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望塵莫及范文第1篇

這樣一個潮濕又有些陰冷的下午，莫塵一個人在愛房間里無所事事。房間內很暗，莫塵喜歡這樣。房間的窗簾是拉上的，因為她不喜歡看看到窗外才潮濕和氤氳。那些潮濕會夾雜著些許落寞，悄悄從窗口爬進來，然后慢慢的漫延整個空間。莫塵會感覺窒息。空氣是潮濕的，心也變的潮濕。莫塵的心情會變的很糟糕，所以，她選擇拉上窗簾，在暗黑中，靜靜地待著。

電腦開著，孤獨地在角落里演繹著繁華，電腦旁的咖啡，還冒著熱氣，莫塵剛剛從網絡中出來。靜水告訴莫塵她要結婚了，她要過常人的日子，不再憂傷。不再做編輯。靜水說，即使沒有好的結局，我也要享受暫時的溫暖，因為我已經30歲了，30歲的女人，是要找個歸宿了。莫塵在屏幕前發了一會呆，靜水說了很多他們的事，莫塵只是回了一個笑臉，然后就下了線。莫塵的心，被什么刺痛了，非常的痛。

點燃一支煙，莫塵吐出一個很圓的煙圈，她覺得自己的姿態很優雅，與靜水相識，就是因為，她們是這樣的女人，咖啡，采訪，文字，香煙。靜水竟然愿意相信愛情了。可是莫塵的心依然冰冷，愛情，只不過是彼岸的花朵，看著很美，卻無法采摘。因為她有著孤獨的靈魂，和許多愛情留下的傷口。無法相信美好！

小時候，莫塵和奶奶一起生活在農村，莫塵最喜歡走長長的鐵路。固定的軌道，每一步都是同樣的距離。莫塵覺得那樣走不費勁，可以什么都不用想，只管走。到轉彎處，腳下的枕木會提示：向后望。莫塵每次只要看到，就會回頭望，雖然有時候自己知道，并沒有火車，可是她就是一直會回頭望。回頭的時候，就看見奶奶在路旁望著自己，奶奶總是不放心她一個人走。莫塵揮揮手，繼續往前走，再回頭望。

似乎已經成為一種定勢，這么多年的路，莫塵總是很固執地走自己的路，總是不停地回頭張望，記憶力的每個人，每件事，以至于有人說過的話，她都會記得很清楚。一個人的時候，她就默默地細數過往，那些美好和傷害，那些落拓和不羈，那些結束了卻未曾散去的愛情，當變的似乎模糊的時候，莫塵會固執地翻箱倒柜努力將他們變的清晰，看到傷口，莫塵會異常的滿足和清醒，就像蝙蝠一樣，莫塵是靠吸取黑暗和殘酷來生存的。

莫塵的身邊，一直有男人追隨，但她，一直是很冷的態度。她寧愿躲在咖啡館喝咖啡，上網。也不愿意和關心她到人在一起。他和林成分手之后，莫塵對男人已經沒有了感覺，不是不想愛，而是沒有能量，有時候，也想試著體驗一下溫暖的感覺，試著像個孩子一樣，在街上讓男人給她買冰糖葫蘆，然后在大街上毫無顧及的吃，但是，心依舊是冰涼的。莫塵會突然不說話了，然后再找個機會逃走了。

有一個男人對莫塵非常好，是莫塵喜歡的那種很紳士的男人。他的每一個細節，每一個動作，都很小心。他也很健談。莫塵和他在咖啡館度過很多個夜晚。可是，當某天晚上分別時他的一個擁抱的動作，所有的一切，在莫塵眼里都邊成了虛假。莫塵想起周董的一句話“每個人都帶著面具說謊，動機只有一個，叫做欲望”莫塵不喜歡這樣，她不喜歡有動機的男人，這個社會，愛情，似乎已經成了性的掩飾。莫塵寧愿孤獨，也不要沉淪。

也許這一切，源于林成。林成是莫塵高中時的學長，不英俊，也不優秀。他抽煙，賭博，打群架，多次被學校記過，莫塵做為優秀的尖子生，卻無可救藥地愛上了他。朋友，老師，家長全都勸說莫塵，莫塵就是一如既往地倔強，和林成住在一起。后來，林成被學校開除，當莫塵決定要隨他走天涯時，林成卻獨自南下，后來再沒有了消息。幾年以后，當莫塵大學畢業時，她看到他帶著一個很妖艷的女人回了一趟家。莫塵就像高中時看林成打架時一樣，躲在遠處，看著林成消瘦的臉頰和他冷冷的神情。他只是逃走了，而莫塵從高中到大學，獨自承受著嘲笑和憂傷。莫塵的美麗，帶著高貴的憂傷，讓別的男人望塵莫及。

