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楊梅的功效范文第1篇

一、推行“二五八”教師成長(zhǎng)計(jì)劃，打造“良師”發(fā)展共同體

教育家陶行知說(shuō)過(guò)：“要有好的學(xué)校，先要有好的教師。”沒(méi)有志同道合、共求發(fā)展的教師團(tuán)隊(duì)，再好的學(xué)校改革構(gòu)想也很難實(shí)現(xiàn)，構(gòu)建學(xué)校美育共同體也將成為一句空話。因此，要高度重視“好的教師”共同體的培養(yǎng)。

我們大力推行“二五八”教師成長(zhǎng)計(jì)劃：新教師二年內(nèi)站穩(wěn)講臺(tái)，五年形成自己的教學(xué)風(fēng)格，八年成為本縣區(qū)名優(yōu)教師。在實(shí)施結(jié)對(duì)幫帶、請(qǐng)進(jìn)走出、課題牽動(dòng)的校本培訓(xùn)中，打造教師共同交流、共同成長(zhǎng)的平臺(tái)，著力于提升教師的自我認(rèn)同，引導(dǎo)教師將學(xué)生視為審美對(duì)象，以審美的角度去關(guān)注學(xué)生在德育上的表現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)教師的自我德育、自我美育。

如果只是利用行政命令、剛性制度，教師成長(zhǎng)共同體就會(huì)缺乏生命力，就會(huì)流于形式。因此，在制度管理的同時(shí)，要重視“柔性管理”，引導(dǎo)教師主動(dòng)自覺(jué)地追求成長(zhǎng)。可抓好“三個(gè)利用”：一是利用閱讀。閱讀，是教師提升審美力的最佳途徑。定期為教師訂閱好書(shū)好電影（如書(shū)籍《教學(xué)勇氣》、《愛(ài)心與教育》等，電影《死亡詩(shī)社》等），并讓教師做點(diǎn)讀書(shū)筆記。創(chuàng)建學(xué)校讀書(shū)會(huì)、讀書(shū)俱樂(lè)部，學(xué)校無(wú)償提供好書(shū)，吸引讀書(shū)愛(ài)好者加入，并逐步以點(diǎn)帶面，擴(kuò)大影響。二是利用網(wǎng)絡(luò)。建立教師共同體QQ群、微信群，推薦優(yōu)秀的教育網(wǎng)站、論壇，充分利用網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行日常的共同閱讀與交流。三是利用榜樣。領(lǐng)導(dǎo)班子以身作則，“首席教師”勇當(dāng)榜樣，學(xué)校加大宣傳力度，在物質(zhì)和非物質(zhì)等方面給予榜樣教師充分的激勵(lì)。

二、推廣“最美書(shū)香班級(jí)”建設(shè)，打造班級(jí)成長(zhǎng)共同體

書(shū)香，是一所優(yōu)秀的學(xué)校最重要的特質(zhì)。最美的學(xué)校，理應(yīng)最有書(shū)香。書(shū)香，本身就是一種美。書(shū)香美，最能養(yǎng)德。一個(gè)缺乏書(shū)香的校園，不可能形成一個(gè)完整的、有強(qiáng)大德育功能的美育共同體。因此，書(shū)香校園的建設(shè)，是構(gòu)建學(xué)校美育共同體的“基礎(chǔ)工程”。而開(kāi)展“最美書(shū)香班級(jí)”大評(píng)選，則是建設(shè)書(shū)香校園的有力舉措。

創(chuàng)建“最美書(shū)香班級(jí)”需要學(xué)校營(yíng)造大的書(shū)香氛圍，需要學(xué)校舉辦大的讀書(shū)活動(dòng)。學(xué)校重視校園讀書(shū)環(huán)境的布置，讓文學(xué)名著、經(jīng)典名曲、世界名畫(huà)等美好的事物裝點(diǎn)校園。同時(shí)，組建各種讀書(shū)俱樂(lè)部，開(kāi)展“校園閱讀之星”、“我最喜愛(ài)的十本書(shū)”等評(píng)選活動(dòng)，努力讓師生處在一個(gè)書(shū)香濃濃的環(huán)境中。在書(shū)香醉人的大環(huán)境中，“最美書(shū)香班級(jí)”的大評(píng)選就可以啟動(dòng)了。

我們?cè)u(píng)選“最美書(shū)香班級(jí)”，主要看幾點(diǎn)：一看教室環(huán)境與氛圍；二看班級(jí)圖書(shū)角建設(shè)；三看班級(jí)共讀共寫(xiě)活動(dòng)的豐富度；四看班級(jí)書(shū)香展示成果（或其他美育成果）。

