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軍人同志

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軍人同志范文第1篇

根據國務院《退役士兵安置條例》和《省人民政府關于做好我省年冬季退役士兵接收安置工作的通知》(府〔〕80號)精神,結合我市實際,現就做好我市年冬季退役士兵接收安置工作通知如下:

一、接收安置對象

年冬季退役士兵接收安置對象為:符合國務院《退役士兵安置條例》和《省人民政府關于做好我省年冬季退役士兵接收安置工作的通知》(府〔〕80號)規定的年冬季退出現役的士兵。

二、安置原則

年冬季退役士兵安置工作實行“扶持就業為主,重點安置為輔”的安置原則。對重點安置對象實行“按系統分配任務,包干安置”的原則,由各級政府下達指令性計劃一次性安置就業,并務必于接收退役士兵的6個月內,開出安置介紹信,并督促有關單位盡快落實,確保退役士兵真正上崗就業。待安置工作期間,由安置地人民政府按最低生活保障標準發給其生活補助費。對于無正當理由不服從分配者,政府不再負責安置。本人選擇自謀職業的,按規定發給一次性安置補助金。一般安置對象,沒有選擇自主就業的城鎮退役士兵,可領取自謀職業一次性安置補助金,選擇自主就業的城鎮退役士兵,可領取一次性經濟補助金;沒有選擇自主就業的農村退役士兵,可領取一次性生產生活補助金,選擇自主就業的農村退役士兵,可領取一次性經濟補助金。一般安置對象由政府提供優惠政策扶持就業。

(一)重點安置對象(符合下列條件且未選擇自主就業安置的退役士兵,可以選擇由政府安排工作或者自謀職業的方式安置)。

1、服現役滿12年的士官;

2、服現役期間獲得大軍區以上(含大軍區)單位授予榮譽稱號、平時榮立二等功以上獎勵或者戰時榮獲三等功以上獎勵的士兵;

3、因戰致殘被評定為5級至8級殘疾等級的士兵;

4、烈士子女士兵;

5、服現役滿10年、11年符合全程退役條件的士官;

6、服現役滿上士軍銜規定年限的直接從非軍事部門招收的士官;

7、因公致殘被評定為5級至8級殘疾等級的士兵;

8、退出現役前父母已雙亡的退伍義務兵和退出現役前父母已雙亡的未婚退役士官。

(二)除重點安置對象外,其余的退役士兵為一般安置對象。

(三)年冬季開始,在退出現役1年內,退役士兵可自主選擇參加高等職業教育、成人高等教育、普通高等教育和最短不少于3個月職業技能培訓,每人只能選擇其中1項,退出現役1年以上的,參加職業技能培訓按《國務院關于加強職業培訓促進就業的意見》(國發〔〕36號)規定執行。

三、補助金標準及資金來源

(一)、和區補助金標準

1、城鎮退役士兵一次性安置補助金(一次性經濟補助金)標準,根據全市上年度在崗職工人均工資收入水平確定,即中心城區城鎮退伍義務兵、服役滿一、二期的城鎮復員士官基本補助金標準按我市上年度在崗職工人均工資收入的100%發放,轉業士官基本補助金按我市上年度在崗職工人均工資收入的150%發放,從服滿義務兵年限后第一年算起,每多服役一年,增加上年度在崗職工人均一個月工資的補助。

2、農村退役士兵一次性生產生活補助金(一次性經濟補助金)標準,根據當地上年度農村居民人均純收入確定,即農村退伍義務兵、服役滿一、二期的復員士官基本補助金按照當地上年度農村居民人均純收入的100%發放,從服滿義務兵年限后第一年算起,每多服役一年,增加上年度農村居民人均一個月純收入。

3、獲得大軍區以上(含大軍區)單位授予榮譽稱號或榮立二等功(含二等功)以上的、烈士子女、弟妹接槍入伍、退役時父母已雙亡的退役士兵,以及七、八、九、十級殘疾軍人增發20%的補助金;五、六級殘疾軍人增發50%的補助金。