大學畢業之后，因為要照顧奶奶，莫塵繼續留在這個城市。她除了自己的房子，租下了高中時林成住的房子，很多時候，她都默默地在那個小房子里抽煙，回憶。只是，她不再相信愛情，不再輕易相信一個人。

雪生，是在一個下著雪花的晚上在上和她說話的。雪生在莫塵里很久了，只是從來都不說話。莫塵的上有很多這樣的朋友。每天他們都在線，但是從來都不說話，但是都能感受地彼此的落寞和充盈。偶爾會到彼此空間里看一看，只字不留。都是很喜歡安靜的人。

雪生突然問“感冒好了嗎？”“沒有，謝謝”“你們那邊下雪了沒有？”“下了，不大”“這邊雪很大，非常美麗。”“呵呵”“開心一點好嗎？我在雜志上看過許多你寫的東西，都是那么憂傷，看的讓我心痛”“我也想，可是，做不到”……那天，很少和陌生人聊天的莫塵，和雪生聊了許多。

雪生是哈爾濱一個大學的心理學教師，他說他的城市冬天很美，他喜歡在下雪天漫無目地的走，莫塵也喜歡。但是莫塵在西南的一個城市，這里很少有機會見到雪花，莫塵已經兩年沒有見到雪了。雪生打電話說，“有機會你一定要來哈爾濱，我帶你看雪，看冰燈”莫塵微笑著說“我的家鄉也很美，不太冷”她的預期變的很輕，放下電話，她覺得他們都很傻，他們都習慣了自己的環境和生活方式，明明是沒有機會的，卻還是在虛假地安慰彼此。她注定離不開這個地方，也注定不能到那么寒冷的地方。她答應過奶奶，不離開。也答應自己，等到林成回來問他為什么自己離開。

雪生和莫塵一直聯系近兩年，他經常打電話給她，噓寒問暖，和她聊天，勸她不要再憂傷。莫塵會發信息告訴他她的生活，她遇到的趣事，和她神經質的感悟。雪生會給她寄很多調節情緒的，心理學方面的書。莫塵也常常在房間里，給雪生寫信，閑散的生活，淡淡的傷感，一些瑣碎的心事，但是，他們從來不提感情。

越是陷入，越是無望，彼此都明了，卻無法停止。

親戚打來電話，說奶奶病重。莫塵淚如雨下。她回去看奶奶，奶奶已經像個被風干的人，瘦的讓人心疼。奶奶說，希望在走之前看見莫塵成家，這些年，她一直都太孤獨。沒有完整的家庭給我完整的愛。莫塵需要一個疼愛她的男人。莫塵說“你已經給我許許多多的愛”但是奶奶告訴她，當年是她勸走了林成。

莫塵想起高中時奶奶為了不讓她找林成把她鎖在家里的情形，那時候，她恨過奶奶。許多年前，奶奶站在鐵路旁，一直觀望著小莫塵走鐵路，直到看不見了，才回去。莫塵一直都是記得的。

接下來，所有的親戚都在為莫塵的事操心，莫塵會去相親，和別人喝茶，吃飯，看電影，帶回去給奶奶看。

望塵莫及范文第2篇

誰回眸時不經意的驚鴻一瞥，牽動著一顆心到支離破碎。執筆書緒，灑墨成殤，又一次用凌亂的語句祭奠著那些翩然輕擦的過往，于那蒼白的文字，我始終沒有放下。

——序

一曲離殤，喚不回你素筆淺描的妝容。煙花易冷，細雨紛紛，遺落在心底某個角落的那道身影，依舊是如此清晰，原來于你，我從未曾忘記。

熟悉的調子回蕩在耳邊，低沉而哀傷，但還是喜歡重復著去聽，一遍一遍，直到雙眼朦朧。雨絲淅淅瀝瀝的落在城市布滿灰塵的大地上，塵土飄飄灑灑，孤單了誰慘淡的流年，唯留那些斑駁的回憶凋零在此夜里，輾轉成歌。