“最美書(shū)香班級(jí)”是非唯一且可流動(dòng)的。推選“最美書(shū)香班級(jí)”不是為了分出優(yōu)劣，而是為了尋找并展示榜樣。推選的最終目的，是推廣。推廣“最美書(shū)香班級(jí)”建設(shè)，最終使得學(xué)校的任一班級(jí)都成為“書(shū)香班級(jí)”。

三、推動(dòng)學(xué)生藝術(shù)社團(tuán)建設(shè)，打造“藝友”交流共同體

藝術(shù)教育是美育的重要組成部分，同時(shí)也是“以美養(yǎng)德”理念的重要體現(xiàn)。學(xué)校成立藝教領(lǐng)導(dǎo)小組，校長(zhǎng)親自掛帥，教務(wù)處專人負(fù)責(zé)，促進(jìn)藝術(shù)教育制度化、規(guī)范化發(fā)展。同時(shí)，從師資、時(shí)間、場(chǎng)地以及獎(jiǎng)勵(lì)等方面入手，推動(dòng)學(xué)生藝術(shù)社團(tuán)（興趣小組、俱樂(lè)部等）的建設(shè)，開(kāi)設(shè)各種適合學(xué)生的藝術(shù)項(xiàng)目，如文學(xué)、合唱、聲樂(lè)、舞蹈、書(shū)畫(huà)、攝影等，讓每個(gè)學(xué)生至少參加一個(gè)藝術(shù)社團(tuán)，擁有一項(xiàng)藝術(shù)特長(zhǎng)。

四、推進(jìn)藝術(shù)活動(dòng)全覆蓋，打造綜藝活動(dòng)美育共同體

楊梅的功效范文第2篇

一、采用靈活多變的教學(xué)方法，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維

采用靈活多變的教學(xué)方法對(duì)于培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維可謂事半功倍。對(duì)于學(xué)生來(lái)說(shuō)，學(xué)生的注意力很難長(zhǎng)時(shí)間集中，因此，無(wú)聊和乏味的教學(xué)方法會(huì)讓學(xué)生產(chǎn)生厭倦情緒，對(duì)發(fā)展學(xué)生的創(chuàng)造性思維更難。教師在課堂上組織學(xué)生通過(guò)小組合作研究的游戲，可以使學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性得到充分的激發(fā)，也可以通過(guò)講故事、說(shuō)創(chuàng)意的形式，提高學(xué)生的創(chuàng)新能力。

二、構(gòu)建民主的課堂氣氛，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性

教師在進(jìn)行美術(shù)手工教學(xué)的過(guò)程中，應(yīng)該注意構(gòu)建和諧的師生關(guān)系，讓師生之間平等地對(duì)話、交流，這樣學(xué)生才會(huì)在課堂上更加積極參與教師的課堂教學(xué)，才能對(duì)于美術(shù)手工教學(xué)產(chǎn)生興趣，在不斷的學(xué)習(xí)和實(shí)踐操作中體會(huì)到美術(shù)手工的無(wú)限奧妙，學(xué)生的創(chuàng)造力才會(huì)在不知不覺(jué)中得到提高。

三、關(guān)注學(xué)生，針對(duì)學(xué)生的特點(diǎn)因材施教

楊梅的功效范文第3篇

關(guān)鍵詞：高校思想政治工作者 人格魅力大學(xué)生

二十一世紀(jì)，人格教育已成為世界教育的主流，人們的教育觀念發(fā)生著深刻的變革。高校思想政治工作者是高校教師隊(duì)伍的重要組成部分，是高校從事德育教育工作、承擔(dān)著對(duì)大學(xué)生的思想政治教育和管理工作的中堅(jiān)力量。在改革開(kāi)放和建設(shè)社會(huì)主義和諧社會(huì)的新形勢(shì)下，作為教育者，特別是高等學(xué)校的思想政治工作者，在實(shí)施教育的過(guò)程中，其人格將以特殊的魅力潛移默化地影響和作用于每一個(gè)學(xué)生，在大學(xué)生人格塑造中的地位更為突出，故加強(qiáng)高校教師自身人格修養(yǎng)也成為當(dāng)務(wù)之急。正如前蘇聯(lián)教育學(xué)家烏申斯基曾說(shuō)過(guò)：“在教育中一切以教育者的人格為基礎(chǔ)，因?yàn)橹挥腥烁癫拍苡绊懭烁瘢挥行愿癫拍苄纬尚愿瘛！?【l】本文中的高校思想政治工作者特指在高校中從事思想政治教學(xué)和管理工作的人員（德育教師和輔導(dǎo)員），這里著重探討他們這一群體的人格魅力培養(yǎng)。