(二)、和區經費來源

金平、龍湖和濠江區的城鎮退役士兵的一次性安置補助金(一次性經濟補助金)及市舉辦的職業技能培訓費用(培訓標準每人按800元計),由市、區財政按1:1比例負擔。農村退役士兵一次性生產生活補助金(一次性經濟補助金)由區財政負擔,省財政按照當地上年度農村人均純收入的50%給予補助。

(三)、、區和縣可根據上述(一)、(二)原則,制定具體補助標準,資金來源按原財政渠道解決。

軍人同志范文第2篇

【關鍵詞】人格教育;心理素質

一、通過人格教育構建學員健全的心理結構

人格是人的素質的重要組成部分,是人心理面貌的集中反映。人格教育是著眼于發展受教育者全部心理面貌的教育,其目標是使個體具有良好的心理素質與健康的心理狀態,促進個體心理結構的健全發展,構建一個多層次、高效能的心理調節與控制系統,使個體潛力得到最大的發揮。通過人格教育可以促進知、情、意協調統一,建立一種完整和健全的心理結構,提高人的總和心理素質,從而有助于個體更好地適應社會環境。軍隊院校人格教育的基本內容應該從認知、情感和自我意識三個方面入手。首先是認知教育。軍校教育不僅要幫助學員掌握先進的軍事理論和廣泛的軍事知識,更要培養學員適應未來現代化戰爭所應具備的快速的思維能力、精準的判斷力,合理的認知方式和健全的認知結構。其次是情感教育。情緒是心理健康的晴雨表,要使學員認識常見的負性情緒,學會調節和控制自己的情緒,防止負性情緒對心理健康的傷害,使自己經常保持穩定的情緒狀況,以適應高強度、超負荷的現代化戰爭。第三是自我意識教育。自我是人格的核心,只有正確地認識自己,才能形成健全的人格,正確的自我認知是心理全面發展的基礎。對自己能有正確認識的人是自尊、自強、自信的人。能正確認識自己的人往往具有較強的親和力與團隊合作精神,具備自我調控能力,能努力改變和發展自身的能力素質,適應不斷變化的客觀環境。

二、通過人格教育鍛造學員堅韌的意志品質

學員健康人格的形成是與克服脆弱、魯莽、多疑等性格弱點和各種困難相聯系的。戰爭是以鮮血和生命為代價的激烈角逐,學員身系重大責任,將面對未來高技術戰爭下異常的心理壓力,因而必須塑造他們勇敢頑強、堅忍不拔的意志品質。堅韌的意志品質不是與生俱來的,只有經過后天的培養和有意識、有目的的磨礪才能獲得。這就要求在教學與訓練中要有意識地創設困難情境,指導、鼓勵學員刻苦磨練,鍛造他們堅毅頑強的優良性格。實踐證明,在越困難的環境下,越有能力克服困難完成任務的人,人格越完善,才能是越有希望取得成功的人。具有堅韌意志品質的軍人,往往有更強的心理承受能力,面對各種應激事件時能應付自如,處變不驚,臨危不懼,更好的適應戰場環境,完成任務使命。因此,鍛造堅韌的意志品質應成為軍校學員人格教育的一項重要內容。

三、通過人格教育幫助學員樹立堅定、正確的信念。保持統一的人格

信仰危機最容易造成人們心理上的崩潰,沒有了精神支柱,人很難承受各方面強大的心理壓力。軍校學員正處在人生觀、價值觀的形成時期。作為年輕人他們看問題往往容易偏激和片面,常常不能正確對待和處理好自己在現實生活中遇到的挫折和困難,以致引起心理沖突和矛盾,如果長時間不能排解,就有可能積聚成心理疾患。同時,由于他們的知識和經驗有限,對復雜社會問題的分析判斷能力還不高,對不健康的思想意識往往缺乏分辨力和抵抗力,容易形成一些錯誤的態度,甚至做出非理性的行為。因此,通過人格教育,幫助學員樹立和鞏固正確的人生價值目標的同時,引導他們把個人理想與遠大理想、社會期望結合起來,把個人的興趣、愛好同軍隊發展的實際結合起來,引導他們從點滴做起,從現在做起,要讓他們真正明白由“小”到“大”、不積跬步,無以至千里的道理。最終要落實在具體行動上,落實在日常的學習、訓練、生活中,在實踐中不斷完善自己的人格,保持主觀世界客觀世界的和諧統一。