宿命諷刺了等待，輪回蒼老了流年。于茫茫人海那瞬間的凝望，淺妝淡雅的笑妍，轉身回首時深情的眼眸，定格了靈魂深處幾生幾世的記憶。

夜雨似演繹著凄傷的古調，織成一曲無字的挽歌。眼角滑過的淚書寫了怎樣的哀傷，于泛黃的紙頁，沉寂綻放著惆悵，孤獨麻醉了愁緒。那些盤旋著的記憶，殘缺了此生的眷戀，縱是一生繁華也抵不過你轉身前的紅顏一笑。

黑暗迷離了我的雙眼，雨滴落在臉上，卻沖不淡心中的思念，寂寞如夢魘般纏繞心間，嘲諷著過往的希冀。

于莽莽滄海，苦等一生，為了誰？

于荒蕪塵世，癡迷一世，為了誰？

煙花易冷，人事易分，不知伽藍寺的鐘聲是否依舊，當又一次傾聽伽藍雨聲時，而你卻已成過往。

望塵莫及范文第3篇

【摘要】 目的 應用RNAi技術沉默胰腺癌細胞株中survivin基因對腫瘤細胞凋亡、細胞周期和增殖的變化。方法 靶向survivin的RNAi載體轉染胰腺癌細胞，Western印跡檢測基因沉默效果，MTT法和流式細胞術檢測細胞增殖、凋亡及細胞周期。結果 survivin基因沉默效率可達85%；MTT檢測顯示，干擾組survivin沉默細胞增殖抑制與非特異性質粒對照組相比顯著增高（P

【關鍵詞】 RNAi；survivin；細胞凋亡；細胞周期；胰腺癌

胰腺癌的發生、發展以及侵襲、轉移是多基因參與、多步驟發生的過程，其中生存素（survivin）是一類在胰腺癌的發生、發展中起非常重要作用的癌基因〔1〕，其參與細胞多種重要生物學過程，包括基因轉錄調控、胚胎發生、細胞分化、腫瘤形成和轉移等〔1，2〕。survivin在胚胎期表達豐富，而在成熟組織中則表達極少或缺失，但在病理情況下，包括胰腺癌的很多惡性腫瘤組織中均發現有survivin的高水平表達，并且其表達量與腫瘤惡性程度及轉移能力呈正相關〔1，3〕。survivin的過表達和激活不僅與預后不良密切相關，而且能影響腫瘤細胞對化療藥物的敏感性，是胰腺癌基因治療的潛在靶點之一〔4，5〕。本研究選擇survivin分子作為干擾靶點，檢測沉默該基因后對胰腺癌細胞凋亡和細胞周期的影響，為進一步研究survivin基因在腫瘤細胞生物學特性及免疫抑制中的作用構建技術平臺。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

人胰腺癌細胞株PC3購自中國科學院上海生物研究所細胞庫，以含10%胎牛血清（Hyclone公司）的DMEM（Gibco公司）培養基，37℃，5%CO2孵箱（SANYO）培養。轉染試劑LipofectamineTM 2000（美國Gibco公司），ECL化學發光試劑盒（美國Pierce公司），小鼠抗人單克隆survivin抗體（Santa Cruz公司）。干擾質粒pGenesil2、非特異性siRNA（武漢市晶賽生物工程技術有限公司），pGensilsiRNAsurvivin質粒由本室構建。AnnexinV凋亡檢測試劑盒購自美國BD公司。

1.2 細胞培養與細胞轉染

轉染前1 d將對數生長期的胰腺癌細胞株PC3以2×105個/孔接種于6孔培養板，細胞鋪板在2 ml含血清、不含抗生素的DMEM培養基中，24 h內、細胞融合達40%～60%時進行轉染，將siRNA LipofectamineTM2000復合體加到培養板中（轉染方法按試劑盒說明書操作），轉染體系為500 μl，siRNAs終濃度為100 nmol/L。

1.3 Western印跡檢測基因沉默效果

收集細胞，用PBS緩沖液漂洗3次，加入200 μl 細胞裂解液混勻、冰浴30 min。15 000 r/min離心10 min，以Lowry′s 法行總蛋白定量分析。制備12％分離膠、5％積層膠，上樣，在8 V/era電壓條件下行SDS聚丙烯酰胺電泳，待溴酚藍進入分離膠時，將電壓提高到15 V/era。電泳結束后，將分離出的蛋白質轉至硝酸纖維素膜上（Millipore，USA），5％脫脂奶粉的TBS溶液封閉2 h，鼠抗人單克隆一抗和βactin室溫孵育2 h，二抗室溫孵育1.5 h，ECL 試劑盒顯色，拍照，比較各組灰度變化。分為siRNA干擾組、siRNA干擾對照組(用非特異siRNA LipofectamineTM 2000復合體轉染)、空載體組(以空白載體復合體轉染)、未轉染對照組(以等量培養基處理)作為對照，觀察各組干擾效果。