一、高校思想政治工作者的人格魅力

教師的靈魂是師德，而師德的魅力主要從人格特征中表現(xiàn)出來(lái)。人們常說(shuō)的“人格力量”，就是指人的內(nèi)在精神因素在實(shí)踐中產(chǎn)生的效應(yīng)，它是一種非權(quán)力的影響力、號(hào)召力，它對(duì)人的影響和激勵(lì)作用，比那種帶有強(qiáng)制性并由傳統(tǒng)、職位、資歷等因素構(gòu)成的外加力而使人產(chǎn)生的敬畏來(lái)得長(zhǎng)久。

人格魅力是一個(gè)人在能力、氣質(zhì)、性格等人格特性方面所具有的吸引力，它是非權(quán)力影響力，也是一個(gè)人素質(zhì)的綜合表現(xiàn)。所謂高校思想政治工作者的人格魅力則是指高校思想政治工作者在學(xué)習(xí)、工作和生活實(shí)踐中積累起來(lái)的、在品德、學(xué)識(shí)、個(gè)性等方面對(duì)學(xué)生所具有的一種綜合影響力。

二、高校思想政治工作者人格魅力的重要意義

作為一個(gè)人類(lèi)靈魂的工程師，必須具有高尚的人格，它直接或間接地影響著教師的教育教學(xué)活動(dòng)，它會(huì)通過(guò)各種途徑、方式滲透、融合到教學(xué)活動(dòng)過(guò)程中去，影響著教學(xué)的效果、質(zhì)量。從這個(gè)意義上來(lái)說(shuō)，人格就是教師的一切。

當(dāng)今的大學(xué)生思想活躍，個(gè)性鮮明，具有比較強(qiáng)的心理獨(dú)立性。因此，在大學(xué)生成長(zhǎng)過(guò)程中人格的形成難免會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題。高校思想政治工作者是大學(xué)生思想政治教育工作的組織者、指導(dǎo)者和具體實(shí)施者，對(duì)大學(xué)生世界觀、人生觀、價(jià)值觀的影響，綜合素質(zhì)的培養(yǎng)和良好習(xí)慣的養(yǎng)成都起著至關(guān)重要的作用。

三、高校思想政治工作者人格魅力培養(yǎng)的途徑

實(shí)踐證明，不少學(xué)生是在高校思想政治工作者言傳身教和身體力行下形成理想人格的。俄國(guó)哲學(xué)家車(chē)爾尼雪夫斯基說(shuō)：“教師把學(xué)生造成一種什么人，自己就應(yīng)當(dāng)是什么人”。【3】高校思想政治工作者要用正確的言行引導(dǎo)學(xué)生，做大學(xué)生健康成長(zhǎng)的指導(dǎo)者和引路人，成為學(xué)生完美人格的塑造者。高校思想政治工作者要準(zhǔn)確把握和正確展示自己的人格力量，但是人格魅力并不是自動(dòng)形成的，而是在一定的環(huán)境下，通過(guò)高校思想政治工作者自身的努力和師生間的互動(dòng)來(lái)完成。

1．樹(shù)立牢固的敬業(yè)思想

忠誠(chéng)于人民的教育事業(yè)是教育者對(duì)待人生的根本出發(fā)點(diǎn)，是做好工作的基本動(dòng)力，也是高校思想政治工作者人格魅力的力量之源。高校思想政治工作者要有強(qiáng)烈的責(zé)任心，在工作中不斷地研究學(xué)生身心發(fā)展規(guī)律，積極探索學(xué)生工作的有效途徑，認(rèn)真對(duì)待學(xué)生的每一件事。【4】要有高度的奉獻(xiàn)精神，學(xué)生工作千頭萬(wàn)緒，各種學(xué)生事務(wù)的處理又常常在正常工作之余，只有具有高度奉獻(xiàn)精神的高校思想政治工作者，才能毫無(wú)怨言、廢寢忘食地投入學(xué)生工作，去關(guān)心、愛(ài)護(hù)、理解和教育他們，從而建立一種深厚的師生感情，在實(shí)踐中培養(yǎng)和展現(xiàn)自己良好的人格魅力。

2．提高自身修養(yǎng)