軍人同志范文第3篇

【摘要】 目的 了解門診婦科病人兩種不同PH值范圍真菌感染狀況,為臨床婦科醫生治療這類病人提供參考資料。方法 收集門診婦科白帶常規檢查病人的白帶鏡檢資料,同時對每個送檢標本用3.8—5.4的PH精密試紙進行白帶的PH直接測試,而后,將所有的檢查資料分成PH≤4.5或PH>4.5兩個PH值范圍進行歸類統計分析。結果 總人次中PH≤4.5的白帶1128人次,PH>4.5的白帶856人次。PH≤4.5的白帶中有真菌感染的病人352人次,占PH≤4.5的白帶的32%。PH>4.5的白帶中真菌感染的病人328人次,占PH>4.5的白帶的39%,兩個百分率的卡方值為:x2=0.0800 P >0.05。結論 門診婦科病人白帶不同PH范圍真菌感染率無顯著性差異,兩種不同PH狀況下存在同樣的感染風險。

【關鍵詞】 菌群失調 真菌感染 PH值

【Abstract】Goal: Understood that outpatient service gynecology department patient two kind of different PH the value scope fungal infections condition, treats this kind of patient for clinical gynecology department doctor to provide the reference. Method: The collection outpatient service gynecology department leucorrhea routine inspection patient's leucorrhea microscopic exam material, simultaneously delivers examines the specimen to each to carry on the leucorrhea with 3.8-5.4 PH precise indicator papers the PH direct test, then, all inspection material will pide into PH≤4.5 or PH>4.5LIANG the PH value scope carries on the classification statistical analysis. Finally: Always people of PH≤4.5 leucorrhea 1128 people, PH>4.5 leucorrhea 856 people. PH≤4.5 in the leucorrhea has the fungal infections patient 352 people, occupies PH≤4.5 leucorrhea 32%. In the PH>4.5 leucorrhea fungal infections's patient 328 people, occupy PH>4.5 the leucorrhea 39%, two percentage card Fang Zhiwei: x2=0.0800 P>0.05. Conclusion: The outpatient service gynecology department patient leucorrhea different PH scope fungus infection percentage non-significance difference, under two kind of different PH conditions has the similar infection risk.

【Key words】flora fungal infection PH value

門診婦科病人白帶常規檢查中真菌感染的感染率相當高,但這種感染在正常PH范圍與異常PH范圍兩種狀況下是否存在差別?差別有多大?帶著這樣的問題我們進行了調查,現將調查與分析情況作如下報導:

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1 標本來源 收集門診婦科1984例白帶常規鏡檢結果

1.1.2 PH精密試紙:上海三愛思試劑有限公司(原上海試劑三廠生產的“試三牌”)(PH3.8-5.4)精密試紙。

1.2 方法 對送檢白帶進行常規檢查,并同時對每個送檢標本用3.8—5.4的PH精密試紙進行白帶的PH直接測試,而后將所得的資料進行歸類統計和分析。

2 結果

將其分成PH≤4.5和PH>4.5兩種狀況,進行兩樣本率的比較其結果:x2=0.0800;P>0.05,兩者沒有明顯的差別,也就是說兩種PH狀況下具有同等的感染真菌的機會。

