的比對見表3。由表3可見,懸浮芯片檢測濃度值與實際濃度偏差為8.09%~17.03%,可認為偏差相對較小。由于多種靶標物盲樣的濃度低于ELISA的檢出限,并未能對其進行檢測。在其檢測區間內,ELISA與實際濃度偏差為9.19%~17.74%,偏差也相對較小。懸浮芯片法對盲樣測定的檢測區間較寬,與ELISA法相比,有較大的優勢。
表3 3種獸藥殘留盲樣的檢測(略)
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