高校思想政治工作者在學(xué)生素質(zhì)教育中發(fā)揮著重要作用，但如果高校思想政治工作者不注重自身修養(yǎng)的提高，那么，他就很難發(fā)揮應(yīng)有的作用，甚至?xí)m得其反。如果我們?nèi)砸宰陨磉^(guò)去受教育時(shí)的觀點(diǎn)和眼光去面對(duì)現(xiàn)在的學(xué)生教育管理工作，就跟不上時(shí)代的需求。加快高校思想政治工作者自身素質(zhì)修養(yǎng)的提高和完善，是素質(zhì)教育的要求，更是時(shí)展的需要。

原蘇聯(lián)教育家蘇霍姆林斯基曾說(shuō)過(guò)：“理想、原則、信念、興致、趣味、好惡、倫理、道德等方面的準(zhǔn)則在教師的言行上取得和諧、一致，這就是吸引青少年心靈中的火花，成為青少年行動(dòng)的燈塔。”【5】教育的實(shí)踐證明，高校思想政治工作者人格力量作用的發(fā)揮，更多地體現(xiàn)在高校思想政治工作者必須要樹(shù)立師表形象，建立師德風(fēng)范，以靈魂塑造靈魂，正所謂：“學(xué)高為師，德高為范”，“其身正，不令而行”。

3．加強(qiáng)業(yè)務(wù)理論學(xué)習(xí)

思想政治工作是一項(xiàng)復(fù)雜而系統(tǒng)的工程，要求高校思想政治工作者必須具備較高的文化知識(shí)素質(zhì)。知識(shí)是智慧和力量的象征，有了淵博全面的知識(shí)，就會(huì)產(chǎn)生一種吸引力。著名教育學(xué)家贊可夫說(shuō)過(guò)，“擴(kuò)充教師的科學(xué)知識(shí)量，幾乎成了提高學(xué)生知識(shí)量和提高教師在學(xué)生心目中的威信的最重要的條件”。這告訴我們，高校思想政治工作者專業(yè)造詣深，治學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，博學(xué)多才，是使自己形象閃光的重要源泉。

高校思想政治工作者在學(xué)生的日常管理和教育中，如果總是重復(fù)那么幾句話，學(xué)生就會(huì)厭煩，只有話題常新，道理漸深，讓學(xué)生感到和你在一起能長(zhǎng)見(jiàn)識(shí)、釋疑難、排憂愁，學(xué)生才會(huì)心悅誠(chéng)服地聆聽(tīng)你的教誨。因而，高校思想政治工作者必須最大范圍地汲取哲學(xué)、心理學(xué)、美學(xué)、社會(huì)學(xué)、軍事、法律、歷史等方面的知識(shí)。同時(shí)，由于學(xué)生尚處于學(xué)習(xí)階段，很多生活常識(shí)還不具備，高校思想政治工作者還應(yīng)該具有生活常識(shí)和經(jīng)驗(yàn)的先知性。【6】只有這樣，才能增強(qiáng)思想政治工作的感染力，拉近與學(xué)生之間的距離，樹(shù)立良好的人格魅力形象。

高校思想政治工作者必須加強(qiáng)自身業(yè)務(wù)知識(shí)的學(xué)習(xí)，切實(shí)做到自身的“專”與“博”、想與做的完美統(tǒng)一，真正成為學(xué)生的領(lǐng)路人。知識(shí)的專、精、博，是一個(gè)人人格魅力的重要組成部分。學(xué)習(xí)本崗位的專業(yè)知識(shí)是做好大學(xué)生教育和管理工作的需要，也是做好本職工作的一個(gè)重要前提。因此，高校思想政治工作者首先必須加強(qiáng)學(xué)習(xí)與本職工作相關(guān)的業(yè)務(wù)知識(shí)，如政治、經(jīng)濟(jì)、文化、管理、科技、人才市場(chǎng)、就業(yè)指導(dǎo)等方面的專業(yè)知識(shí)，并且要把這些方面的學(xué)習(xí)同加深領(lǐng)會(huì)和靈活運(yùn)用理論緊密結(jié)合起來(lái)。其次還要學(xué)習(xí)與自己業(yè)務(wù)有關(guān)的其他方面的文化知識(shí)，如一切反映當(dāng)今世界文明進(jìn)步的新知識(shí)、新經(jīng)驗(yàn)、新做法，做到“專”與“博”相結(jié)合，求知與修身共提高，使知識(shí)結(jié)構(gòu)更加合理，個(gè)人素質(zhì)得到提高。要做到既向書(shū)本學(xué)習(xí)，又向?qū)嵺`學(xué)習(xí)；要帶著問(wèn)題學(xué)，不斷把學(xué)習(xí)到的新知識(shí)運(yùn)用到學(xué)生工作的實(shí)踐。在實(shí)踐中做到前瞻性、針對(duì)性和實(shí)效性相結(jié)合，不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，用實(shí)踐來(lái)檢驗(yàn)和提高學(xué)習(xí)的成效，做學(xué)習(xí)型、知識(shí)型、創(chuàng)新型、效果型相統(tǒng)一的名副其實(shí)的輔導(dǎo)員。這樣高校思想政治工作者才能高屋建瓴，帶領(lǐng)著廣大學(xué)生一道成長(zhǎng)、成才。