3 討論

霉菌性陰道炎又稱為“假絲酵母菌性陰道炎”,是門診婦科病人中最常見的一種婦科炎癥,其發病率有逐年升高的趨勢,且反復發作的病例非常常見,這些都提示著感染的真菌的耐藥趨勢在增強。正常的陰道內環境是否對霉菌感染有抵御作用?婦科病人的白帶兩種不同PH值范圍真菌感染狀況如何?兩種狀況的感染率是否存在差別,差別是否存在顯著性差異,都是我們這次調查想要了解的內容。正常的陰道內環境變化可以從白帶PH的變化很直觀的表現出來,因此,我們從2008年7月1日至2008年10月30日,共收集門診白帶常規檢查的病人資料1984人次,對這1984名做門診白帶常規檢查的病人的白帶進行PH值測定,其中PH≤4.5的1128人次,占總人次的57%,PH>4.5的856人次,占總人次的44%,從PH值測定的情況看,大部分病人的白帶PH值在正常范圍,小部分病人的白帶PH值高出了正常范圍,但在正常范圍和高于正常范圍的都有真菌感染陽性病例出現,PH值高于正常范圍的陽性率與正常范圍的陽性率比較, 經卡方檢驗:x2=0.0800 P>0.05兩者沒有顯著性差異,于是認為兩種不同的PH 范圍具有同等的感染機會。霉菌性陰道炎大部分是由于接觸感染所致,文獻介紹的很多感染途徑都沒有離開這一點,我們的調查也顯示不管是正常PH范圍(PH≤4.5),還是異常PH范圍(PH≤4.5),都存在同樣的感染風險。 參 考 文 獻

[1] 呂榮.1006例白帶異常分泌物的病原學分析[J].中國醫學文摘(計劃生育婦產科學),2008,(06).

[2] 李晶,苗志峰.女性陰道分泌物涂片染色結果分析[J].中國婦幼保健 ,2007,(26).

[3] 范文燕,袁兆康.已婚育齡婦女生殖道感染現狀及干預研究[J].實用臨床醫學 ,2006,(06).

軍人同志范文第4篇

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  軍隊人員級別|政府工作人員津貼、工資級別  |    附        注

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    團|正  團|          14              |

      |副  團|          15              |1.軍齡滿五年以上之老戰士,按副班級待遇;

    級|準  團|          16              |

---|---|--------------|    滿三年以上不足五年者,按老戰士待遇;

    營|正  營|          17              |

    級|副  營|          18              |    不足三年者按新戰士待遇。

---|---|--------------|

    連|正  連|          19              |2.準師級以上人員轉業者,按其新任職務,符

    級|副  連|          20              |

---|---|--------------|    合其具體條件評定。

    排|正  排|          21              |

    級|副  排|          22              |3.轉業到不執行各級人民政府工作人員津貼、

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    班|正  班|          23              |    工資標準之單位的人員,不適用此比照表,

    級|副  班|          24              |

---|---|--------------|    可按其所在單位執行之工資標準評定工資。

    戰|老戰士|          25              |

軍人同志范文第5篇

[摘要] 目的 探討姜黃素對銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa,Pa)感染的肺上皮細胞的體外抗炎效應。 方法 體外培養肺上皮細胞系NCI-H292,加入姜黃素和培養的Pa感染不同時間。Western blot檢測和實時定量PCR分別檢測NCI-H292細胞中紅素氧合酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)mRNA和蛋白表達情況;ELISA檢測IL-1β和IL-8的產生。同時采用RNA干擾HO-1表達后,觀察對Pa誘導IL-1β和IL-8產生的影響。 結果 Pa感染NCI-H292細胞后,IL-1β和IL-8含量分別為(87.52±7.96)pg/mL和(205.63±34.25)pg/mL,50 μg/mL姜黃素孵育8 h后,其含量分別降至(15.78±10.74)pg/mL和(49.82±14.28)pg/mL,處理前后差異有統計學意義(P < 0.05)。同時,姜黃素能在轉錄翻譯水平分別調控HO-1 mRNA和蛋白表達,其中50 μg/mL姜黃素能將HO-1 mRNA增高19倍,蛋白表達水平提高4.8倍(P < 0.05)。HO-1 siRNA沉默HO-1表達后,與Pa組相比,IL-1β和IL-8分泌進一步增高。 結論 姜黃素可能通過上調HO-1的表達而發揮對肺上皮細胞的抗炎作用。