1.4 MTT法檢測細胞增殖

將各組細胞以2 000個/孔的密度接種于96孔板，體積200 μl/孔。分別于轉染后24、48、72 h進行MTT檢測，酶標儀測定570 μm處OD值，連續測定3 d。每個時間點設5個復孔，根據吸光度值繪制曲線，比較各組細胞生長速度變化。分為siRNA干擾組和非特異性轉染對照組。

1.5 流式細胞儀檢測細胞周期和細胞凋亡

分別于轉染后24、48、72 h收集細胞，冷PBS洗滌2次，－20℃預冷的70%乙醇固定48 h，1 200 r/min離心10 min棄上清，1 000 μl PBS重懸加10 mg/ml RNase 20 μl混勻，37℃水浴45 min，PBS洗Rnase，100 μl PBS重懸，100 μl PI 4℃避光染色1 h。流式細胞儀測定熒光強度，CellQuest分析軟件進行細胞周期DNA含量分析，確定細胞周期分布。細胞凋亡的檢測采用Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒，實驗操作按說明書進行。每組細胞重復3個樣本，分為siRNA干擾組和非特異性轉染對照組。

1.6 統計學分析

數據均以x±s表示，采用統計軟件SPSS 16.0分析。

2 結 果

2.1 Western印跡檢測siRNA抑制survivin基因的效果

空載體組及siRNA干擾對照組survivin表達未受抑制，與未轉染對照組比較無顯著差異；而干擾組survivin表達與對照組相比則明顯受到抑制，干擾效率達到85%以上，說明RNAi載體構建有效，能夠有效地抑制轉染細胞中survivin的表達(圖1)。

2.2 survivin基因沉默對PC3細胞增殖的影響

MTT檢測結果顯示，PC3細胞行survivin基因干擾后0～72 h，較相同時間點對照組細胞吸光度A值降低；其中24、48 h干擾組PC3細胞吸光度A值明顯低于對照組（P

2.3 survivin基因沉默對PC3細胞凋亡和細胞周期的影響

流式細胞術結果顯示，與對照組比較，各時點干擾組細胞在G1期前均出現顯著的凋亡現象，以48 h最為顯著，24、48、72 h凋亡細胞百分率分別為（33.67±4.24）%、（42.12±5.88）%、（38.37±7.91）%，與同時點對照組〔(2.01±0.42）%、（3.13±0.69）%、（3.74±0.9）%〕比較均具有顯著性差異（P

3 討 論

survivin是用EPR1的cDNA在人類基因組文庫中雜交、篩選出的凋亡抑制蛋白（IAP）家族新成員〔1，6〕。survivin蛋白半衰期為30 min，其表達具有明顯的周期依賴性。在G0／G1期檢測不到survivin蛋白表達，S期表達量升高，G2／M期可升高40倍〔7〕。survivin表達也具有明顯的組織選擇性，生理狀態下，在正常成熟組織中檢測不到survivin表達，但其顯著高表達于14～21周齡的胚胎組織中，因此推測survivin可能與組織器官的發育、成熟密切相關〔8〕。有研究證實，胸腺中survivin蛋白的高表達對于T細胞的分化、成熟有著重要意義。由于survivin蛋白在諸多腫瘤組織中（如肝癌、乳腺癌、白血病等）高表達，因此有人將survivin蛋白稱作是腫瘤的通用抗原。由于survivin具有抑制凋亡、調控細胞周期、影響有絲分裂過程、促進血管生成等生物學作用，其高表達必然會對腫瘤細胞的生長與增殖產生影響——腫瘤細胞凋亡耐受、腫瘤血管的生成及向周圍組織浸潤能力的增強，并且隨著survivin蛋白表達的增加，腫瘤細胞也表現一定的輻射耐受性及化學藥物耐受性〔9，10〕。因此，survivin成為具有潛在價值的胰腺癌治療的新靶點，沉默該基因可能對胰腺癌細胞生物學行為產生重要影響。