4．提升解決實(shí)際問(wèn)題的能力

知識(shí)只有轉(zhuǎn)化為能力才有力量，這也是教師與學(xué)生的主要區(qū)別所在。從某種意義上講，高校思想政治工作者的工作能力要比擁有知識(shí)更重要，他們教育學(xué)生主要是靠一件件事情、一項(xiàng)項(xiàng)工作處理得當(dāng)來(lái)完成的，處理的能力和過(guò)程中的藝術(shù)水平，是構(gòu)成高校思想政治工作者人格魅力的主要內(nèi)容。因此，高校思想政治工作者在繁忙的工作中應(yīng)注重自己能力的鍛煉，善于調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性，善于抓住主要矛盾，在繁雜的工作面前，區(qū)分輕重緩急，鍛煉組織協(xié)調(diào)能力；善于接觸觀察，調(diào)查研究，在摸請(qǐng)問(wèn)題和正確分析的基礎(chǔ)上，處理果斷，鍛煉分析解決問(wèn)題的能力；善于用文字和語(yǔ)言來(lái)宣傳自己的主張，鍛煉文字及語(yǔ)言表達(dá)能力；還要善于占領(lǐng)主陣地，特別是在當(dāng)今網(wǎng)絡(luò)發(fā)達(dá)、信息渠道多元化的時(shí)代，要注意運(yùn)用信息，培養(yǎng)工作中的創(chuàng)新能力，這對(duì)培養(yǎng)高校思想政治工作者自身的人格魅力會(huì)起到很好的作用。

求真務(wù)實(shí)，做學(xué)生自我養(yǎng)成教育的親歷者，力求做到“三深入、三求實(shí)、三貼近”。深入實(shí)際、深入學(xué)生、深入宿舍，進(jìn)行深入細(xì)致的調(diào)查研究，獲取翔實(shí)、豐富、鮮活的一手學(xué)生自我養(yǎng)成教育的材料，為真正實(shí)現(xiàn)學(xué)生自我養(yǎng)成教育提供強(qiáng)大的思想動(dòng)力和智力支持；在與學(xué)生溝通交流時(shí)要堅(jiān)持不懈地做到說(shuō)實(shí)話、辦實(shí)事、求實(shí)效。要始終堅(jiān)持不懼風(fēng)險(xiǎn)、不怕困難、敢于勝利的精神，千方百計(jì)想辦法，克服困難，幫助學(xué)生解決一些在學(xué)習(xí)、生活、就業(yè)等方面的實(shí)際問(wèn)題和實(shí)際困難，要相信學(xué)生、依靠學(xué)生，為學(xué)生營(yíng)造健康快樂(lè)、積極自主的自我養(yǎng)成教育的好環(huán)境。

5．尊重學(xué)生的人格

希望別人尊重自己是人們的普遍心理。在學(xué)生的教育管理中，以學(xué)生為本，主動(dòng)積極地成為學(xué)生的良師益友，做學(xué)生思想靈魂的工程師。首先，要平等地對(duì)待每一個(gè)學(xué)生，“公正，這是孩子信賴教師的基礎(chǔ)。”陶行知先生曾大聲疾呼：“你的教鞭下有瓦特，你的冷眼里有牛頓，你的譏笑中有愛(ài)迪生。”【7】高校思想政治工作者不應(yīng)以學(xué)習(xí)成績(jī)的好壞與家庭背景的不同而高看或歧視某些學(xué)生，要把目光投向每一個(gè)學(xué)生，讓更多的學(xué)生從中感受到殷切的期望，體驗(yàn)成功的喜悅，獲得向上的動(dòng)力。其次，高校思想政治工作者要把自己置于與學(xué)生平等的地位上，把學(xué)生看成對(duì)等的個(gè)體，尊重他們的人格和創(chuàng)造精神，建立一種良好的、融洽的師生關(guān)系，在尊重學(xué)生的同時(shí)，也贏得了學(xué)生對(duì)自己的尊重，豐富了自己的人格魅力。