[關鍵詞] 血紅素氧合酶-1;姜黃素;銅綠假單胞菌;肺上皮細胞;白介素-1β;白介素-8

[中圖分類號] R734.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210(2013)11(b)-0013-04

Study of molecular mechanism of the effect of Curcumin on pseudomonas aeruginosa-induced cytokines production in lung epithelial cells

LI Bo LUO Jinhua HE Zhiguo

Department of Infectious Diseases, the Third Affiliated Hospital, University of South China, Hu′nan Province, Hengyang 421000, China

[Abstract] Objective To investigated the anti-inflammatory effects of Curcumin in pseudomonas aeruginosa -infected lung epithelial cells in vitro. Methods Lung epithelial cell line NCI-H292 was cultured in vitro, and was incubated with Curcumin and pseudomonas aeruginosa for various times. Expression of Heme oxygenase-1 (HO-1) mRNA and protein was detected by real-time PCR and Western blot, respectively; production of IL-8 and IL-8 was detected by ELISA. RNA interference was used to silent HO-1 expression, and pseudomonas aeruginosa-induced production of IL-1β and IL-8 were detected. Results After pseudomonas aeruginosa infection, the concentration of IL-1β and IL-8 was (87.52±7.96) pg/mL and (205.63±34.25) pg/mL, respectively. When incubated with 50 μg/mL Curcumin for 8 h, IL-1β and IL-8 decreased to (15.78±10.74) pg/mL and (49.82±14.28) pg/mL (P < 0.05). Curcumin could also induce NCI-H292 cells expression of HO-1 mRNA at the transcriptional and translational level, and 50 μg/mL Curcumin increased the mRNA and protein 19 and 4.8 fold, respectively (P < 0.05). Furthermore, silencing of HO-1 expression could increase NCI-H292 cell secretion of IL-1β and IL-8, as compared with pseudomonas aeruginosa group. Conclusion Curcumin exhibits anti-inflammatory activity through induction of HO-1 expression in lung epithelial cells.

[Key words] Heme oxygenase-1; Curcumin; Pseudomonas aeruginosa; Lung epithelial cells; IL-1β; IL-8

[基金項目] 湖南省衡陽市科學技術發展計劃項目(編號2012KJ28)。

血紅素氧合酶(Heme oxygenase-1,HO-1)是催化血紅素降解為CO、Fe2+和膽紅素的限速酶,并在機體的抗炎癥、抗氧化損傷中發揮重要作用[1]。研究顯示,銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa,Pa)感染后,肺上皮細胞可反饋性表達HO-1從而在一定程度上對抗Pa感染所誘導的氧化應激損傷[2-3]。因此,以HO-1為出發點,尋求相應的誘導劑,可能對Pa感染所導致的肺黏膜損傷具有重要意義。姜黃素(Curcumin)是從姜科姜黃屬植物的根莖中提取的一種植物多酚,大量研究證明,姜黃素具抗氧化、抗炎、清除自由基、抗腫瘤、抗炎癥以及對心血管系統、消化系統等多方面藥理作用[4-5]。本研究旨在探討姜黃素對肺上皮細胞表達HO-1的影響,并觀察其是否能抑制Pa感染所誘導的細胞因子產生。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

姜黃素購自Sigma公司。SYBGREEN PCR Mix購自ABI,TRIZol為Invitrogen產品。cDNA逆轉錄試劑盒購自Fermentas;RIPA裂解液、ECL試劑盒為Pierce產品;IL-1β和IL-8 ELISA購自深圳博盛生物科技有限公司。BCA試劑盒購自江蘇碧云天生物技術公司,HO-1和β-actin多克隆抗體購自Santa Cruz。RPMI1640培養基和胎牛血清購自Gibco。