本研究MTT結果顯示，survivin基因沉默后腫瘤細胞生長速度顯著低于對照組細胞，說明survivin基因抑制直接導致了腫瘤增殖的抑制；流式細胞術結果顯示，G2/M期細胞百分率顯著高于對照組，S期細胞百分率顯著低于對照組，說明survivin基因的沉默導致了細胞周期的阻滯，也進一步提示survivin可能參與胰腺癌細胞的周期調控；流式細胞術結果顯示，G1期前有凋亡峰存在，且凋亡細胞百分數顯著高于對照組，說明survivin基因沉默促進了胰腺癌細胞的凋亡，同時也提示survivin可能與胰腺癌細胞的凋亡密切相關。

參考文獻

1 Lopes RB，Gangeswaran R，McNeish IA，et al.Expression of the IAP protein family is dysregulated in pancreatic cancer cells and is important for resistance to chemotherapy〔J〕.Int J Cancer，2007；120(11)：234452.

2 Jhala N，Jhala D，Vickers SM，et al.Biomarkers in diagnosis of pancreatic carcinoma in fineneedle aspirates〔J〕.Am J Clin Pathol，2006；126(4)：5729.

3 Guan HT，Xue XH，Wang XJ，et al.Knockdown of survivin expression by small interfering RNA suppresses proliferation of two human cancer cell lines〔J〕.Chin Med Sci J，2006；21(2)：1159.

4 Zhu K，Qin H，Cha SC，et al.Survivin DNA vaccine generated specific antitumor effects in pancreatic carcinoma and lymphoma mouse models〔J〕.Vaccine，2007；25(46):795561.

5 Watanabe T，Totoki Y，Toyoda A，et al.Endogenous siRNAs from naturally formed dsRNAs regulate transcripts in mouse oocytes〔J〕.Nature，2008；453(7194)：53943.

6 Marioni G，Dalessandro E，Bertolin A，et al.Survivin multifaceted activity in head and neck carcinoma：current evidence and future therapeutic challenges〔J〕.Acta Otolaryngol，2009；25：16.

7 Li F，Ambrosini G，Chu EY，et al.Control of apoptosis and mitotic spindle checkpoint by survivin〔J〕.Nature，1998；396(6711)：5804.

8 Zamparese R，Pannone G，Santoro A，et al.Survivin expression in renal cell carcinoma〔J〕.Cancer Invest，2008；26(9):92935.

望塵莫及范文第4篇

我愿化作一只飛燕，率先登上頂峰去尋找金銀銅牌的蹤跡。

我愿化作一只飛燕，來體會那剎那“一覽眾山小”的輝煌。

南山，我的高中。

在這么一個匯聚著四川各地英才的地方，我發覺我是如沙粒般如此微不足道，一個個精英才子在我身邊閃現，仿佛我這顆黯然的連名字都叫不出來的小星是為了襯托他們的輝煌而存在。

每一年，南山中學全國奧數第一，第二層出不窮，甚至讓人有了一種理所當然的感覺，而我啦，每當看到學校光榮榜上的名字，照片，心中除了自卑就只剩下失落。

因為，我連普通數學考試也一直掛科。

這對我來說，實實在在是個諷刺，同樣的學校，看著同樣的花草樹木，呼吸著同樣的空氣。為什么，這差距竟讓我有了一種望塵莫及的感覺？

可悲，可笑。

是什么造成了如此的天壤之別？

習慣，是習慣。

一切的事物都以習慣為自然，沒有一個好的習慣，即使你是比愛因斯坦還天才的人，你的天賦也只會是曇花一現，而最后被無數個不是天才，卻擁有好習慣的人，甩在后面。

數數指頭，2012年也已經不遠了，這意味著什么？意味著我的機會來了，上帝網開一面給了我重新來過的機會，我難道會任由他錯過。

不，不會。

2012年，等著我，我會以良好的習慣為開端，去征服這一年，去嘗試觸摸那些如今我只能仰視的東西。

也許你不相信，但是365天之后，你一定會發現，我已經化作一只飛燕，飛在你上空。

望塵莫及范文第5篇

青春是一場沒有硝煙的戰爭

它的殘酷讓人望塵莫及

逝去的青春已埋葬在時間里

而我們如傀儡一般，機械向前

青春是一條不歸路

我們踏上征程

幻想著絕美的畫面

得到的卻是眼淚與傷痕

我們幻想著美好的未來，憧憬著未來

但理想是豐滿的，現實卻是殘酷的

我們換來的是謾罵與迷茫

別人的輕視，亦或者被打入十八層地獄后的絕望

誰又了解單薄背影下那無助的人