總之，高校思想政治工作者是學(xué)校素質(zhì)教育工程的重要力量，其工作本身就是用自身人格去培養(yǎng)和塑造學(xué)生的過(guò)程。為了適應(yīng)未來(lái)社會(huì)對(duì)人才素質(zhì)的要求，高校思想政治工作者應(yīng)該把握時(shí)代賦予的使命，充分地利用自身的人格魅力，培養(yǎng)現(xiàn)代化社會(huì)需要的高素質(zhì)人才。

參考文獻(xiàn)：

【1】(俄)烏申斯基．人是教育的對(duì)象【M】．北京：人民教育出版社，1989：24．

【2】(俄)車(chē)爾尼雪夫斯基．生活與美學(xué)【M】．北京：人民文學(xué)出版社，1957：152．

【3】丁建勇．淺談教師的人格魅力叨．中國(guó)石油大學(xué)勝利學(xué)院學(xué)報(bào)，2006(2)：14．

【4】(俄)蘇霍姆林斯基．關(guān)于全面發(fā)展教育的問(wèn)題【M】．長(zhǎng)沙：湖南教育出版社，1984：37．

【5】陳立民．高校輔導(dǎo)員的理論與實(shí)務(wù)【M】．北京：中國(guó)言實(shí)出版社，2006：39．

楊梅的功效范文第4篇

【關(guān)鍵詞】 谷氨酸脫氫酶；過(guò)氧亞硝酸；酪氨酸硝基化修飾；別構(gòu)調(diào)節(jié)

0引言

谷氨酸脫氫酶（glutamate dehydrogenase，GDH）催化L谷氨酸與α酮戊二酸相互轉(zhuǎn)化，是聯(lián)系氨基酸和糖代謝的樞紐. GDH在細(xì)胞內(nèi)可能會(huì)發(fā)生酪氨酸硝基化修飾［1］，但該修飾對(duì)酶催化功能的影響尚少見(jiàn)報(bào)道. 鑒于體內(nèi)蛋白硝基化主要通過(guò)過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitrite， ONOO-)介導(dǎo)［2］，同時(shí)GDH催化功能被別構(gòu)激活劑二磷酸腺苷(adenosine 5′diphosphate， ADP)和抑制劑三磷酸鳥(niǎo)苷（guanosine 5′triphosphate， GTP）調(diào)節(jié)［3］，本研究觀察ONOO-對(duì)GDH催化活性和別構(gòu)調(diào)節(jié)的影響.

1材料和方法

1.1材料牛肝臟GDH純酶（Type I， ammonium sulfate suspension， ≥40 units/mg protein），還原型輔酶I（βNADH），α酮戊二酸，脂多糖(from Escherichia coli 055:B5) (美國(guó)Sigma公司)；抗硝基化蛋白mAb(antinitrotyrosine， antiNT，美國(guó)Cayman Chemical公司)；硫酸銨，ADP，GTP(美國(guó)Amresco公司)；SmartSpec 3000型分光光度計(jì)(美國(guó)Biorad公司).

1.2方法

1.2.1ONOO-合成與定量硝酸化的雙氧水與亞硝酸鈉，以三通管迅速推入氫氧化鈉溶液，得黃色產(chǎn)物，以消光系數(shù)1.670 (mmol/L)-1 ·cm-1定量［4］.

1.2.2GDH與ONOO-反應(yīng)GDH透析除去硫酸銨，蛋白濃度調(diào)整為0.2 mg/mL，取300 μL置于1.5 mL離心管，另取1 μL ONOO-置于離心管內(nèi)壁，使反應(yīng)體系中ONOO-的終濃度為0，4，12，36，108和324 μmol/L，快速震蕩10 s，加入300 μL緩沖液終止反應(yīng)，立即進(jìn)行酶活性測(cè)定和硝基化修飾檢測(cè).

1.2.3GDH催化活性測(cè)定按照參考文獻(xiàn)［5］的方法進(jìn)行測(cè)定，反應(yīng)體系為250 μL，包含50 mmol/L磷酸鈉緩沖液(pH 7.4)， 50 mmol/L硫酸銨， 160 μmol/L βNADH， 5 mmol/L α酮戊二酸和5 μL GDH酶溶液；記錄3 min內(nèi)340 nm吸光度改變量. 以βNADH的消光系數(shù)6.22 (mmol/L)-1·cm-1計(jì)算底物消耗速率，由公式［(A 340 nm/min)/6.22］×250 μL×10-3÷0.5 μg計(jì)算每1 μg GDH每分鐘轉(zhuǎn)換底物的速度，每分鐘轉(zhuǎn)換1 μmol底物定義為1單位，將單位值折算為比催化活性kat/kg.