1.2 細胞和Pa菌培養

人肺上皮NCI-H292細胞細胞系購自中科院上海細胞庫,細胞用含10%胎牛血清的RPMI1640培養基,在37℃ 5%CO2環境中培養。獲取Pa單菌落,接種于LB液體培養基,37℃培養3 h。隨后取200 μL菌液接種至LB瓊脂平板中,37℃條件下過夜培養。洗脫并收集平板上細菌,10 000 r/min條件下離心5 min,隨后用無菌PBS洗滌2次。采用分光光度計于650 nm波長下測定菌液OD值并計算細菌的濃度。

1.3 Pa感染和姜黃素處理

NCI-H292細胞鋪于96孔板(1×106/mL,0.1 mL),24孔板(1×106/mL,1 mL),或者6孔板(1×106/mL,2 mL),培養48 h,當其達到80%匯合度后,用無菌PBS漂洗,當細胞生長成片生長時,加入培養的Pa(1×109 cfu/mL)以及不同濃度(10、30 μg/mL和50 μg/mL)的姜黃素處理并繼續培養24 h。

1.4 實時定量PCR檢測HO-1 mRNA的表達

細胞處理結束后,根據試劑盒操作說明提取總RNA并逆轉錄為cDNA,產物用RNA酶處理。設計特異性引物用于檢測HO-1 mRNA表達的定量。HO-1其正向引物:5′ - GCTCAAAAAGATTGCCCAGA -3′;反向引物:5′ - GCGGTAGAGCTGCTTGAACT - 3′。50 μL反應體系包括:25 μL 2 × SYBR Green Master Mix(200 nmol/L dATP、dGTP和dCTP;400 nmol/L dUTP;2 mmol/L MgCl2,0.25 U UNG,0.625 U AmpliTaq Gold DNA聚合酶,25 pmol正向和反向引物,2 μL cDNA。利用ABI Prism 5700儀對HO-1進行擴增。首先50℃ 2 min,95℃ 10 min。隨后95℃ 15 s;60℃變形、延伸60 s,共40個循環。同時采用β-actin為內參。mRNA表達倍數改變采用2ΔCt表示,ΔCt=(Ct對照基因-Ctβ-acin)-(Ct待測基因-Ctβ-acin)。

1.5 Western blot分析HO-1蛋白表達

6孔板中細胞經PBS漂洗后,加入RIPA細胞裂解液裂解30 min,4℃ 12 000 g離心15 min,上清即為細胞總蛋白。裂解液中的蛋白用Bradford試劑在分光光度計中測定OD595處吸光度。50~70 μg總蛋白在5%~10%聚丙烯酰胺凝膠中電泳,并轉移至PVDF膜上,經5%無脂牛奶封閉后,分別用孵育一抗,二抗。ECL發光,顯影。

1.6 IL-1β和IL-8檢測

收集感染后24孔板中細胞上清液,按照ELASA 試劑盒說明書檢測IL-1β和IL-8水平。即100 μL細胞上清液加入到每個捕獲抗體包被的微孔板中,室溫孵育2 h。洗板后,加入100 μL檢測抗體,室溫繼續孵育2 h。隨后棄混合物,每孔加入100 μL streptavidin-HRP,室溫避光孵育20 min。最后,每孔加入100 μL底物,室溫避光孵育20 min,然后加入50 μL終止液,分光光度計檢測450 nm處OD值。

1.7 HO-1基因沉默實驗

HO-1基因特異性siRNA序列由Invitrogen公司合成(forward:5′-AACUUUCAGAAGGGCCAGGUGTT-3′,reerse:5′-CACCUGGC CCUUCUG AAAGUUTT-3′),轉染方法按照Ambion公司提供的試劑盒說明進行。生長于100 mm培養皿中的NCI-H292細胞加入0.5 mL瞬時轉染液(含8 μL siPORT Amine,20 nmol/L siRNA),使siRNA轉入細胞內。37℃、5% CO2條件下孵育5 h后,加入1.5 mL完全培養基并繼續孵育48 h,HO-1的干擾效果采用Western blot加以驗證。

1.8 統計學方法

計量資料數據以均數±標準差(x±s)表示,多組比較采用單因素方差分析并行Student's t檢驗。計數資料以率表示,采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 姜黃素下調Pa感染所誘導的細胞因子產生