1.2.4GDH別構(gòu)調(diào)節(jié)效應(yīng)測(cè)定為測(cè)定ADP的別構(gòu)激活效應(yīng)，在反應(yīng)體系中加入新鮮配置的ADP，使其終濃度為300 μmol/L，并以氫氧化鈉調(diào)整pH 8.0， 然后測(cè)定GDH催化活性；為測(cè)定GTP的別構(gòu)抑制效應(yīng)，在反應(yīng)體系中加入10 μmol/L GTP，然后測(cè)定GDH催化活性［5］.

1.2.5Western Blot檢測(cè)GDH硝基化修飾ONOO-處理后的GDH立即進(jìn)行SDSPAGE分離，每泳道上樣量為50 ng；其中一塊凝膠用于銀染以確保上樣量一致，另一塊凝膠進(jìn)行濕法轉(zhuǎn)膜，硝酸膜用50 g/L脫脂奶粉封閉1 h后，與antiNT（1∶5000）反應(yīng)過(guò)夜，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗（1∶10 000）進(jìn)行檢測(cè).

1.2.6脾臟蛋白對(duì)GDH修飾的影響按照參考文獻(xiàn)［6］的方法制備脾臟蛋白，雄性SD大鼠，腹腔注射脂多糖20 mg/kg，24 h后，取脾臟，以TrisHCl(pH 7.4)勻漿，105 000 g離心，1 h，保留上清得脾臟蛋白，其中含有較高濃度的“去硝基化酶”［6］. ONOO-處理后的GDH，蛋白濃度調(diào)整為0.01 mg/mL，與等體積的脾臟蛋白（6 mg/mL）室溫反應(yīng)2 h，取 50 μL與等體積的2×電泳上樣緩沖液混合，每泳道上樣20 μL，進(jìn)行Western Blot 檢測(cè)硝基化修飾的改變，同時(shí)取50 μL檢測(cè)催化活性. 作為對(duì)照，將脾臟蛋白煮沸5 min，以滅活“去硝基化酶”，進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn). 以上實(shí)驗(yàn)均重復(fù)6次.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：計(jì)量數(shù)據(jù)以x±s表示，以SPSS13.0軟件包進(jìn)行方差分析(ANOVA)，多重比較采用StudentNewmanKeuls檢驗(yàn)法.

2結(jié)果

2.1ONOO-對(duì)GDH催化活性和別構(gòu)調(diào)節(jié)的影響ONOO-在4~12 μmol/L時(shí)不影響GDH催化比活性，但在36~108 μmol/L時(shí)，可顯著抑制其催化比活性(P

表1ONOO-對(duì)GDH活性的影響及脾臟蛋白的逆轉(zhuǎn)作用（略）

bP

2.2ONOO-導(dǎo)致GDH發(fā)生硝基化修飾 0 μmol/L ONOO-處理的GDH與antiNT抗體不發(fā)生反應(yīng)（泳道1），而4～324 μmol/L ONOO-處理的GDH可被antiNT抗體識(shí)別，并且免疫反應(yīng)的信號(hào)強(qiáng)度隨ONOO-濃度增加而增大（泳道2~6，圖1）.

1： 0 μmol/L ONOO-； 2~6： 4，12，36，108，324 μmol/L ONOO-.

圖1Western Blot 法檢測(cè)ONOO-導(dǎo)致的GDH硝基化修飾（略）

2.3脾臟蛋白可部分逆轉(zhuǎn)ONOO-對(duì)GDH的硝基化修飾4~36 μmol/L ONOO-處理的GDH與antiNT抗體發(fā)生免疫反應(yīng)（泳道1，4，7），樣品經(jīng)脾臟蛋白處理后，免疫信號(hào)被部分逆轉(zhuǎn)（泳道2，5，8），而煮沸滅活的脾臟蛋白則不影響免疫反應(yīng)強(qiáng)度（泳道3，6，9）（圖2A）. 0 μmol/L ONOO-處理的GDH不與antiNT 反應(yīng)（泳道1），同時(shí)加入脾臟蛋白也不與antiNT反應(yīng)（泳道2和3），而108，324 μmol/L ONOO-處理的GDH與antiNT有明顯的反應(yīng)條帶（泳道4和7），脾臟蛋白（泳道5和8）不能逆轉(zhuǎn)這種反應(yīng)，煮沸的脾臟蛋白（泳道6和9）也沒(méi)有作用（圖2B）.