ELISA結果顯示,NCI-H292細胞未刺激時IL-1β和IL-8水平較低。Pa感染能顯著促進其分泌細胞因子。而經不同濃度姜黃素處理后,細胞因子產生顯著降低,見表1。

表1 姜黃素對Pa感染誘導細胞因子產生的影響(pg/mL,x±s)

注:與對照組比較,*P

2.2 姜黃素誘導NCI-H292細胞表達HO-1 mRNA

Pa感染雖然能輕度上調HO-1 mRNA表達,但經10~50 μg/mL姜黃素孵育8 h后,real-time PCR結果顯示,30 μg/mL姜黃素能使HO-1 mRNA增高2.4倍,而50 μg/mL姜黃素處理后,HO-1 mRNA增高了19倍,見圖1。

與Pa感染組比較,*P < 0.05;1.陰性對照組;2.Pa感染組;3.Pa+10 μg/mL姜黃素組;4.Pa+30 μg/mL姜黃素組;5.Pa+50 μg/mL姜黃素組;Pa:銅綠假單胞菌

圖1 姜黃素對NCI-H292細胞表達HO-1 mRNA的影響

2.3 姜黃素對NCI-H292細胞HO-1蛋白表達的影響

如圖2所示,不同濃度的姜黃素刺激NCI-H292細胞后,HO-1蛋白的表達量隨其濃度的遞增而增高,其中50 μg/mL姜黃素能將HO-1蛋白表達水平提高4.8倍。而內參β-acin在所有處理組中保持恒定。

1.陰性對照組;2.Pa感染組;3.Pa+10 μg/mL姜黃素組;4.Pa+30 μg/mL姜黃素組;5.Pa+50 μg/mL姜黃素組;Pa:銅綠假單胞菌

圖2 不同濃度對姜黃素誘導NCI-H292細胞表達HO-1蛋白的影響

2.4 RNA干擾HO-1表達后對Pa誘導IL-1β和IL-8的影響

HO-1 siRNA沉默HO-1表達后(圖3A),與Pa感染組相比,IL-1β和IL-8分泌進一步增高(圖3B)。

3 討論

HO-1 是一種誘導性表達酶。基因定位于染色體22q12,幾乎表達于所有組織,以內質網含量最高,在各種損傷性刺激下表達增高,又稱為熱休克蛋白32(HSP32)。HO-1能催化血紅素降解為CO、亞鐵離子和膽綠素,膽綠素隨后在膽綠素還原酶的作用下轉變為膽紅素。研究表明HO-1及其代謝產物在維護細胞穩態的過程中具有抗炎、抗增殖、抗氧化以及抗凋亡等作用[6]。例如,HO-1表達的降低或缺失(藥物性抑制作用或HO-1基因敲除小鼠)使機體對氧化應激的耐受性降低,從而誘發廣泛的氧化性損傷或器官衰竭[7]。Zhang等[8]的實驗證實了HO-1源性CO能加強cav-1和TLR4的相互作用,進一步減弱了LPS誘導的炎性反應。此外,HO-1源性膽紅素既可直接清除氧自由基,還可以通過抑制補體活化而減少炎癥細胞的聚集[1]。本實驗中以Pa感染的NCI-H292細胞為實驗對象,結果顯示,Pa感染后能增加IL-1β和IL-8水平,姜黃素能誘導NCI-H292細胞表達HO-1mRNA和蛋白,RNA干擾HO-1表達后,Pa誘導的IL-1β和IL-8的產生進一步增高,這表明HO-1能一定程度上對抗Pa感染所誘導的細胞因子表達,同時也從側面說明姜黃素可能通過上調HO-1表達從而具有一定的抗炎癥效應[9],從這種意義上講,姜黃素誘導產生的HO-1可能是抑制肺炎癥損傷的重要因素。同時本研究也發現,RNA干擾HO-1表達后,不能完全抑制細胞因子的產生,這表明HO-1可能不是唯一調控IL-1β和IL-8產生的因素。因為細胞因子基因的上游也存在NF-κB、AP-1等轉錄因子結合位點,因此也可能參與IL-1β和IL-8的基因表達同時,HO-1產物膽紅素和CO具有抗氧化、抗炎癥、抗凋亡和舒血管活性,可對拮抗各種損傷因素導致的肺黏膜損傷[10]。此外,體內外研究證明,通過胃腸道給予動物和人服用高劑量姜黃素后,尚未發現明顯的毒性。這表明姜黃素具有良好的安全性,同時也有臨床實驗發現,給予志愿者單次口服高達8000 mg的姜黃素,均沒有出現明顯的毒性作用。姜黃素在胃腸道的吸收率為60%~66%。給藥后,主要通過腸道排泄,而靜脈給藥則主要通過膽汁排泄[11-12],而本研究采用的最高濃度為50 μg/mL,因此即便服用也可達到誘導HO-1表達所需要的濃度。總之,Pa感染的肺腺癌細胞中,姜黃素通過上調HO-1表達,抑制了細胞因子的過度分泌。由于細胞因子過度分泌是各種感染性疾病發生的重要機制,此從這種意義上講,誘導姜黃素誘導的HO-1產生對于各種感染性疾病的防治可能具有重要意義。