A： 1，4，7: 4，12，36 μmol/L ONOO-； 2，5，8: 4，12，36 μmol/L ONOO- +脾臟蛋白； 3，6，9: 4，12，36 μmol/L ONOO- +煮沸的脾臟蛋白. B： 1，4，7: 0，108，324 μmol/L ONOO-； 2，5，8: 0，108，324 μmol/L ONOO- +脾臟蛋白； 3，6，9: 0，108，324 μmol/L ONOO- +煮沸的脾臟蛋白.

圖2Western Blot 法檢測(cè)脾臟蛋白對(duì)ONOO-誘導(dǎo)GDH硝基化修飾的逆轉(zhuǎn)作用（略）

3討論

目前已有逾百種硝基化蛋白被鑒定［1］，但針對(duì)特定蛋白的功能調(diào)控尚知之甚少. 本研究首次報(bào)道，硝化劑ONOO-對(duì)GDH這一典型的別構(gòu)酶［7］具有功能調(diào)控作用.

本研究發(fā)現(xiàn)，ONOO-的作用與濃度密切相關(guān)： 低濃度（4~12 μmol/L ）ONOO-不影響GDH催化活性，但使GTP的別構(gòu)抑制作用顯著降低，從而可間接地使GDH的總催化活性升高；中等濃度（36~108 μmol/L）ONOO-，一方面可顯著抑制GDH催化活性，另一方面使GTP的別構(gòu)抑制作用降低，二者綜合的結(jié)果可使GDH總的催化活性或者升高，或者降低，或者不變；高濃度（324 μmol/L）ONOO-，可使GDH完全滅活，別構(gòu)調(diào)節(jié)作用也完全喪失. GDH這些功能改變與酪氨酸硝基化呈正相關(guān)．由此可以推測(cè)GDH硝基化可能是機(jī)體的一種感受機(jī)制，當(dāng)內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變導(dǎo)致ONOO-過(guò)量產(chǎn)生時(shí)，GDH通過(guò)硝基化的方式來(lái)調(diào)控其總催化活性（升高，降低，或者不變）；當(dāng)內(nèi)環(huán)境改變超出了機(jī)體的反饋能力后，GDH的硝基化則成為一種損傷機(jī)制（徹底滅活）.

硝基化一般導(dǎo)致蛋白功能喪失［2］. 但本研究發(fā)現(xiàn)，GDH硝基化可使其催化功能間接地升高，這與微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1（MGST1）的硝基化具有類(lèi)似之處［8］. 兩者不同之處在于，GDH在活性調(diào)控上比MGST1更具有靈活性：前者總的催化活性可升可降亦可不變，后者的催化活性只是升高；前者的修飾可被逆轉(zhuǎn)，后者修飾的逆轉(zhuǎn)性尚未確立；此外，MGST1被ONOO-修飾，還可形成蛋白二聚體和三聚體［8］，而本研究未發(fā)現(xiàn)GDH存在這些修飾.

值得指出，高濃度（324 μmol/L）ONOO-誘發(fā)的硝基化不能被“去硝基化酶”逆轉(zhuǎn)，提示ONOO-可能還導(dǎo)致GDH發(fā)生了其他修飾，例如羰基化等，引起酶構(gòu)象發(fā)生改變，從而不能被“去硝基化酶”識(shí)別．作者初步研究結(jié)果支持這一推測(cè)，我們發(fā)現(xiàn)，108~324 μmol/L ONOO-處理GDH樣品，可分別檢測(cè)到（0.89 ± 0.18）和（1.69 ± 0.16） nmol/mg羰基基團(tuán)，而0~36 μmol/L ONOO-處理的樣品檢測(cè)不到，提示高濃度ONOO-不僅導(dǎo)致硝基化，同時(shí)引起了羰基化修飾.

綜上所述，本研究表明ONOO-可通過(guò)酪氨酸硝基化調(diào)控GDH的催化功能.

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楊梅的功效范文第5篇

會(huì)。因?yàn)闂蠲匪乃嵝晕镔|(zhì)不易被氧化分解，一旦這些酸性物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)，就會(huì)和胃酸一起刺激胃黏膜。

在食用楊梅的時(shí)候，應(yīng)該盡量少吃一點(diǎn)，不要在一個(gè)時(shí)間段大量食用，這樣上火的幾率就會(huì)減小。楊梅富含維生素C、葡萄糖、果糖、檸檬酸等，酸甜味美。另外，楊梅含鉀豐富，對(duì)夏天大量出汗者可起到補(bǔ)鉀功效。同時(shí)，楊梅性溫?zé)帷⑽陡仕幔猩蛑箍省⒑臀赶场⒅雇轮沽〉裙πА?/p>

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