[參考文獻]

[1] 馬小華,游曉星,吳移謀.HO-1在免疫調節中的作用及其相關信號轉導通路研究進展[J].中南醫學科學雜志,2011, 39(6):705-709.

[2] Tsuburai T,Kaneko T,Nagashima Y,et al. Pseudomonas aeruginosa-induced neutrophilic lung inflammation is attenuated by adenovirus-mediated transfer of the heme oxygenase 1 cDNA in mice [J]. Hum Gene Ther,2004,15(3):273-285.

[3] Caignan GA,Deshmukh R,Wilks A,et al. Oxidation of heme to beta-and delta-biliverdin by Pseudomonas aeruginosa heme oxygenase as a consequence of an unusual seating of the heme [J]. J Am Chem Soc,2002,124(50):14879-14892.

[4] Kapakos G,Youreva V,Srivastava AK. Cardiovascular protection by curcumin: molecular aspects [J]. Indian J Biochem Biophys,2012,49(5):306-315.

[5] Mohanty C,Das M,Sahoo SK. Emerging role of nanocarriers to increase the solubility and bioavailability of curcumin [J]. Expert Opin Drug Deliv,2012,9(11):1347-1364.

[6] Wang XM,Kim HP,Nakahira K,et al. The heme oxygenase-1/carbon monoxide pathway suppresses TLR4 signaling by regulating the interaction of TLR4 with caveolin-1 [J]. J Immunol,2009,182(6):3809-3818.

[7] Ben-Ari Z,Issan Y,Katz Y,et al. Induction of heme oxygenase-1 protects mouse liver from apoptotic ischemia/reperfusion injury [J]. Apoptosis,2013,18(5):547-555.

[8] Zhang PX,Murray TS,Villella VR,et al. Reduced caveolin-1 promotes hyperinflammation due to abnormal heme oxygenase-1 localization in lipopolysaccharide-challenged macrophages with dysfunctional cystic fibrosis transmembrane conductance regulator [J]. J Immunol,2013,190(10):5196-5206.

[9] Bansal SS,Vadhanam MV,Gupta RC. Development and in vitro-in vivo evaluation of polymeric implants for continuous systemic delivery of curcumin [J]. Pharm Res,2011,28(5):1121-1130.

[10] Fagone P,Patti F,Mangano K,et al. Heme oxygenase-1 expression in peripheral blood mononuclear cells correlates with disease activity in multiple sclerosis[J]. J Neuroimmunol,2013,4(13):1562-1568.

[11] Ahuja S,Kohli S,Krishnan S,et al. Curcumin: a potential therapeutic polyphenol,prevents noradrenaline-induced hypertrophy in rat cardiac myocytes [J]. J Pharm Pharmacol,2011,63(12):1604-1612.

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